AAT Bioquest PSA™ 成像工作流程,Power Styramide™ 信号放大 (PSA™) 的工作流程,与 IHC、ICC 和 ISH 程序的传统工作流程一样，PSA™ 成像易于执行，包括几个简单的过程。在此工作流程中，荧光二抗被 poly-HRP 二抗取代，唯一的额外步骤是与标记的 Styramide™ 一起孵育。
PSA™ 成像利用辣根过氧化物酶 (HRP) 催化活性在原位生成靶蛋白或核酸序列的高密度标记。与 IHC、ICC 和 ISH 程序的传统工作流程一样，PSA™ 成像易于执行，包括几个简单的过程。在此工作流程中，荧光二抗被 poly-HRP 二抗取代，唯一的额外步骤是与标记的 Styramide™ 一起孵育。
Power Styramide™ 信号放大 (PSA™) 的工作流程。通过与传统 ICC 和 IHC 方法相似的工作流程，PSA™ 试剂盒和 Styramide™ 试剂可以通过几个简单的步骤实现对所需目标的灵敏检测。
AAT Bioquest PSA™ 成像兼容 IHC、ICC、ISH 和流式细胞术,免疫细胞化学 (ICC),原位杂交 (ISH),流式细胞术,PSA™ 成像技术可适用于任何支持将 HRP 添加到其协议中的应用，并与免疫应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。当与传统的 IHC、ICC、ISH 和 FC 应用相结合时，PSA™ 成像显着提高了检测灵敏度，而不会损失图像分辨率或增加背景噪声。
PSA™ 成像技术可适用于任何支持将 HRP 添加到其协议中的应用，并与免疫应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。当与传统的 IHC、ICC、ISH 和 FC 应用相结合时，PSA™ 成像显着提高了检测灵敏度，而不会损失图像分辨率或增加背景噪声。
免疫细胞化学 (ICC)
HL-60 细胞的 CD45 表面受体染色。Hl-60 细胞用 4% 甲醛固定、透化并用 0.2 µg/mL 抗 CD45 一抗标记。然后用 iFluor™ 647 Styramide™ 对细胞进行染色，并使用 Cy5 滤光片组拍摄荧光图像。
原位杂交 (ISH)
使用生物素化的 PNA 探针通过原位杂交进行泛着丝粒染色。使用标准方案固定和透化 Jurkat 细胞。用链霉亲和素 HRP 偶联物检测每条染色体的着丝粒，并用 iFluor 488 Styramide 试剂显现。染色体用 DAPI 复染。
流式细胞术
使用 iF488 标记的山羊抗兔 IgG 法、酪胺法或苯乙烯胺法对 Jurkat 细胞中的 pAKT 进行流式细胞分析。与山羊抗兔 IgG-iFluor™ 488 直接染色相比，Styramide 扩增方法的信号增加了 10 倍，与 Alexa Fluor 488 酪胺染色相比增加了 5 倍。
| 山羊抗兔 IgG-iFluor 488 | |
| Alexa Fluor 488 酪胺 | |
| iFluor 488 苯乙烯酰胺 | |
| 不受控制的控制 |
PSA™ 成像增加一抗稀释度,Power Styramide™ 信号放大(PSA™)试剂盒,AAT Bioquest代理,在免疫染色应用中，来自 PSA™ 成像的灵敏度增强允许增加一抗稀释度，而不会牺牲检测灵敏度。
在免疫染色应用中，来自 PSA™ 成像的灵敏度增强允许增加一抗稀释度，而不会牺牲检测灵敏度。此外，增加一抗稀释度可减少非特异性背景信号，并克服因固定程序不良或靶标表达水平低而导致的免疫标记不足。
Power Styramide™ 信号放大 (PSA™) 试剂盒的灵敏度。HeLa 细胞被固定、透化并用不同浓度的兔抗微管蛋白一抗标记。制造商的建议是 1:500 稀释或 2 µg/ml。然后用我们的 iFluor™ 488 PSA™ 成像试剂盒中的试剂和山羊抗兔 IgG、Alexa Fluor® 488 标记的酪胺或 Alexa Fluor® 488 标记的山羊抗兔 IgG 对细胞进行染色。在相同条件下（使用 FITC 过滤器组并以相同的曝光时间进行分析）从每次处理中捕获细胞图像。测量并比较不同检测方法之间的相对荧光信号强度。
