Power Styramide™ 信号放大 (PSA™),
Power Styramide™ 信号放大 (PSA™) 是一种新型酶放大方法,用于检测细胞和组织中的低丰度靶标。通过将iFluor™ 染料的卓越亮度和光稳定性与 poly-HRP 介导的苯乙烯酰胺扩增相结合,PSA™ 成像产生明亮的荧光信号,其精度和灵敏度比传统免疫组织化学、免疫细胞化学和原位杂交显着更高(超过 100 倍)技巧。
iFluor™ 488 苯乙烯酰胺
Power Styramide™ 信号放大
与酪胺信号放大 (TSA)类似,PSA™ 成像使用分析物依赖性报告酶辣根过氧化物酶 (HRP)来催化标记的苯乙烯胺™ 底物原位共价沉积和结合到靶蛋白或核酸序列上。在过氧化氢(H 2 O 2),HRP 将标记的 Styramide™ 底物转化为高反应性、短寿命的 Styramide™ 自由基,可迅速与酶位点上和附近的酪氨酸残基结合。Styramide™ 自由基比酪胺自由基具有更高的反应性,使得使用 PSA™ 的成像比传统的 TSA 标记更快、更可靠、更灵敏。由于添加的标记 Styramide™ 沉积在 HRP 靶位附近,因此与扩散相关的分辨率损失最小。PSA™ 成像技术可以很容易地添加到任何允许将 HRP 集成到其协议中的应用程序中。此类应用包括 IHC、ICC、IF、原位杂交和 ELISA。
PSA™ 成像系统的优势
每个 HRP 标记物对多个 Styramide™ 底物的快速催化和共价沉积产生的 Power Styramide™ 信号放大转化为许多实际好处,包括简单性、增强的灵敏度和特异性以及与其他技术的兼容性。Styramide™ 自由基的更高反应性使得 Styramide™ 在 HRP 靶相互作用位点的标记更加稳健和迅速,从而产生比 TSA 更强的信号强度和更好的空间分辨率。
PSA™ 的主要特点:
- 低丰度目标的超灵敏检测,比 IHC、ICC 和 IF 方法高 100 倍
- 高荧光强度,比酪胺高 10 至 50 倍
- 与其他荧光标记、染色技术和 PSA™ 成像试剂盒兼容,用于多重分析
- 与辐射检测相比,PSA™ 自由基具有更高的反应性,可获得更快的结果和同等的灵敏度和分辨率
- 节省宝贵的抗体,PSA™ 标记可实现同等水平的灵敏度,同时显着减少一抗
- PSA™ 成像试剂盒易于使用,可为 100 次测试提供足够的试剂
iFluor™ 594 苯乙烯酰胺™
Alexa Fluor® 594 酪胺
使用 PSA™ 和 TSA 扩增方法对甲醛固定、石蜡包埋的荧光 IHC。人肺腺癌阳性组织切片用小鼠抗 EpCam 抗体染色,然后使用带有山羊抗小鼠 IgG(货号 45290)的 iFluor 594™ PSA™ 成像试剂盒进行 PSA™ 方法或使用 Alexa Fluor® 594 酪胺的 TSA 方法, 分别。使用 TRITC 滤镜组在相同的曝光时间下拍摄图像。细胞核用Nuclear Blue™ DCS1(货号17548)复染。
应用于靶抗原免疫标记的 PSA™ 检测方法的示意图。使用常规检测方法,用未标记的一抗和 HRP-二抗偶联物探测细胞或组织样品。HRP 催化标记的 Styramide™ 转化为高反应性 Styramide™ 自由基,这些自由基与酶位点上和附近的酪氨酸残基共价结合。