标签： OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶

NEB代理,常规 PCR,OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶,#M0509L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 常规 PCR

OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶

#M0509L 500 units

#M0509S 100 units

#M0509X 2,500 units

特性

 

OneTaq  聚合酶信息

延伸速率

1 kb/min

扩增长度

≤ 6 kb

保真度

＞ 2X Taq

Units/50 μl 反应体系

1.25 units

产物末端结构

3‘ A/平末端

3‘→5‘ 外切酶活性

有

5‘→3‘ 外切酶活性

有

随酶提供缓冲液

– OneTaq 标准反应缓冲液

– OneTaq GC 反应缓冲液

随酶提供 Enhancer

OneTaq High GC Enhancer

产品剂型

是否有热启动

是否需要激活

有
否

预混液

有

直接凝胶上样

有

PCR 试剂盒

有

应用

常规 PCR

是

T/A，U/A 克隆

是

菌落 PCR

是

概述

 OneTaq DNA 聚合酶是经过优化的 Taq DNA 聚合酶与 Deep Vent® DNA 聚合酶的混合物，可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3’→5’外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer 的组合使得无论模板的 GC 含量高低，都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶：OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体（aptamer）作为抑制剂，不仅使用方便，而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。
 
这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合，当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性，因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活，无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。
 
与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下表。
 
Quick-Load 剂型支持直接将 PCR 产物加到凝胶上，省去了 PCR 纯化步骤。
 
其它剂型：为了加样方便，OneTaq DNA 聚合酶与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择，High GC Enhancer 随 GC 缓冲液形式预混液一同提供。此外这些预混液还有 Quick-Load 的形式，可用于直接凝胶上样。

浓度

 浓度：5,000 units/ml

OneTaq 缓冲液选择指南

扩增片段 GC 含量

推荐的缓冲液

优化指南

＜ 50% GC

OneTaq 标准反应缓冲液

如果需要，可调整退火温度、引物/模板浓度等。

50-65% GC

OneTaq 标准反应缓冲液

可使用 OneTaq GC 反应缓冲液提高复杂片段的扩增能力。

＞ 65% GC

OneTaq GC 反应缓冲液

可采用 OneTaq GC 反应缓冲液和 10-20% OneTaq High GC Enhancer 提高复杂片段的扩增能力。

 

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 常规 PCR

以人与 C. elegans 的基因组 DNA 为模板，使用 OneTaq DNA 聚合酶扩增具有不同 GC 含量的序列。GC 含量标于胶图上方。M 为 1 kb DNA Ladder（NEB #N3232）。