单克隆抗体、多克隆抗体或两者的组合通常在 ELISA 测定中用作检测或捕获抗体。单克隆抗体本质上是单价的,对每个抗原的单个表位具有特异性。在所有 ELISA 形式中,单克隆抗体通常用作检测抗体。因为它们很少与其他蛋白质发生交叉反应,并且不太可能产生非特异性信号。相反,多克隆抗体是抗体的复杂混合物,可识别单个抗原中的多个表位。虽然它们通常在夹心 ELISA 测定中用作“捕获抗体”以尽可能多地去除抗原,但它们也可以用作检测抗体。多克隆抗体对批次间差异非常敏感,
用于 ELISA 的二级偶联物
酶偶联二抗或链霉亲和素偶联物经常用于间接和夹心 ELISA 测定。它们放大微弱信号的能力使它们在检测低表达抗原方面具有优势。
HRP 和 Poly-HRP 二抗
辣根过氧化物酶 ((HRP, Cat No. 11025) 通常与二抗或链霉亲和素偶联,用于间接或夹心 ELISA 测定。在 ELISA 中广泛采用 HRP 作为报告基因主要是由于三个因素。首先,HRP 具有放大微弱信号和增强低表达抗原的可检测性的能力。其次,与其他报告酶(例如碱性磷酸酶(~140 kDa))相比,HRP(~44 kDa)的相对较小的尺寸进一步提高了对样品的细胞内渗透,减少了空间位阻并将免疫反应性损失降至最低。第三,是 HRP 的高周转率和良好的稳定性,可以快速产生强烈的信号。AAT Bioquest 提供与 HRP 和 poly-HRP 偶联的高度纯化和交叉吸附的二抗。MegaWox™ poly-HRP 二次偶联物旨在在 ELISA 测定中提供高水平的灵敏度和低背景。在样本量有限或目标分子表达不佳的免疫测定中使用 MegaWox™ poly-HRP 偶联物。
HRP 二抗产品订购信息
货号 | 产品名称 | 单位尺寸 | |
11035 | MegaWox™ polyHRP-山羊抗小鼠 IgG 偶联物 | 1毫克 | |
11037 | MegaWox™ polyHRP-山羊抗兔 IgG 偶联物 | 1毫克 | |
16728 | HRP 标记的山羊抗小鼠 IgG (H+L) | 1毫克 | |
16793 | HRP 标记的山羊抗兔 IgG (H+L) | 1毫克 |
HRP 和 AP 链霉亲和素偶联物
当用于检测抗原的一抗被生物素分子标记时,酶标记的链霉亲和素偶联物用于 ELISA。链霉亲和素的四聚体构象使其能够以高亲和力和选择性结合多达四个生物素分子。这种多样性能够放大微弱信号并提高对中低丰度目标的检测灵敏度。链霉亲和素以即用型形式提供与 HRP 或 AP 偶联。
酶链霉亲和素偶联物产品的订购信息
货号 | 产品名称 | 单位尺寸 | |
16920 | HRP-链霉亲和素偶联物 | 1毫克 | |
16921 | AP-链霉亲和素缀合物 [链霉亲和素-碱性磷酸酶缀合物] | 1毫克 |