产品名称:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白纯化试剂盒
产品货号:786-630
英文名称:HOOK™ 6X His Protein Purification
产品品牌:G-Biosciences
产品规格:5
产品简介:
HOOK™ 6X His 蛋白纯化试剂盒允许从细菌培养物中纯化可溶性 6X His 标签蛋白。细菌首先被裂解细菌 PE LB™ 和 PE LB™-溶菌酶释放总可溶性蛋白质,同时保持蛋白质的结构和活性。6X His 标签蛋白通过固定化金属亲和层析 (IMAC) 纯化,使澄清的裂解液通过预装柱。
Bacterial-PELB™ 试剂盒已开发用于从细菌细胞中提取可溶性蛋白质。它是对基于溶菌酶的裂解的专有改进,它允许提取可溶性蛋白质并同时去除细胞裂解过程中释放的核酸(DNA 和 RNA)。Bacterial-PE LB™ 裂解液可消除粘度积聚,从而以较低的离心力实现有效澄清。
HOOK™ 6X His 蛋白纯化试剂盒可用于 镍 螯合固定化金属亲和层析 (IMAC) 柱或 钴螯合 IMAC 柱。与镍螯合树脂相比,钴螯合树脂对 6X His 标签的结合亲和力较低,这导致非特异性结合较少,并可能导致产量略低。
HOOK™ 6X His 蛋白纯化试剂盒经过优化,可产生 >10mg/250ml 的可溶性 His 标记蛋白培养物,纯度为 80-90%,具体取决于蛋白的表达水平、树脂类型、构象和溶解度特征。
产品特征
从约 250 毫升细菌中分离出 >10 毫克 His 标记的蛋白质
无需超声处理,随附裂解缓冲液和酶
可提供镍或钴树脂
产品组分:
货号 产品名称 规格
Bacterial PE-LB™ 100ml 100ml
PE LB™
-Lysozyme 2 x 1ml 2 x 1ml
Nickel Chelating Columns* 5
Cobalt Chelating Columns 5
His Binding/Wash Buffer 100ml 100ml
His Elution Buffer 100ml 100ml
产品应用:
用于从细菌中分离 6X His 标记的重组蛋白
产品使用说明;
在使用HOOK™6X His Protein纯化试剂盒之前,推荐对你的蛋白质的表达和溶解度水平进行估计。
正常表达蛋白,用Bacterial PE-LB™试剂裂解,澄清
SDS聚丙烯酰胺凝胶的离心和观察。
•重组蛋白表达的一个固有问题是溶解性。一些
在细菌中表达的蛋白质是不溶的,并定位于包涵体。
提供的细菌PE LB™可以分离包涵体(见附加协议)
这些可以用我们的包络体增溶(IBS)缓冲液或常用变性剂(8M尿素或6M胍)。
由此产生的可溶性蛋白可以用这个试剂盒,但变性剂和缓冲液中可能需要还原剂来维持蛋白质的溶解性。PELB™溶菌酶:PELB™溶菌酶包含40mg/ml溶菌酶(~80kU)添加800U/ml DNase和24U/ml RNase。我们建议使用PELB™溶菌酶,最终浓度0.1-1mg/ml。溶菌酶水平更高不会提高裂解效率,可能有抑制作用。
为了保持重组蛋白的完整性,建议使用蛋白酶抑制剂混合物在整个纯化过程中使用。的使用的净化技术依赖于金属螯合,因此要避免使用EDTA或其他金属螯合剂作为抑制剂的蛋白酶抑制剂混合物。我们推荐RecomProteaseARREST,蛋白酶抑制剂专为从细菌中纯化重组蛋白而设计的鸡尾酒ProteaseARREST,一种通用的蛋白酶抑制剂可选的EDTA。
•在此之前,树脂和缓冲液应达到室温平衡
产品名称:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白纯化试剂盒
产品货号:786-630
关于公司:
Geno科技公司的成立旨在简化生命科学研究。我们的主要目标是瞄准蛋白质研究的关键技术,并找到负担得起的方法来简化和改进这些技术。多年来,Geno技术公司已经扩展到其他研究领域,但我们的主要目标仍然是蛋白质,我们的主要目标”简化和改进这些技术”仍然成立。2010年,随着”蛋白质人”的演变,这一信息得到了强化,我们的标志性吉祥物和G-BioSciences品牌,Geno科技公司的注册商标。
G-Biosciences 的团队检查了特定实验技术的方方面面,从蛋白质提取到蛋白质纯化和检测,以确定我们可以瞄准的关键领域进行改进。因此,我们现在制造的一切,从简单的缓冲器在方便的浓度和大小,定制制造的设备,如管O-Dialyzer,增强和简化关键技术。我们重点研究的关键领域包括但不限于蛋白质检测、样品制备、电泳、西印、质谱测量、检测开发、抗体生产和蛋白质纯化。
G-BioScience现在为蛋白质和生命科学研究市场提供了数千种产品,所有这些产品的设计都希望使研究人员的实验室时间更简单、更实惠。