标签： fe

Nitroso-PSAP试剂货号：N010

Nitroso-PSAP试剂货号：N010
2-Nitroso-5-[N-n-propyl-N-(3-sulfopropyl)amino]phenol
CAS号：80459-15-0
商品信息
储存条件：0-5度保存
运输条件：室温
分子式：

C12H18N2O5S

分子量：

302.35

选择规格：
100mg
1g

产品概述

Nitroso-PSAP是检测Fe(II)的高度敏感性比色试剂，能与Fe(II)形成绿色复合物 (λmax=756 nm, ε=4.5×104)。该试剂适合于测定血清中Fe、Co、Ni、Cu的水平，在同样的检测条件下，检测范围从5 ppb-5 ppm。Nitroso-PSAP可用于流动注射分析。Nitroso化合物的工作pH范围在5.6-10.1，Co、Cu、Ni复合物的摩尔吸光率和最大波长分别为4.0×104(490 nm)、2.8×104(429 nm)和2.6×104(394 nm)。

Spectral Data of Nitroso-PSAP-Metal Complex

image.png

铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen货号：M489

铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen货号：M489
铁死亡荧光试剂 (Fe2+荧光法)
Mito-FerroGreen
商品信息
储存条件：-20度保存，避光
运输条件：室温

特点：

● 定位线粒体

● 更深层次铁离子探究

选择规格：
50μg*2

产品概述

研究证实铁是生物体内量最多的过渡金属元素。其参与多种生理活动。近几年，细胞内的游离铁离子由于具有很高的反应性，和细胞损伤、死亡有一定的关联而得到了越来越多的关注。在细胞内游离铁离子以稳定的Fe2+和 Fe3+形式存在。从细胞内的还原环境，金属转运体及Fe2+的水溶性考虑，认为揭示细胞内Fe2+的行为比Fe3+更重要。Mito-FerroGreen是一种新型荧光探针，用于检测线粒体 (铁硫簇和血红素蛋白的合成场所) 内亚铁离子Fe2+。

该产品已在岐阜药科大学药物化学实验室的 永澤秀子 和 平山祐 博士的指导下开发。Mito-FerroGreen和Fe2+反应后的荧光强度上升不可逆，与Fluo-3（货号：F019）这类可以实时监测钙离子的荧光探针有所不同。

测定原理

image.png

产品特点

铁离子检测试剂的选择

可以根据自己的实验方法和实验仪器选择检测试剂

 

FerroOrange Mito-FerroGreen
细胞内分布 细胞内 线粒体
荧光特性 λex : 543 nm、λem : 580 nm λex : 505 nm、λem : 535 nm
检测仪器 荧光显微镜 荧光显微镜 （FITC、GFP）
（滤镜）
检测对象 活细胞 活细胞
染色次数 24 μg可染色35 mm dish 17块板 50 μg可染色35 mm dish 5块板
（终浓度 1 μmol/l時） （终浓度 5 μmol/l時）

实验例

1.线粒体定位

为了确认Mito-FerroGreen的是否特异性地在线粒体内定位，与线粒体染色试剂（MitoBright Deep Red※）一同进行染色，实验结果证实了Mito-FerroGreen选择性地染色在线粒体内。

向HeLa细胞中添加5μmol/ l的Mito-FerroGreen和200 nmol/l的线粒体染色探针MitoBright Deep Red，并在CO2培养箱中培养30分钟，然后添加100μmol/ l的硫酸铁铵（II），并将混合后的细胞溶液在CO2培养箱中培养1小时后通过观察荧光。

1606291977965574.png

Mito-FerroGreen

激发波长：488 nm

发射波长：500-565 nm

MitoBright Deep Red

激发波长：640 nm

发射波长：656-700 nm

2.线粒体内的铁离子荧光成像

在含有血清的MEM培养基中接种HeLa细胞，并加入Mito-FerroGreen，通过荧光检测HeLa细胞众线粒体内的二价铁（左图）。而在添加了铁离子的HeLa细胞中，观察到了Mito-FerroGreen的荧光明显增强（中间图）。在添加了铁螯合剂的细胞中，几乎未观察到Mito-FerroGreen的荧光（右图）。 以这种方式，证实了线粒体中铁含量的差异和荧光强度的差异是成相关性的。

image.png

3.对二价铁离子的高度选择性和高信号

向1ml 50mmol/l HEPES Buffer（pH7.4）中加入2μl 1mol/l Mito-FroGreen、2μl 10mmol/l各种金属以及20μl 1mg/ml酯化酶，在室温下反应1小时后测定荧光强度。

激发波长：500 nm

发射波长：535 nm

image.png

4.适用于通用滤光片

Mito-FerroGreen的激发波长为488nm，最大激发波长可达505nm。

向3ml 50 mmol/l HEPES Buffer (pH7.4) 中加入 6μl 1mol/l Mito-FroGreen、6μl 10mmol/l硫酸铵铁（Ⅱ）以及20μl 1mg/ml酯化酶。在37℃下反应1小时后检测荧光强度。

激发波长：500 nm

发射波长：535 nm

image.png

参考文献

1) T. Hirayama,  S. Kadota, M. Niwa  and  H. Nagasawa, “A mitochondria-targeted fluorescent probe for selective detection of mitochondrial labile Fe(II)”, Metallomics., 2018, DOI: 10.1039/C8MT00049B

2) T. Issitt, E. Bosseboeuf, N. Winter, N. Dufton, G. Gestri, V. Senatore, A. Chikh, A. Randi, C. Raimondi, “Neuropilin-1 controls endothelial homeostasis by regulating mitochondrial function and iron-dependent oxidative stress via ABCB8”, iScience., 2018,DOI: 10.1016/j.isci.2018.12.005 .

3) E. E. Mon, F. Y. Wei, R. N. R. Ahmad, T. Yamamoto, T. Moroishi and K. Tomizawa, “Regulation of mitochondrial iron homeostasis by siderofexin 2 “, J Physiol Sci., 2018,doi:10.1007/s12576-018-0652-2.

4) M. Fujimaki, N. Furuya, S. Saiki, T. Amo, Y. Imamichi and N. Hattori, “Iron supply via NCOA4-mediated ferritin degradation maintains mitochondrial functions”, Mol. Cell. Biol.., 2019,doi: 10.1128/MCB.00010-19.

5) K. Tomita, M. Fukumoto, K. Itoh, Y. Kuwahara, K. Igarashi, T. Nagasawa, M. Suzuki, A. Kurimasa and T. Sato, “MiR-7-5p is a key factor that controls radioresistance via intracellular Fe2+ content in clinically relevant radioresistant cells.”, Biochem Biophys Res Commun.., 2019,doi: 10.1016/j.bbrc.2019.08.117.

6) Y. Wang and M. Tang, “PM2.5 induces ferroptosis in human endothelial cells through iron overload and redox imbalance”, Environ. Pollut., 2019, 264, doi: 10.1016/j.envpol.2019.07.105.

7) KF. Yambire, C. Rostosky, T. Watanabe, D. Pacheu-Grau, S. Torres-Odio,A. Sanchez-Guerrero,O. Senderovich, EG. Meyron-Holtz,I.Milosevic, J. Frahm, AP. West and N. Raimundo, “Impaired lysosomal acidification triggers iron deficiency and inflammation in vivo.”, Elife, 2019, 3, (8), doi:10.7554/eLife.51031.

8) H. Nishizawa, M. Matsumoto, T. Shindo, D. Saigusa, H. Kato, K. Suzuki, M. Sato, Y. Ishii, H. Shimokawa and K. Igarashi, “Ferroptosis is controlled by the coordinated transcriptional regulation of glutathione and labile iron metabolism by the transcription factor BACH1″,  J. Biol. Chem.,  2019,doi: 10.1074/jbc.RA119.009548.

9)Y. akashima, A. Hayano and B. Yamanaka, Metabolome analysis reveals excessive glycolysis via PI3K/AKT/mTOR and RAS/MAPK signaling in methotrexate-resistant primary CNS lymphoma-derived cells.”, Clin. Cancer Res., 2020, DOI:10.1158/1078-0432.

常见问题Q&A

Q1：是否可以对酵母进行染色吗？
A1：我们公司有酵母染色的实验例，染色的具体实验步骤请联系我们公司的销售人员。
Q2：推荐使用的滤光片波长是多少？
A2：检测时推荐的滤光片如下：

激发波长：450~500 nm

发射波长：515~550 nm

规格性状

性状：本品溶于乙腈、甲醇、二甲醇。

纯度（HPLC）：90.0%以上

荧光光谱：适合测试

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374
细胞亚铁离子检测荧光探针
FerroOrange
商品信息
储存条件：0-5度保存
运输条件：室温

特点：

● 荧光法高敏检测胞内二价铁

● 适合于多种检测仪器

● 铁死亡常见指标之一

选择规格：
1tube
3tubes

规格性状

性状：可溶于乙腈，甲醇和二甲基亚砜。

纯度（HPLC）：92.0%以上

荧光光谱：符合一致性

产品概述

铁是生物体内最丰富的过渡金属元素，它参与各种生理过程活动。 近年来，活细胞中的游离铁受到广泛关注， 游离铁最常以其稳定的氧化还原态存在，即亚铁离子 (Fe2+) 和铁离子 (Fe3+)。对研究者来说，在研究细胞内的还原环境，金属转运蛋白和Fe2+的水溶性时，了解Fe2+的行为比了解Fe3+的行为更为重要。FerroOrange作为一种新型的荧光探针，可对活细胞内的Fe2+进行荧光成像。FerroOrange和Fe2+反应后的荧光强度上升不可逆，与Fluo-3（货号：F019）这类可以实时监测钙离子的荧光探针有所不同。

原理

1609228465258966.png

FerroOrange检测胞内Fe2+

image.png

图为将2 μl的1 mmol/l FerroOrange和2 μl的10 mmol/l的各种金属离子添加到1 ml的50 mmol/l HEPES缓冲液（pH 7.4）中，并在室温下反应1小时后测量的荧光强度。

荧光特性

1606291280975547.png

Ex：543 nm   Em：580 nm

与其他染料共染

FerroOrange与各种细胞内的染色试剂共染

用各种染色试剂染色HeLa细胞，清洗细胞。然后将FerroOrange添加到细胞中，并用荧光显微镜观察。

与ER染色试剂共染 

＜检测条件＞

FerroOrange: Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm

ER Tracker Green（ER染色试剂）: Ex: 488 nm、Em: 510-555 nm

标尺: 10 μm

1612748348946869.png

与线粒体染色试剂共染

＜检测条件＞

FerroOrange: Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm

MitoBright Deep Red（线粒体染色试剂）: Ex: 640 nm、Em: 650-700 nm

标尺: 10 μm

1612748366578393.png

与高尔基体染色试剂的共染

＜检测条件＞

FerroOrange: Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm

BODIPY FL（高尔基体染色试剂）: Ex: 488 nm、Em: 510-555 nm

标尺: 10 μm

1612748381863155.png

铁离子试剂的选择

           FerroOrange          Mito-FerroGreen
 存在部位                      细胞内                      线粒体
 荧光特性    λex : 543 nm、λem : 580 nm    λex : 505 nm、λem : 535 nm
 检测仪器    荧光显微镜、荧光酶标仪（Cy3）       荧光显微镜（FITC、GFP）
 测定对象                   活细胞                  活细胞
 检测次数      24μg可染色17次35mm dish
（终浓度为1μmol/l）		      50μg可染色5次35mm dish
（终浓度为5μmol/l）

操作步骤

1.细胞接种于荧光培养皿中，在37℃，5% CO2培养箱中孵育过夜。

2.弃去上清液，并用HBSS或无血清培养基洗涤细胞3次。

3.更换含有药物的培养基，在37℃，5% CO2培养箱中孵育。

* 请根据药物特性优化孵育时间。

4.加入浓度为1 μmol/l的FerroOrange工作液，在37℃，5% CO2培养箱中孵育。

* 加入FerroOrange染色剂后请立即观察，不要洗涤。

5.在荧光显微镜下观察细胞。

高灵敏度检测胞内铁离子

使用HeLa细胞，通过FerroOrange确认细胞内Fe2+的变化

与对照组的细胞相比，用硫酸亚铁 (II) 铵处理的HeLa细胞的FerroOrange荧光强度增加。 相反，在用Bpy处理的细胞中，其荧光强度降低。

因此，证明FerroOrange与细胞内Fe2+反应。

 

A: 对照组

B: 铁剂·硫酸亚铁(II) 铵（终浓度100umol/l）处理

C: 铁螯合剂·2,2′-Bipyridyl (Bpy)（终浓度100umol/l）处理

1606291604128011.png

 

检测条件 Ex/Em = 561 nm/570-620 nm  比例尺：20 μm

常见问题Q&A

Q1:FerroOrange由于是活细胞荧光探针，如果铁死亡发生，导致细胞膜破裂后，荧光是否存在？
A1:由于FerroOrange是活细胞探针，对死细胞无法发挥出探针的正常性能。
Q2: FerroOrange只会检测游离铁吗？还是某些如铁硫蛋白里的结合铁，都可以检测吗？
A2：FerroOrange只检测游离的二价铁
Q3: 铁死亡研究中，Fe2+和Fe3+的检测哪个更重要。铁死亡的时候，总Fe都会变吗？还是说只有Fe2+/Fe3+之间的转化。
A3:二价铁作为线粒体的所需物质在细胞质的“铁池”内积蓄，它在DNA合成，细胞周期调控，线粒体内ATP的产生等起重要作用。为了防止损伤细胞,多余的二价铁会与铁蛋白结合生成没有氧化还原性的三价铁并储存。或者通过膜铁转运蛋白排出到细胞外。
Q4: FerroOrange能否用于固定处理之后的样本?
A4:不能用于石蜡切片。

试剂能尝试于温和条件下固定处理之后的样本，如多聚甲醛（PFA，终浓度3%）在4°C中培养10 min。与未固定的样本相比，固定20 min以上或室温固定后的样本的荧光强度会明显降低。请注意本探针可能很难于固定样本中使用，必须先进行染色，然后做尝试。
Q5:本探针适合于什么检测方式？
A5:见表格

image.png

我们建议使用绿色激光（Ex:532 nm）激发FerroOrange
Q6:染色时需要注意什么？
A6：注意如下，

1.FerroOrange染色后的对培养基的更换。

染色后无需清洗工作液，通常血清中含有铁离子，请注意使用不含血清的培养基，所以染色后即使细胞外有残留的FerroOrange，但是因为细胞外没有血清中铁离子的影响，也不会产生背景荧光的问题。

2.对照实验。

为了检查铁检测的实验条件，我们建议准备加入铁螯合试剂Bpy(2,2`-bipyridine)或铁(硫酸铵铁(II))的样品,并观察FerroOrange荧光强度的变化。

3.细胞难以染色(灵敏度低)时的办法。

根据细胞种类的不同，染色程度也有差异。

使FerroOrange working solution浓度高于推荐的1 µmol/l进行染色。建议在1-5 µmol/l范围内染色。
Q7:使用荧光酶标仪的操作步骤
A7：请参考下面的实验例子进行测量。

<测定样品>。

样品A：无添加剂(仅HeLa细胞)。

样品B：添加了铁螯合试剂2,2`-bipyridyl(Bpy)的HeLa细胞。

样品C：添加铁(硫酸铵铁)的HeLa细胞。

<测量操作>。

1.在96孔黑板(透明底)上接种100 µl HeLa细胞悬液，使其达到10,000 cells/well，在37℃  5%CO2 培养箱中过夜培养。

2.样品C的细胞用MEM(不含FBS)100 µl洗涤3次。

3.向样品C中添加100 μl硫酸铵铁(II)/MEM(不含FBS) (最终浓度: 100 µmol/l)，在37℃  5%CO2培养箱中静置30分钟。

4.用100 µl HBSS洗涤所有孔的细胞3次。

5.向样品A和C中添加100 μl的1 µmol/l FerroOrange working solution ，向样品B中添加100 μl含有FerroOrange(最终浓度:1 µmol/l)和Bpy(最终浓度:100 µmol/l)的HBSS溶液，在37℃ 5%CO2培养箱中培养30分钟。

6.用多功能读板器检测各样品的荧光强度(Ex:543 nm,Em:580 nm)。

image.png

Q8：推荐的滤光片
A8: 激发滤光片:530-565 nm

发射滤光片:570-620 nm

铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen货号：M489

铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen货号：M489
铁死亡荧光试剂 (Fe2+荧光法)
Mito-FerroGreen
商品信息
储存条件：-20度保存，避光
运输条件：室温

特点：

● 对二价铁离子的高度选择性和高灵敏度

● 适用于通用滤光片

选择规格：
50μg*2
铁死亡检测方案
产品概述

研究证实铁是生物体内量最多的过渡金属元素。其参与多种生理活动。近几年，细胞内的游离铁离子由于具有很高的反应性，和细胞损伤、死亡有一定的关联而得到了越来越多的关注。在细胞内游离铁离子以稳定的Fe2+和 Fe3+形式存在。从细胞内的还原环境，金属转运体及Fe2+的水溶性考虑，认为揭示细胞内Fe2+的行为比Fe3+更重要。Mito-FerroGreen是一种新型荧光探针，用于检测线粒体 (铁硫簇和血红素蛋白的合成场所) 内亚铁离子Fe2+。

该产品已在岐阜药科大学药物化学实验室的 永澤秀子 和 平山祐 博士的指导下开发。Mito-FerroGreen和Fe2+反应后的荧光强度上升不可逆，与Fluo-3（货号：F019）这类可以实时监测钙离子的荧光探针有所不同。

测定原理

image.png

产品特点

铁离子检测试剂的选择

可以根据自己的实验方法和实验仪器选择检测试剂

 

FerroOrange Mito-FerroGreen
细胞内分布 细胞内 线粒体
荧光特性 λex : 543 nm、λem : 580 nm λex : 505 nm、λem : 535 nm
检测仪器 荧光显微镜 荧光显微镜 （FITC、GFP）
（滤镜）
检测对象 活细胞 活细胞
染色次数 24 μg可染色35 mm dish 17块板 50 μg可染色35 mm dish 5块板
（终浓度 1 μmol/l時） （终浓度 5 μmol/l時）

实验例

1.线粒体定位

为了确认Mito-FerroGreen的是否特异性地在线粒体内定位，与线粒体染色试剂（MitoBright Deep Red※）一同进行染色，实验结果证实了Mito-FerroGreen选择性地染色在线粒体内。

向HeLa细胞中添加5μmol/ l的Mito-FerroGreen和200 nmol/l的线粒体染色探针MitoBright Deep Red，并在CO2培养箱中培养30分钟，然后添加100μmol/ l的硫酸铁铵（II），并将混合后的细胞溶液在CO2培养箱中培养1小时后通过观察荧光。

1606291977965574.png

Mito-FerroGreen

激发波长：488 nm

发射波长：500-565 nm

MitoBright Deep Red

激发波长：640 nm

发射波长：656-700 nm

2.线粒体内的铁离子荧光成像

在含有血清的MEM培养基中接种HeLa细胞，并加入Mito-FerroGreen，通过荧光检测HeLa细胞众线粒体内的二价铁（左图）。而在添加了铁离子的HeLa细胞中，观察到了Mito-FerroGreen的荧光明显增强（中间图）。在添加了铁螯合剂的细胞中，几乎未观察到Mito-FerroGreen的荧光（右图）。 以这种方式，证实了线粒体中铁含量的差异和荧光强度的差异是成相关性的。

image.png

3.对二价铁离子的高度选择性和高信号

向1ml 50mmol/l HEPES Buffer（pH7.4）中加入2μl 1mol/l Mito-FroGreen、2μl 10mmol/l各种金属以及20μl 1mg/ml酯化酶，在室温下反应1小时后测定荧光强度。

激发波长：500 nm

发射波长：535 nm

image.png

4.适用于通用滤光片

Mito-FerroGreen的激发波长为488nm，最大激发波长可达505nm。

向3ml 50 mmol/l HEPES Buffer (pH7.4) 中加入 6μl 1mol/l Mito-FroGreen、6μl 10mmol/l硫酸铵铁（Ⅱ）以及20μl 1mg/ml酯化酶。在37℃下反应1小时后检测荧光强度。

激发波长：500 nm

发射波长：535 nm

image.png

PACKTEST的共立理化学研究所,PACKTEST 二价铁


PACKTEST 二价铁

类型: WAK-Fe2+

  • 排水管理
  • 工序和质量控制
  • 饮用水检验
  • 环境调查
  • 教材与自由研究

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

本产品可以通过以工厂排水和环境水为首, 用简单的操作测量各种测试水中的2价离子状态的铁(Fe2+)。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 邻菲咯啉比色法
测量刻度 0.2, 0.5, 1, 2, 5, 10 mg/L
测量时间 30 秒
是否可在海水中使用 ○
内容物 软管 50个 (5个装的层压袋 10包), 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

DOCUMENTS 文件

PACKTEST 二价铁 使用说明

RELATED PRODUCTS 相关产品

PACKTEST 二价铁

PACKTEST 专用杯

PACKTEST 二价铁

PACKTEST 二价铁

PACKTEST 二价铁

PACKTEST 二价铁