DOJINDO同仁化学,细胞凋亡检测试剂盒,AD11-50assays,Annexin V 633 Apoptosis Detection Kit,碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种核酸染料，PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此Annexin V和PI结合使用，可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。
同仁化学研究所创始于1913年，前身为同仁堂局，以研发生产医药为主。1946年成立了同仁药化学研究所，在研发药-物的同时，开始研制生产化学试剂。1978年正式更名为同仁化学研究所，专门致力于高、精、尖化学试剂的研发生产。CCK-8试剂盒是同仁化学研究所研发知名的产品，由于灵敏度高，检测方便被国内外科研人员广泛用于细胞增殖毒性检测及药-物筛选。
同仁化学研究所根据客户需要，不断加大研发投入，陆续成功开发了：
1、检测细胞损伤—乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒；
2、检测线粒体自噬的试剂；
3、检测细胞衰老的相关试剂；
4、检测单线态氧的试剂；
5、标记微量蛋白（10 μg）的系列抗体标记试剂盒；
6、检测体内H2S的相关试剂
同仁化学研究所除了生产开发试剂之外，还生产和销售诊断试剂原料。是日本最大的专业研发和生产诊断试剂的公司。产品不仅销售于日本市场，还远销中国和欧美等国家。为了适应世界高新技术领域的快速发展和全球经济一体化的要求，1996年同仁化学研究所在美国首都华盛顿郊外的高科技区成立了分公司——同仁分子技术公司。2001年在荷兰首都阿姆斯特丹开设了同仁化学欧洲办事处。2011年改在德国慕尼黑注册成立了同仁化学欧洲分公司。同仁化学研究所以优异的产品品质和上等的服务获得了全世界客户的信赖。同仁化学研究所在提供产品的同时，还提供完善的技术支持。同仁化学研究所的服务理念就是最大程度地满足客户的需要。
同仁化学研究所在日本获得了ISO9001认证（ISO9001审查登陆号：ASR-Q1602)
细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit
产品概述
细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而在抑癌基因p53出现问题时，凋亡就不会诱导发生，从而导致癌细胞的不断增长。细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。
原理
Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜特异性结合，因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。用红色荧光633标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种核酸染料，PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此Annexin V和PI结合使用，可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。
荧光参数
流式细胞仪检测
1. 加样到流式细胞仪检测，
633：激发波长Ex: 633 nm；
发射波长Em: 650-670 nm。
PI：激发波长Ex: 488 nm；
发射波长Em: 564-606 nm。
2. 633的红色荧光通过633通道(FL4)检测;
PI的红色荧光通过PI通道 (FL2或FL3)检测 (建议使用FL3)。
设定对照
1. 未染色细胞。
2. Annexin V, 633染色细胞 (没有PI)。
3. PI染色细胞 (没有Annexin V, 633)。
荧光显微镜检测
将细胞悬液滴到玻片上，置于显微镜上使用合适的滤光片检测。
* 由于EDTA会对细胞膜的特定部位有损伤，建议使用不含EDTA的胰酶消化贴壁细胞
注意事项
1. Annexin V, 633和PI均对光敏感。所有染色过程和培养过程均需避光。
2. 若细胞收集过程中使用胰酶，需设法去除残留的胰酶，这些胰酶会消化并降解Annexin V, 633，最终导致染色失败。
3. 用 APC和PE通道检测基本不用调节荧光补偿，但是如果细胞中还有其它荧光，例如细胞中有GFP，GFP荧光会影响PI通道的信息采集，需要调节荧光补偿。
