标签： DNA

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶,快速去磷酸化试剂盒#M0508L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

快速去磷酸化试剂盒 (停产有替代)

#M0508L 500 次反应

#M0508S 100 次反应

特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化
 克隆载体去磷酸化，防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

停产通知

 请注意：该产品已停产，库存售完为止，替代产品为M0525

概述

快速去磷酸化试剂盒中的快速小牛肠碱性磷酸酶（CIP）是热敏重组 CIP。快速 CIP 非特异性的催化 DNA 和 RNA  5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，快速 CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTPs 和 dNTPs）。快速 CIP 能去除DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，其应用广泛。在克隆中，该酶对线性载体去磷酸化，防止自连。快速 CIP 10 分钟即可使 5´ 突出端、凹陷端和平末端去磷酸化。该酶还可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTPs，用于制备测序模板和 SNP 分析。
不像野生型 CIP，快速 CIP 可以热失活，80℃ 2 分钟即可完全不可逆的热失活，从而在连接和末端标记前没必要除去该酶。
快速去磷酸化试剂盒包括：
– CutSmart 缓冲液
– 快速小牛肠碱性磷酸酶（CIP）

质保声明

快速去磷酸化试剂盒经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

贮存与使用

存储温度

-20°C 

注意事项

1.      与大部分的磷酸酶一样，快速 CIP 的活性依赖于 Zn2+ 和 Mg2+。该酶在配方中，已经将锌原子结合到活性中心，因此，反应时无需添加额外的锌离子或其他辅助因子。

2.      CIP 在 1X NEBuffer 1.1、2.1、3.1 和 NEBuffer 1、2、3、4中均有活性。

3.      快速 CIP 在一价盐离子存在时，其活性可被增强。

4.      金属螯合剂 (如 EDTA )、无机磷酸盐和磷酸盐类似物等可抑制快速 CIP 活性。

5.      还原剂(如 DTT、β-巯基乙醇)的存在可抑制快速 CIP 活性。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

1.      Weissig, H. et al. (1993). Biochem. J. 290, 503-508.

2.      Manes, T (1998). J. Biol. Chem.. 273, 23353-23360. 

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch RNase A                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3018L
1 ml
789.00
有
无
有
有
有

      


浓度

浓度 20mg/ml   规格 1ml/(2*0.5ml)

概述

Monarch RNase A 是 Monarch 基因组 DNA 提取试剂盒（NEB＃T3010）的一个组份，可用于纯化多种样品类型的基因组 DNA。 RNase A 处理为纯化过程中的可选步骤，可去除残留 RNA。这种高品质的酶是从牛胰腺中提取的，不含 DNase、蛋白酶和 DNA。 以 20 mg/ml 的溶液形式提供（ 50％ 甘油，50 mM Tris-Cl，pH 7.4）。

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

快速 CIP                             

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货 号
规 格
价 格(元)

#M0525L
5,000 units
5,289.00
有
无
有
有
有

#M0525S
1,000 units
1,099.00
有
有
有
有
有

#M0525V
500 units
589.00
有
有
有
有
有

      


特性

快速且不可逆的热失活，节省纯化步骤
贮存稳定性优于野生型酶
快速 CIP 反应时无需加入锌等额外添加剂因此建立反应速度更快反应时间更短仅 10分钟
反应条件灵活，兼容任何限制性内切酶缓冲液，无需纯化
活性更高，所需酶量更少，降低单次反应成本
无需备有多个磷酸酶，快速 CIP 可从 DNA、RNA 和 dNTPs 中去除 5 ‘ – 和 3 ‘ – 磷酸基
降解 PCR 产物中未掺入的 dNTP，提高 DNA 测序和 SNP 分析质量
重组酶保证纯度、批间一致性和更高性价比

概述

快速 CIP （M0525） 是重组表达的热敏小牛肠碱性磷酸酶（CIP）。本产品是小牛肠碱性磷酸酶（CIP，M0290）和快速去磷酸化试剂盒（M0508）的替代产品。

快速 CIP 催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，快速CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。快速 CIP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以快速作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端，反应时间仅需 10 分钟。快速 CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP分析

与野生型 CIP 相比，快速 CIP 在 80°C 加热 2 分钟即可 100% 不可逆热失活，无需加入任何其他试剂如镁离子、EDTA 等。因此在连接或者末端标记前无需纯化处理。

来源

 小牛肠碱性磷酸酶基因克隆自小牛肠粘膜并在毕赤酵母中表达。

反应条件

 

 1X CutSmart 反应缓冲液

[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac）2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
 

质保声明

 

 快速 CIP 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

详情请登陆 https://www.neb.com/products/m0525-quick-cip#Product%20Information

单位定义

 1 单位指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐（PNPP）水解成对硝基苯酚所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 https://www.neb.com/products/m0525-quick-cip#Product%20Information

浓度

 5000 units/ml

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

 关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375，请登陆 https://www.neb.com/products/m0525-quick-cip#Product%20Information

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® 高分子量 DNA 提取试剂盒（细胞和血液）                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3050L
50 preps
4,799.00
无
无
无
无
无

#T3050S
5 preps
839.00
无
无
有
无
无

      


特性

Ÿ 用于从细胞和血液中提取高分子量 DNA

Ÿ 提取纯化的 DNA 片段大小达到 Mb 范围

Ÿ 通过改变裂解过程中的离心速度，可轻松调节提取 DNA 的片段大小

Ÿ 操作流程简单、便捷（细胞样品 30 分钟，血液样品 60 分钟）

Ÿ  获得的 DNA 产量、纯度和完整性极佳

Ÿ 高效去除 RNA

Ÿ 快速、高效的洗脱

Ÿ 包含 RNase A 和蛋白酶 K

Ÿ 是长片段测序的理想选择

产品说明

Monarch® 高分子量 DNA 提取试剂盒（细胞和血液）为从细胞和血液中提取完整的高分子量（HMW） gDNA 提供了快速的操作流程。该试剂盒利用标准的实验仪器，将以下步骤整合优化，加速了提取过程。实验流程包括：将细胞温和裂解、根据需要提取长度不同的 DNA 片段、以及将 DNA 附着于大玻璃珠表面。根据标准流程提取的 DNA 在 50-250 kb 之间，如果将离心速度降到最低，提取的 DNA 可达 Mb 范围。纯化后的 DNA 产量和纯度极高，且几乎完全不含 RNA。细胞样品的提取时间仅为 30 分钟，血液样本需要红细胞裂解，可在 60 分钟内提取完成。A260 / A280 检测纯度为 1.80-1.90，A260 / A230 检测纯度为 2.2-2.5，实验操作简单、重复性好，纯化后的 HMW DNA 适用于多种下游应用，包括长片段测序（Oxford NanoporeTechnologies®和 PacificBiosciences®），光学图谱（BionanoGenomics®）和 Linked-Reads 基因组组装。

图 1：使用 Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒从细胞中提取纯化 HMW DNA 的操作流程
 
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图 2：使用 Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒从血液中提取纯化 HMW DNA 的操作流程

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图 3：Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒从血液和细胞中提取 HMW DNA 的重复性好

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使用 Monarch® 高分子量 DNA 提取试剂盒（细胞和血液）提取 DNA。提取样品为 1 x 106 新鲜 HEK293 细胞和 500 µl 新鲜人血样，按照试剂盒说明使用电泳图上方标注的离心速度进行制备。从平行试验样本中分别取 500 ng DNA 产物通过 PFGE 分离（在 BioRad® CHEF-DR® III 系统上，使用 1％ 琼脂糖凝胶，6 V / cm，13℃ 电泳 20 小时，切换时间为 0.5-94 秒）。各样品的产量和纯度见下表标注。分子量标准为 Lambda PFG Ladder（NEB＃N0341）。
 
图 4：在从细胞和血液中提取 HMW 基因组 DNA 的裂解过程中，使用不同的离心速度可调节提取片段长度
 
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将 1 x 106 HEK 293细胞和 500 μl 新鲜人血样一式两份提取 HMW DNA。在裂解步骤中，按照图中标注的速度离心样品，以控制 DNA 的片段化。从平行实验样本中取等量的 DNA 产物（细胞：500 ng；血液：650 ng）通过 PFGE 分离（在 BioRad® CHEF-DR® III 系统上，使用 1％ 琼脂糖凝胶，6 V / cm，13℃ 电泳 20 小时，切换时间为 0.5-94 秒）。各样品的产量、纯度和 DIN 值见下表标注。分子量标准为 Lambda PFG Ladder 和 Lambda DNA-Hind III 消化 (NEB #T3041 and #N3012) 。
 
图 5：细胞和血液样本上样量与 DNA 产量的线性相关性
 
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 根据说明书操作方案，将 HEK293 培养细胞和来自不同供体的新鲜人血样作为样品提取 HMW DNA 并记录产量数据，裂解步骤中离心速度为 2,000 rpm。将原始样品稀释成 5 个不同的浓度，以覆盖建议上样量范围。细胞样品（≤5×105）和血液样品（<500 µl）使用低样品量推荐的上样体积进行纯化。在测量范围内，上样量与产量呈高度线性相关。

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 特殊PCR,EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶,#M0490L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 特殊PCR

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶

#M0490L 500 次反应（50 μl 反应体系）

#M0490S 100 次反应（50 μl 反应体系）

相关产品

EpiMark 重亚硫酸盐转化试剂盒

EpiMark 聚合酶信息

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 特殊PCR

概述

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶是重亚硫酸盐处理的 DNA 扩增操作的绝佳选择。该酶是 Taq DNA 聚合酶和一种对温度敏感的适配体抑制剂的混合物。该抑制剂能够与聚合酶可逆结合，在 45℃ 以下抑制聚合酶活性，而在 PCR 热循环条件下又可以释放聚合酶，所以该酶可以在室温下操作却不需要额外高温步骤来激活聚合酶。

来源

来源于 E. coli 菌株，该菌株携带有来自 Thermus aquaticus YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。

浓度

5,000 units/ml。

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶,无机焦磷酸酶Yeast#M2403L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

无机焦磷酸酶（Yeast）

#M2403L 50 units

#M2403S 10 units

特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制 

概述

无机焦磷酸酶（酵母）催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。

P207–4 + H20 → 2HP04–2 

来源

无机焦磷酸酶（酵母）纯化自重组 E. coli 菌株，携带有从酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌（Mycobacterium xenopi）GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix（现为 Quidel公司的全资子公司）研发，由 New England Biolabs 生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。 

浓度

100 units/ml。 

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有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。 

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® gDNA Nuclei Prep & Lysis Buffer Pack                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3054L
1 Pack (15.6 ml of each)
779.00
有
无
无
无
无

      


Advantages and Features

 NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

Product Information

 The Monarch gDNA Nuclei Prep & Lysis Buffer Pack contains two lysis buffers used in the Monarch HMW DNA Extraction Kit for Cells & Blood (NEB #T3050). The Nuclei Prep Buffer is a mild lysis buffer used first to lyse the cell membrane and release the contents of the cytoplasm while the nuclei are kept intact. It is used pre-mixed with the RNase A enzyme included in the kit. After the RNA from the cytoplasm is digested by RNase A, the Nuclei Lysis Buffer, pre-mixed with the included Proteinase K, is used to lyse the nuclei and release the HMW genomic DNA. This two-step lysis ensures that RNA in the cytoplasm is effectively degraded before the viscous genomic DNA from the nuclei is released. 20 ml of each buffer is included in this buffer pack. The Nuclei Prep Buffer is used chilled to 4°C, and it can be stored at 4°C for convenience if desired.

Properties & usage

Storage Temperature
25°C

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 特殊PCR,LongAmp® 热启动 Taq DNA 聚合酶,#M0534L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 特殊PCR

LongAmp® 热启动 Taq DNA 聚合酶

#M0534L 2,500 units

#M0534S 500 units

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LongAmp® Taq PCR 试剂盒

LongAmp Taq 聚合酶信息

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 特殊PCR

概述

LongAmp Taq DNA 聚合酶是 Taq 和 Deep Vent DNA 聚合酶的优化混合，相比单用 Taq DNA 聚合酶，它能以更高的保真度扩增出更长的 PCR 产物。

LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶

LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶利用了一种特定合成的核酸适配体，它能够与酶可逆结合，当温度低于 45℃时抑制聚合酶活性，正常的热循环条件下释放聚合酶。

其它剂型

为了加样方便，LongAmp Taq 与 Long Amp 热启动 Taq DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。LongAmp Taq PCR 试剂盒包含 LongAmp Taq DNA 聚合酶（2,500 units/ml）、dNTP 混合液（10 mM）、LongAmp Taq 反应缓冲液套装（5X）、MgSO4（100 mM）和无核酸酶污染的水。

浓度

2,500 units/ml。

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NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 特殊PCR

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® Precipitation Enhancer                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3055L
10 ml
439.00
无
无
无
无
无

      


Advantages and Features

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

Product Information

 The Monarch Precipitation Enhancer Solution, supplied as a component of the Monarch HMW DNA Extraction Kit for Cells & Blood (NEB #T3050), is a salt-based solution that facilitates the precipitation of DNA onto the Monarch DNA Capture Beads (NEB #T3005) during HMW DNA extraction from cells and blood. It is supplied in 2 bottles of 5 ml.

Properties & usage

Storage Temperature
25°C

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , PCR 聚合酶,Vent® DNA 聚合酶,#M0254L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 其它 PCR 聚合酶

Vent® DNA 聚合酶

#M0254L 1,000 units

#M0254S 200 units

#M0254V 100 units

相关产品

Vent® (exo–) DNA 聚合酶。

Vent/Deep Vent 聚合酶信息

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 其它 PCR 聚合酶

概述

Vent DNA 聚合酶是较早应用于 PCR 的一种高保真耐热 DNA 聚合酶，其保真度比 Taq DNA 聚合酶高 5 倍。该酶具有高保真性的原因，部分是由于其自身具有 3´ →5´ 核酸外切酶校读活性。在 95℃ 温育 1 小时后，仍具有 90% 以上的聚合酶活性。
Vent (exo-) DNA 聚合酶是 Vent DNA 聚合酶经基因工程改造而得，去除了 3´ →5´ 核酸外切酶校读活性，其保真度有所降低，大约比 Taq DNA 聚合酶高 2 倍。

来源

Vent DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株，该菌株携带有来自古菌 Thermococcus litoralis 的 Vent DNA 聚合酶基因。Vent (exo-) DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株，该菌株携带有 Vent (D141A/E143A)DNA 聚合酶基因，此酶为天然酶经过基因工程改造而得。

浓度

2,000 units/ml。

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有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 其它 PCR 聚合酶

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® gDNA Elution Buffer II                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3056L
24 ml
499.00
无
无
无
无
无

      


Advantages and Features

 NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

Product Information

 The Monarch gDNA Elution Buffer II is supplied as a component of the Monarch HMW DNA Extraction Kits (NEB #T3050 and T3060). It is formulated for long term storage of genomic DNA and is made of 10mM Tris, pH 9.0, 0.5 mM EDTA.

Properties & usage

Storage Temperature
4°C

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,微球菌核酸酶#M0247S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

微球菌核酸酶

#M0247S 320,000 gel units

特性

 蛋白质制备中降解核酸
 体外翻译
 在非机械细胞裂解液制备时降低细胞裂解液的粘性
 染色质结构分析
 快速 RNA 测序
 ChIP 分析 

概述

微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到，可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内，微球菌核酸酶均有活性，无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物，其最适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA 和 RNA 底物产生带有 3´ 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。 

来源

重组 E. coli 菌株，含有微球菌核酸酶（GeneID：3238436）和麦芽糖结合蛋白（MBP）的融合基因。融合蛋白去除 MBP 并经纯化获得微球菌核酸酶。 

反应条件

1X 微球菌核酸酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.9 @ 25℃），5 mM CaCl2]，加入 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。 

质保声明

微球菌核酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

（Kunitz 单位）1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内催化生成能在 260 nm 处增加 1 个 OD 值的酸溶性寡核苷酸所需的酶量。
（琼脂糖凝胶单位）1 单位指 37℃ 条件下，15 分钟内消化 1 μg Lambda 基因组 DNA，使低分子量 DNA 片段（100-400 bp）在 1.2% 的琼脂糖凝胶上消失所需的酶量。
注意：10,000 个琼脂糖凝胶单位约等于 1,000 个Kunitz 单位。

浓度

2 X 106 gel units/ml。 

注意事项

微球菌核酸酶的活性需要 1-5 mM Ca2+。微球菌核酸酶的活性范围为 pH 7-10，盐离子浓度低于 100 mM。加入过量 EGTA 可使酶失活。 

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NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , 其它 PCR 聚合酶,Deep Vent® DNA 聚合酶,#M0258L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 其它 PCR 聚合酶

Deep Vent® DNA 聚合酶

#M0258L 1,000 units

#M0258S 200 units

相关产品

Deep Vent® (exo–) DNA 聚合酶

概述

Deep VentR DNA 聚合酶是一种高保真的耐热 DNA 聚合酶，具有高保真性的原因，部分是由于其自身具有 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。Deep VentR DNA 聚合酶比 VentR DNA 聚合酶在 95℃ 到 100℃
之间更稳定，其在 100℃ 的半衰期是 8 小时。
Deep VentR (exo–) DNA 聚合酶是利用基因工程技术去除了 Deep VentR DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶校读活性而得。

来源

Deep VentR DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株，该菌株携带有来自 Pyrococcus species GB-D 的Deep VentR DNA 聚合酶基因。Deep Vent (exo–) DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株，该菌株携带有 Deep Vent (D141A/E143A) DNA 聚合酶基因，此酶为天然酶经过基因工程改造而得。

浓度

2,000 units/ml。

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有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® 高分子量 DNA 提取试剂盒（组织）                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3060L
50 preps
5,399.00
有
无
无
无
无

#T3060S
5 preps
899.00
有
无
无
无
无

      


特性

·        用于从组织、细菌和其它样品（酵母、昆虫、两栖动物）中提取高分子量 DNA

·        从软组织和细菌中提取纯化的 DNA 片段大小达到 Mb 范围

·        对于一些样品，通过改变裂解过程中的离心速度，调节提取 DNA 的片段大小

·        操作流程简单、便捷（组织和细菌样品 90 分钟）

·        获得的 DNA 产量、纯度和完整性极佳

·        快速、高效的洗脱

·        是长片段测序的理想选择

       ·        包含 RNase A 和蛋白酶 K，以及微管研棒便于样品匀浆

 

产品说明

 Monarch® 高分子量 DNA 提取试剂盒（组织）为从组织、细菌及其它样品（包含酵母、昆虫和两栖动物）中提取完整的高分子量（HMW）gDNA 提供了快速的操作流程。针对于组织的提取方案为：首先使用研棒匀浆和蛋白酶 K 搅拌裂解样品，然后进行蛋白质去除，并将提取的 DNA 附着到大玻璃珠的表面。如果提取样品为细菌，则需要在蛋白酶 K 消化之前，使用溶菌酶对细菌细胞壁进行充分裂解。根据标准流程提取的 DNA 在 50-250 kb 之间，如果将离心速度降到最低，提取的 DNA 片段可达 Mb 范围。纯化后的 DNA 产量和纯度极高，且几乎完全不含 RNA。组织和细菌样品提取时间为 90 分钟。组织和细菌 A260 / A280 检测纯度为 1.8-1.9，组织 260/230 检测纯度为 2.1-2.5，细菌 260/230 检测纯度为 2.1-2.2。纯化后的 HMW DNA 适用于多种下游应用，包括长片段测序（Oxford NanoporeTechnologies®和 PacificBiosciences®），光学图谱（BionanoGenomics®）和 Linked-Reads 基因组组装。

图 1：使用 Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒从组织中提取纯化 HMW DNA 的操作流程

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

 

图 2：Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒（组织）可从多种样品中高效提取纯化高质量的 HMW DNA

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

使用 Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒（组织）提取 HMW 基因组 DNA。提取样品为：冻存大鼠肾脏 10 mg、新鲜小鼠肝脏 10 mg、冻存小鼠大脑 20 mg、新鲜小鼠肌肉 20 mg、冻存大肠杆菌 2 x 109、蜡样芽孢杆菌 2 x 108、新鲜非洲爪蟾 4 mg、新鲜酿酒酵母 3.8 x 108 和冻存埃及埃及斑蚊 15 mg。参照试剂盒说明书操作，离心速度为 2000 rpm。酿酒酵母使用经调整的操作流程。从平行实验样本中分别取 500 ng DNA 产物通过 PFGE 分离（在 BioRad® CHEF-DR® III 系统上，使用 1％ 琼脂糖凝胶，6 V / cm，13℃ 电泳 20 小时，切换时间为 0.5-94 秒）。各样品的产量和纯度见下表标注。分子量标准为 Lambda PFG Ladder（NEB＃N0341）。

图 3：在从组织和细菌中提取 HMW 基因组 DNA 的裂解过程中，使用不同的离心速度可调节提取片段长度

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

使用 Monarch 高分子量 DNA 提取试剂盒（组织）提取纯化 HMW 基因组，测试样品为小鼠肾脏（10 mg，图 3A）和大肠杆菌 NEB10 beta（1 x 109 细胞，图 3B）。在裂解步骤中，按照图中标注的速度离心样品，以控制 DNA 的片段化。从平行实验样本中取等量的 DNA 产物（小鼠肾脏：300 ng；大肠杆菌：500 ng）通过 PFGE 分离（在 BioRad® CHEF-DR® III 系统上，使用 1％ 琼脂糖凝胶，6 V / cm，13℃ 电泳 20 小时，切换时间为 0.5-94 秒）。分子量标准为 Lambda PFG Ladder（NEB＃N0341）。各样品的产量、纯度和 DIN 值见下表标注。

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,绿豆核酸酶#M0250L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

绿豆核酸酶

#M0250L 7,500 units

#M0250S 1,500 units

特性

 除去 DNA 或 RNA 分子的 3´ 或 5´ 突出末端，形成可以用连接酶连接的平齐末端
 构建转录图谱
 切割发夹结构中的 loop 环
 从基因组 DNA 中切除基因编码序列
 产生新的限制性酶切位点

概述

本品是一种单链 DNA 或 RNA 特异性的核酸内切酶，可以从 DNA 或 RNA 分子的末端降解单链突出端，产生可连接的平齐末端。 

来源

绿豆芽。 

反应条件

1X 绿豆核酸酶反应缓冲液
[50 mM NaAc（pH 5.0 @ 25℃），30 mM NaCl，1 mM ZnSO4]，30℃ 温育。 

质保声明

绿豆核酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下，1 分钟产生 1 μg 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

不建议热失活。在该酶热失活前，DNA 会发生“呼吸”作用，从而导致降解。

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® HMW gDNA Tissue Lysis Buffer                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3061L
62 ml
849.00
无
无
无
无
无

      


Advantages and Features

 NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

Product Information

 The Monarch HMW gDNA Tissue Lysis Buffer, supplied as a component of the Monarch HMW DNA Extraction Kit for Tissue (NEB #T3060), is a highly effective lysis buffer for tissue and bacteria samples. Its composition ensures immediate and complete inactivation of nucleases in the samples at the start of the lysis.

Properties & usage

Storage Temperature
25°C

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,Lambda 核酸外切酶#M0262L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

Lambda 核酸外切酶

#M0262L 5,000 units

#M0262S 1,000 units

特性

 高效 5´ →3´ 核酸外切酶活性
 切下双链 DNA 的 5´ 单核苷酸 

概述

Lambda 核酸外切酶作用于双链 DNA，沿 5´→3´ 方向逐步切去 5´ 单核苷酸。最适底物是 5´ 磷酸化的双链 DNA，也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA 的切刻或缺口处起始消化。 

来源

E. coli 的 Lambda 核酸外切酶基因与编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的基因融合表达。亲和层析后，从融合蛋白上切下 Lambda 核酸外切酶，并纯化除去 MBP。 

反应条件

1X Lambda 核酸外切酶反应缓冲液
[67 mM Glycine-KOH（pH 9.4 @ 25℃），2.5 mM MgCl2，50 μg/ml BSA]，37℃ 温育。
热失活：75℃ 加热 10 分钟。 

质保声明

Lambda 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

5´ -0H 端的切割速度比 5´ -PO4 端慢 20 倍。单链 DNA 比双链 DNA 慢 100 倍。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch® Protein Separation Solution                             

货 号
规 格
价 格(元)

#T3062L
36 ml
729.00
无
无
无
无
无

      


Advantages and Features

 NEB代理 , 核酸纯化 , 基因组DNA提取

Product Information

 The Monarch Protein Separation Solution, supplied as a component of the Monarch HMW DNA Extraction Kit for Tissue (NEB #T3060), is a salt-based solution that is optimized to ensure proteins in tissue and bacteria samples are easily removed during the phase separation of the Monarch HMW DNA Extraction workflow. It is supplied in two bottles of 18 ml.

Properties & usage

Storage Temperature
25°C

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,T7 核酸外切酶#M0263L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

T7 核酸外切酶

#M0263L 5,000 units

#M0263S 1,000 units

特性

 5´ →3´ 核酸外切酶活性
 切下 DNA 的 5´ 单核苷酸 

概述

本酶作用于双链 DNA，沿 5´ →3´ 方向催化去除 5´ 单核苷酸，它既能从 5´ 末端起始消化，也能从双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化。它既能降解 5´ 磷酸化 DNA 也能降解 5´ 去磷酸化 DNA。据报道，它能沿 5´ →3´ 方向降解RNA/DNA 杂交双链上的 RNA 或 DNA，但不能降解双链或单链 RNA。 

来源

纯化自含 TYB12 内含肽融合子的 E. coli 菌株。

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]，25℃ 温育。 

质保声明

T7 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 1 nmol 的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.nebchina.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,RecJf 核酸外切酶#M0264L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

RecJf 核酸外切酶

#M0264L 5,000 units

#M0264S 1,000 units

特性

 特异性 5´ →3´ 单链 DNA 核酸外切活性
 从 DNA 上切下单磷酸脱氧核苷酸 

概述

 RecJf 作用于单链 DNA，沿 5´ →3´ 方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf 与麦芽糖结合蛋白（MBP）融合表达，增强了 RecJf 的溶解度。

当底物为 5´ 端突出了 22 个核苷酸的 DNA 时，经RecJf 酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物：平齐末端、5´ 突出末端（1-5 个核苷酸）和5´ 凹陷末端（1-8 个核苷酸）。RecJf 发挥活性时无需 5´ 末端磷酸化。

来源

RecJf 作为麦芽糖结合蛋白（MBP） C 端融合蛋白而表达。MBP 不影响 RecJf 的催化活性，但提高了其溶解度。 

反应条件

1X NEBuffer 2
[50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

RecJf 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内产生 0.05 nmol 可溶于 TCA 的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

30,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 T                             

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货 号
规 格
价 格(元)

#M0265L
1,250 units
3,219.00
有
无
无
无
无

#M0265S
250 units
799.00
有
无
无
有
无

      


特性

 去除 DNA 或 RNA 3´ 突出末端生成平末端
 

概述

核酸外切酶 T（Exo T），又称为 RNase T，是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶，该酶需要游离的 3´ 末端，以 3´ →5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶 T 对于 DNA 的活性比 RNA 高十倍。核酸外切酶 T 可用于含有 3´ 突出末端的 RNA 或 DNA 的末端平滑化。

来源

核酸外切酶 T 与麦芽糖结合蛋白（MBP）C 端融合表达并纯化。经亲和层析纯化后，核酸外切酶 T 从 MBP 切下，N 端多出一个氨基酸，且原来的蛋氨酸由苯丙氨酸代替（即 Glu-Phe-核酸外切酶 T，替换了原来的 Met-核酸外切酶 T）。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，1 mM DTT（pH 7.9）]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

核酸外切酶 T 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟内能从 1 nmol [3H]-标记的聚胸腺嘧啶核苷催化产生 0.1 nmol 的可溶于 TCA 的 DNA 所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

核酸外切酶 T 对 RNA 和 DNA 具有不同的活性。对于 RNA，在标准反应条件下，通过凝胶电泳检测，1 单位核酸外切酶 T 可以完全消化 1.0 pmol 的 rA20。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,核酸外切酶 I（E. coli）,#M0293L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 I（E. coli）

#M0293L 15,000 unit

#M0293S 3,000 units

#M0293V 1,500 units

特性

 3´ →5´ 单链外切酶活性
 PCR 扩增后降解引物 

概述

具有从 3´ →5´ 方向水解单链 DNA 的外切酶活性。 

来源

重组 E. coli 菌株，其携带有从 E. coli NM554 克隆的 exo I 基因。 

反应条件

1X 核酸外切酶 I 反应缓冲液
[67 mM Glycine-KOH（pH 9.5 @ 25℃），6.7 mM MgCl2 ，10 mM 2-巯基乙醇]，37℃ 温育。
热失活：80℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

核酸外切酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

20,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 V（RecBCD）

#M0345L 5,000 units

#M0345S 1,000 units

特性

 去除线性单链和双链 DNA，但对切刻和超螺旋质粒 DNA 无作用 

概述

核酸外切酶 V 是从 E. coli 提取的 RecBCD 复合蛋白，具有几种不同的活性，包括 ATP 依赖型单链 DNA 内切酶活性、单链和双链 DNA 外切酶活性。反应具有双向（3´ 和 5´ 端）持续性，产物为寡脱氧核苷酸（1, 2, 3）。所有核酸外切酶 V 的酶活都需要二价阳离子参与，外切酶活性需要 Mg2+，Ca2+ 会抑制外切酶活性，并有解旋酶活性，将双链 DNA 打开，但不水解（4, 5）。 

来源

纯化自 E. coli 菌株，该菌株含有表达核酸外切酶 V（含 RecB，RecC，RecD 三个亚基）的质粒。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 1 mM DTT (pH 7.9)]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。
热失活：70℃ 加热 30 分钟。 

质保声明

核酸外切酶 V 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。

浓度

10,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,T5 核酸外切酶#M0363L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

T5 核酸外切酶（产品已停产，停产有替代）

#M0363L 5,000 units

#M0363S 1,000 units

通知

请注意：该产品已停产，库存售完即止。该产品的替代产品为 T5 核酸外切酶（订购货号： M0663）。M0663 新产品与原产品的名称一样，但新产品带有一个 his 标签；新产品的单位定义也根据 GMP 产品的要求进行了修正；新产品的产品性能、蛋白浓度及反应条件均未发生变化。

特性

 去除线性单链、双链 DNA 和切刻质粒 DNA，但对超螺旋质粒 DNA 不起作用
 应用于 Gibson 组装方法 

概述

T5 核酸外切酶沿 5´ →3´ 方向降解 DNA。它既能从 5´ 末端起始消化，也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化。但不能降解超螺旋双链 DNA，T5 核酸外切酶还具有单链 DNA 核酸内切酶活性。 

来源

纯化自含 T5 噬菌体 D15 基因质粒的 E.coli菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育 

质保声明

T5 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系，37℃ 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 1 nmol 的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,核酸外切酶 VII#M0379L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 VII

#M0379L 1,000 units

#M0379S 200 units

特性

 去除单链寡核苷酸引物
 去除硫代修饰的单链寡核苷酸引物
 绘制基因组中内含子的位置图谱
 从双链 DNA 中去除单链 DNA 

概述

核酸外切酶 VII（Exo VII）来源于大肠杆菌，从 5´ →3´ 和 3´ →5´ 方向切割单链 DNA。该酶对线性或环状双链 DNA 没有活性。当 PCR 完成时，可以使用核酸外切酶 VII 去除寡核苷酸引物，然后再使用不同的引物进行下一步 PCR。核酸外切酶 VII 消化 单链 DNA 时，无需金属离子。 

来源

来源于 E. coli，其克隆有核酸外切酶 VII 基因（XseA 和 XseB）。 

反应条件

1X 核酸外切酶 VII 反应缓冲液。37℃温育。
热失活：95℃ 加热 10 分钟。 

质保声明

核酸外切酶 VII 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能催化产生 1 nmol 酸溶性核苷酸所需的酶量。

浓度

10,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,Msz 核酸外切酶 I#M0527S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

Msz 核酸外切酶 I

#M0527S 1,000 units

产品描述

 NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶

· DNA-特异核酸外切酶
· 热失活：80℃ 加热 1 分钟。
Msz 核酸外切酶 I 适用于：
·   在温度较高的反应条件中（45°C-60°C）去除线性单链 DNA 片段。
·   该酶是创新酶（Enzyme for Innovation, EFI）。创新酶工程由 NEB 发起，旨在为科研界提供独一无二的酶，从而为新的创新应用的发现创造条件。这些酶均具有独特的功能和特性。
Msz 核酸外切酶 I 分离自大肠杆菌菌株（E. coli）,携带有克隆自 Methylocaldum szegediense 的 pMC45-1 基因。Msz 核酸外切酶 I 为 DNA 特异核酸外切酶，沿 3′→5′ 方向水解线性单链 DNA，在 45°C-60°C 反应条件下，rCutSmart™ 缓冲液中活性最佳。

 

 

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,核酸外切酶 VIII，截短型#M0545L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 VIII，截短型

#M0545L 5,000 units

#M0545S 1,000 units

特性

 降解线性双链 DNA，保留环状双链DNA

概述：

 核酸外切酶 VIII,截短型是大肠杆菌核酸外切酶 VIII 活性结构域的基因工程酶。其从 5´ →3´ 方向切除线性双链 DNA 的 5´ 末端核苷酸。该酶不降解超螺旋双链 DNA 和环状单链 DNA。

来源

 来源于 E. coli，克隆自含核酸外切酶 VIII 基因活性区域的基因工程质粒。

反应条件：

 1X NEBuffer 4 反应缓冲液。37℃ 温育。热失活：70℃ 加热 15 分钟。

质保声明：

核酸外切酶 VIII，截短型经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义：

1 单位指在 50 μl 含超声处理的 0.15mM [3H]-标记双链 DNA 的1X NEBuffer 4 反应缓冲液体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能催化双链 DNA产生 1 nmol 酸溶性脱氧核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度：

 10,000 units/ml

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375：

关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,热敏核酸外切酶 I#M0568L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

热敏核酸外切酶 I

#M0568L 15,000 units

#M0568S 3,000 units

特性

去除 DNA 测序或 SNP 分析前 PCR 反应体系中单链引物

去除巢式 PCR 反应体系中单链引物
从双链 DNA 中去除单链 DNA

概述

 具有从 3’→5’方向水解单链 DNA 的外切酶活性。

反应条件

1X NEBuffer 3.1，37℃ 温育。

热失活：80℃ 加热 1 分钟。

单位定义

 1 单位指在 37℃ 条件下，100 μl 体系，6 分钟内催化释放 2 nmol 的酸可溶性核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度

 20,000 units/ml

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,热稳定 FEN1#M0645S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

热稳定 FEN1

#M0645S 1,600 units

特性

  切除 DNA flap 结构

概述

 热稳定 Flap 核酸内切酶 1 (FEN1) 催化切除分叉双链 DNA 底物中的flap 结构，产生 5´ 磷酸末端。DNA 连接酶可以连接 FEN1 消化产物产生双链 DNA。在体内，FEN1 是冈崎片段加工成熟的基本元件，并参与调控碱基切除修复过程。

来源：

 纯化自含 Thermococcus 9°N FEN1 基因的 E.coli 菌株。

反应条件：

1X ThermoPol 反应缓冲液

[20 mM Tris-acetate,10 mM (NH4)2SO4,10 mM KCl,
10 mM MgSO4,0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃)]，65℃温育。

质保声明：

热稳定 FEN1 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义：

 1 单位指在 10 μl 反应体系中，65℃ 条件下，10 分钟内切割 10 pmol 含 5´ flap 结构的寡核苷酸底物所需要的酶量。

浓度：

32,000 units/ml

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 关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,核酸消化混合液#M0649S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸消化混合液

#M0649S 50 reactions

特性

  Convenient one-step protocol
  Digests both DNA and RNA to single nucleosides
  Low-glycerol formulation significantly reduces glycerol-induced ion suppression during MS analysis

概述

核苷消化混合液是复合酶，能一步将 DNA 或 RNA 消化成单核苷，省去了多步耗时的消化步骤，特别适用于液相色谱-质谱（LC-MS）定量分析。

反应条件

1X Nucleoside Digestion Mix Reaction Buffer.   Incubate at 37°C.

贮存温度

-20°C

注意事项

1.  Dilution of the Nucleoside Digestion mix may result in a decrease of enzymatic activity and incomplete

digestion of substrate. Therefore, we recommend using 1 µL of the Nucleoside Digestion Mix for

digestion of samples containing < 1 µg of DNA or RNA substrate.
2.  Samples containing a large number of modifications (particularly modifications at the ribose 2´-position)

may benefit from overnight incubation with the Nucleoside Digestion Mix in order to achieve complete

digestion. No signal deterioration has been observed by incubating DNA or RNA samples with the

Nucleoside Digestion Mix for up to 24 hours at 37°C. Alternatively, the ratio of Nucleoside Digestion

Mix:nucleic acid may be increased from 1 μl/μg substrate to 5-10 μl/μg substrate to ensure complete

digestion.
3.  Although it is not necessary to stop the reaction prior to LC-MS, the mix can be inactivated by the

addition of EDTA (5 mM, final concentration).
4.  In order to reduce the ion suppression effects of glycerol, the Nucleoside Digestion Mix has been

formulated to contain very little glycerol (<1%) and therefore the mix will freeze when stored at -20°C.

The mix is stable for >2 years when stored at -20°C and can withstand 50 freeze-thaw cycles without

significant activity loss.
5.  As carryover of certain reaction components (e.g., EDTA, detergents, etc) from upstream steps may

result in incomplete digestion, it is highly recommended that DNA or RNA substrates be purified

(column purification/phenol chloroform extraction) before digestion with the Nucleoside Digestion

Mix.

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,核酸酶 P1#M0660S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸酶 P1

#M0660S 10,000 units

特性

去除 DNA 分子上单链末端以形成平末端

切割发夹环
DNA 或 RNA 碱基组成分析
蛋白纯化过程中去除核酸

概述

 核酸酶 P1（来源自 p.citrinum）是锌依赖的单链特异性核酸酶，能无碱基特异地水解 RNA 和单链 DNA 上的 3’→5′ 磷酸二酯键。该酶也具有 3’-磷酸单酯酶活性。

尽管核酸酶 P1 是单链特异性核酸酶，其在核酸酶 P1 反应缓冲液中对双链 DNA （dsDNA）也具有活性。在双链 DNA 存在的情况下，如果只想消化单链核苷酸（ssDNA 或 RNA），建议核酸酶 P1 在 1X NEBuffer 1.1 反应缓冲液条件下进行反应，以使该酶发挥最大单链核酸酶活性。

反应条件

 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液，37℃ 温育。

热失活：75℃ 加热 10 分钟。

单位定义

 1 单位指在 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液体系中，37℃ 条件下，每分钟消化圆酵母（Torula Yeast）总 RNA 释放 1 μg 酸可溶性核苷酸所需要的酶量。

浓度

 100,000 units/ml

注意事项

核酸酶 P1 底物特异性如下：3’AMP＞RNA＞ssDNA＞＞dsDNA

2’AMP 的水解效率比 3’AMP 低 3000 倍。

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , 核酸酶,T5 核酸外切酶#M0663L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

T5 核酸外切酶

#M0663L 5,000 units

#M0663S 1,000 units

产品信息

 该产品是 T5 核酸外切酶（NEB #M0363）的替代产品。

   ·双链 DNA 特异性核酸外切酶、单链 DNA 核酸内切酶

   ·从线性化或切刻双链 DNA 的 5’末端起始消化

   ·沿 5’→3’方向切割线性化或切刻双链 DNA

浓度

 10,000 units/ml

T5 核酸外切酶应用

 · 从完全连接的环状双链 DNA 中，去除不完全连接产物

   · 降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性 DNA，提高 DNA 克隆效率

   ·降解质粒样品中污染的线性化和切刻 DNA 

概述

 T5 核酸外切酶沿 5’→3’方向降解 DNA（1）。它既能从 5’末端起始消化，也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化（1）。但不能降解超螺旋双链 DNA（2）。T5 核酸外切酶还具有单链 DNA 核酸内切酶活性。

特性

 ·降解线性单链、双链 DNA 或切刻质粒 DNA，但对超螺旋质粒 DNA 不起作用

   ·去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性 DNA（3）

   ·提高小提制备的cDNA 文库质粒的转染效率（4）

来源

纯化自含有 T5 噬菌体 D15 基因质粒的 E.coli 菌株， D15 基因融合有 His 标签。

单位定义

 1 单位指在 CutSmart 反应缓冲液中，37℃ 条件下，每分钟引起 0.00032 A260 nm 变化所需要的酶量。

反应条件

 1X NEBuffer 4，37℃ 温育

质保声明

 T5 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

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1.  Sayers, J.R. et al. (1991). Nucleic Acids Res. 19, 4127-4132.

   2.  Sayers, J.R. et al. (1990). J. of Biol. Chem. 265, 18311-18317.

   3.  Sayers, J.R. et al. (1996). Analytical Biochem. 241, 186-189.

   4.  Kiss-Toth, E. et al. (2001). Analytical Biochem. 288, 230-232.

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,DNA 修复酶的特性

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

DNA 修复酶的特性

DNA 修复糖基化酶的底物和切割产物

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白

表注

AP                 脱嘌呤/脱嘧啶位点
P                    磷酸盐
OH                 羟基
dR5P             5´ 磷酸脱氧核糖
PA                 3´ -磷酸-α,β-不饱和醛 

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,碱基的 DNA 修复糖苷酶

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

作用于不同损伤碱基的 DNA 修复糖苷酶

作用于不同损伤碱基的 DNA 修复糖苷酶

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白

不同的碱基均采取标准反应条件来测定酶活
* 只产生切刻，不会移除损伤碱基 

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白

表标

AP                 脱嘌呤/脱嘧啶位点。AP 位点通过用 UDG 处理含单尿嘧啶碱基的寡核苷酸获得。
DHT             5,6-二氢胸腺嘧啶
5-hmU         5-羟甲基尿嘧啶
I                    次黄嘌呤核苷
6-MeA         6-甲基腺嘌呤
8-OG             8-氧代鸟嘌呤
U                 尿嘧啶
AP:A             AP 位点:A 配对
DHT:A         5,6-二氢胸腺嘧啶:A 配对
5-hmU:A     5-羟甲基尿嘧啶:A 配对
5-hmU:G     5-羟甲基尿嘧啶:G 配对
I:T                 次黄嘌呤:T 配对
6-MeA:T         6-甲基腺嘌呤:T 配对
8-OG:C         8-氧代鸟嘌呤:C 配对
8-OG:G     8-氧代鸟嘌呤:G 配对
U:A             U:A 配对
U:G             U:G 配对

修复水平：
++++             100%
+++                 50%
++                 10%-25%
+                     ＜ 10%
－                     未检测到酶活性（＜ 0.7%）
N/A                 不适用

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶Fpg#M0240L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶（Fpg）

#M0240L 2,500 units

#M0240S 500 units

特性

 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
 碱性析出
 碱解旋 

概述

Fpg（甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶）也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶，既有 N-端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基，产生一个脱嘌呤（AP）位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3´ 或 5´ 端，因此可以除去 AP 位点，产生一个具有 3´ 和 5´ 磷酸的碱基缺口。
被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括：7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤（8-氧代鸟嘌呤）、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。 

来源

克隆有 fpg 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 1
[10 mM Bis Tris 丙烷-HCl，10 mM MgCl2 ，1mM DTT（pH 7.0 @ 25℃）] 加入 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。
热失活：60℃ 加热 10 分钟。

质保声明

8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃条件下， 1 小时内能够切割 10 pmol 含单个与胞嘧啶配对的 8-氧代鸟嘌呤的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

彗星试验的推荐稀释倍数

1:103～1:104。详细步骤见 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

8,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

T4 DNA 聚合酶                             

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等） NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等） NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等） NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

货 号
规 格
价 格(元)

#M0203L
750 units
2,979.00
有
有
有
无
有

#M0203S
150 units
749.00
有
有
有
有
有

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相关产品

快速末端平齐化™ 试剂盒

特性

·缺口填充（无链置换活性）
·切除 3´ 突出末端或补平 5´ 突出端，形成平末端
·通过置换合成法标记探针
·单链删除后亚克隆 

概述

在模板及引物存在的条件下，T4 DNA 聚合酶催化沿 5´→3´ 方向合成 DNA。此酶还具有 3´→5´ 外切核酸酶的活性，该活性比 DNA 聚合酶 I 强。与 DNA 聚合酶 I 不同，T4 DNA 聚合酶不具有 5´→3´ 核酸外切酶活性。 

来源

从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶基因的 E.coli 中提纯制备的。 

浓度

从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶基因的 E.coli 中提纯制备的。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

注意事项

由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶的活性，提高反应温度、增加酶量、没有加入 dNTP 或反应时间过长都可能造成 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。

 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,核酸内切酶 III-Nth,#M0268S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

核酸内切酶 III（Nth）

#M0268S 1,000 units

特性

 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
 碱性析出
 碱解旋 

概述

E. coli 核酸内切酶 III（Nth）既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶（AP）位点。AP-裂解酶活性则切割 AP 位点的 3´ 端，产生一个 5´ 磷酸和一个 3´ 磷酸-α,β不饱和醛。

被核酸内切酶 III 识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。 

来源

克隆有 nth 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X Endonuclease III（Nth）反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，1 mM DTT（pH 8.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

核酸内切酶 III（Nth）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
* AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
彗星试验的推荐稀释倍数：1:104～1:105。详细步骤见 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术,DNA 聚合酶 I（E. coli）,#M0209L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

DNA 聚合酶 I（E. coli）

#M0209L 2,500 units

#M0209S 500 units

#M0209V 250 units

特性

·DNA 切刻平移

·cDNA 第二条链的合成 

概述

DNA 聚合酶 I（E. coli）是依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶，具有 3´→5´ 和 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶的 5´→3´ 核酸外切酶活性能够切除位于延伸链前端的核苷酸，从而使切刻平移成为可能。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有过表达的 polA 基因。 

浓度

10,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

注意事项

本品不含 DNase I，因此切刻平移反应时需额外添加 DNase I。 

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,Afu UDG #M0279L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

Afu UDG

#M0279L 1,000 units

#M0279S 200 units

特性

 热稳定
 从双链或单链 DNA 上切下尿嘧啶 

概述

Afu 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（Afu UDG）是 E.coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）热稳定的同源蛋白，来源于闪烁古生球菌（Archaeoglobus fulgidus）。该酶从含尿嘧啶的 DNA 上催化释放尿嘧啶，能有效地水解双链和单链 DNA 上的尿嘧啶。 

来源

克隆自闪烁古生球菌（Archaeoglobus fulgidus）UDG 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X ThermoPol II（不含 Mg2+）反应缓冲液
[10 mM KCl，10 mM (NH4)2SO4，20 mM Tris-HCl，0.1% Triton X-100（pH 8.8 @ 25℃）]，65℃ 温育。 

质保声明

Afu UDG 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指每分钟从含尿嘧啶双链 DNA 上催化释放 60 pmol 尿嘧啶所需要的酶量。通过检测 65℃ 30 分钟内，从 50 μl 含 0.2 μg DNA（104～105 cpm/μg）的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。

浓度

2,000 units/ml。

注意事项

Afu UDG 在 150 mM NaCl 存在条件下，仍有 50% 的活性。Afu UDG 煮沸 30 分钟之后在标准反应条件下仅存少于 1% 的活性。在标准反应条件下，尿嘧啶糖苷酶抑制剂（UGI）不能抑制 Afu UDG 的活性。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。 

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术,DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow）,#M0210L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow）

#M0210L 1,000 units

#M0210M 高浓度（10X）1,000 units

#M0210S 200 units

#M0210V 100 units

特性

·用随机引物制备探针
·切除 3´ 突出端或补平 5´ 突出端，形成平末端

·cDNA 第二条链的合成 

概述

DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow 片段）是 E. coli DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物，具有 DNA 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性，但缺失了 5´→3´ 核酸外切酶活性。Klenow 既保留了全酶的高保真性，又不会降解 DNA 5´ 末端。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 E. coli polA 基因，该基因去除了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。 

浓度

5,000 和 50,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

使用注意事项

由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，升高反应温度、加入过量的酶、未加入 dNTP 或反应时间过长均会导致 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。 

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。

NEB代理,DNA修饰酶与克隆技术,DNA 修复蛋白,尿嘧啶-DNA 糖基化酶UDG,#M0280L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）

#M0280L 5,000 units

#M0280S 1,000 units

相关产品

尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）

特性

 去除 PCR 残存污染
 去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基

概述

E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）催化从含尿嘧啶的 DNA 上释放尿嘧啶。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶，但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。 

来源

克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。 

应用

在 37℃ 条件下，1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后，此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性，建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解，也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。 

反应条件

1X UDG 反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，1 mM DTT（pH 8.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。 

质保声明

尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃ 条件下，30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA（104～105 cpm/μg）的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

UDG 在较广的 pH 范围均内有活性，最适 pH 为 8.0，不需要二价阳离子。活性受高离子强度（＞ 200 mM）所抑制。 

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关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI） #M0281L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）

#M0281L 1,000 units

#M0281S 200 units

描述

 尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI），来源于枯草芽孢杆菌噬菌体（Bacillus subtilis bacteriophage PBS1），蛋白分子量较小（9.5 kDa），可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶（UDG）以及来源于其它物种的 UDG。UDG 与 UGI 按 1：1 比例进行可逆蛋白结合，发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG 与 DNA 的复合物。

浓度

 2,000 units/ml

特点

·尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）蛋白分子量较小（9.5 kDa），可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶（UDG）以及来源于其它物种的 UDG。

·95℃ 热处理后该酶仍有部分活性。

·可用于阻止产物 DNA 的后续降解。

来源

 由携带有克隆自枯草芽孢杆菌噬菌体（Bacillus subtilis bacteriophage PBS1）UGI 基因的大肠杆菌菌株表达纯化得来。

单位定义

 1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 酶所需的酶量。1 单位 UDG 是指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化解离 60 pmol 的尿嘧啶所需要的酶量。

反应条件

 1X UDG 反应缓冲液，37℃ 温育。

热失活

 不能热失活。

注意事项

 1、由于 95℃ 热处理后， UDG 酶仍有部分活性，建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）来阻止产物 DNA 的降解。

2、对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效（NEB #M0280）。

3、在原始反应中加入与 UDG 等量或者过量的 UGI。

4、在四种 NEBuffer 中都有活性（NEB #B7001, NEB #B7002, NEB #B7003, NEB #B7004）。

5、UGI 的热稳定性极高，煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。

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 Lindahl,T.et al.(1977).J. Biol.Chem..252,3286-3294.

Wang,Z.,et al.(1991).Gene.99,31-37.

Bennett,S.E.and Mosbaugh,D.W.(1992).J.Biol.Chem..267,22512-22521.

NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术,Therminator™ DNA 聚合酶,#M0261L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

Therminator™ DNA 聚合酶

#M0261L 1,000 units

#M0261S 200 units

特性

 提高了修饰核苷酸的掺入能力
 部分核糖核酸置换法测定 DNA 序列
 ddNTP 或 acyNTP 的链终止法用于测序或 SNP 分析 

概述

Therminator DNA 聚合酶是 9°N™ DNA 聚合酶中的一种，但有较强的掺入修饰底物的能力，如：ddNTP、rNTP 和 acyNTP。 

来源

来源于 E. coli 菌株。此菌株含有从 Thermococcus species 9°N-7 中克隆的经过基因工程改造的 9°N (D141A/E143A/A485L) DNA 聚合酶基因。 

浓度

2,000 units/ml。 

使用注意事项

扩增延长区域（extended regions）时可能需要优化反应条件。 

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,APE 1#M0282L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

APE 1

#M0282L 5,000 units

#M0282S 1,000 units

特性

 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
 碱洗脱
 碱解旋
 改良切刻翻译 

概述

人源脱嘌呤/脱嘧啶（AP）核酸内切酶APE 1，也称为 HAP 1 或 Ref-1，与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5´ 端的磷酸二酯键，产生单链 DNA 断裂，留下 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外，据报道 APE1 还具有弱的 DNA 3´ 二酯酶、3´ 到 5´ 核酸外切酶和 RNase H 活性。
除 DNA 修复活性外，APE 1 还能体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun 同源二聚体、Hela 细胞 AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。 

来源

克隆有人 APE 1 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。

质保声明

APE 1 核酸内切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能切割 20 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。

 

* AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 20 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

彗星试验的推荐稀释倍数

1:103。

浓度

10,000 units/ml。 

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NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术,T7 DNA 聚合酶,未修饰,#M0274L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

T7 DNA 聚合酶（未修饰）

#M0274L 1,500 units

#M0274S 300 units

特性

 缺口填充（无链置换活性） 

概述

T7 DNA 聚合酶催化在感染过程中 T7 噬菌体 DNA 的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性：DNA 聚合酶活性和较强的 3´→5´ 核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率，因而特别适于长链 DNA 模板的复制。 

来源

T7 DNA 聚合酶由两个亚基组成：T7 基因 5 蛋白（80 kDa）和 E. coli 硫氧还蛋白（12 kDa）。这两个蛋白分别克隆并在 E. coli 的 T7 表达系统过表达。 

反应条件

1X T7 DNA 聚合酶反应缓冲液
（20 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT，pH 7.5 @25℃）。加入 BSA 和 dNTPs（不随酶提供）。37℃温育。 热失活：75℃ 20 分钟。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下反应 30 分钟，能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需要的酶量。

浓度

10,000 units/ml。 

使用注意事项

该酶具有快速延伸的特性，故无需长时间温育。T7 DNA 聚合酶不能用于 DNA 测序。 

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,Tma 核酸内切酶 III#M0291S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

Tma 核酸内切酶 III

#M0291S 500 units

特性

 碱性析出
 碱解旋 

概述

该酶为 E. coli 核酸内切酶 III（Nth）的热稳定同源蛋白。既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶（AP）位点。AP-裂解酶活性随后对该位点进行切割。
Tma 核酸内切酶 III 识别 DNA 上的无碱基位点、5,6 二羟基胸腺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇。 

来源

重组 E. coli 菌株，基因克隆自海栖热袍菌（Thermotoga maritima）。 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25℃）]，65℃ 温育。 

质保声明

Tma 核酸内切酶 III 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，65℃ 条件下，1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
*AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。 

浓度

10,000 units/ml。 

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,Tth 核酸内切酶 IV #M0294S

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

Tth 核酸内切酶 IV

#M0294S 500 units

特性

 耐热
 碱洗脱
 碱解旋

概述

Tth 核酸内切酶 IV 是一种热稳定的脱嘌呤/脱嘧啶（AP）核酸内切酶。该酶切割 AP 位点 5´ 端的第一个磷酸二酯键，产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。该酶也具有 3´ 二酯酶活性。 

来源

克隆有嗜热栖热菌（Thermus thermophilus）endonuclease IV 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25℃）]，65℃ 温育。 

质保声明

Tth 核酸内切酶 IV 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com 的产品专栏。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，65℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
* AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。 

浓度

10,000 units/ml。 

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NEB代理,DNA聚合酶与扩增技术,Sulfolobus DNA 聚合酶 IV,#M0327S

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

Sulfolobus DNA 聚合酶 IV

#M0327S 100 units

特性

 以损伤 DNA 为模板合成 DNA

 DNA 修复 

概述

Sulfolobus DNA 聚合酶 IV 是一种热稳定的 Y 家族 DNA 聚合酶，能在复制过程中绕过 DNA 损伤，因而能以多种损伤 DNA 为模板合成 DNA。 

来源

重组的 E. coli 菌株，携带有 Sulfolobus islandicus DNA 聚合酶 IV 基因。

浓度

2,000 units/ml。 

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NEB代理 , DNA修饰酶与克隆技术 , DNA 修复蛋白,核酸内切酶 VIII #M0299L

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

核酸内切酶 VIII

#M0299L 5,000 units

#M0299S 1,000 units

特性

 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
 碱洗脱
 碱解旋 

概述

大肠杆菌核酸内切酶 VIII 既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶（AP）位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3´ 和 5´ 端切割磷酸二酯键，产生 5´ 磷酸和 3´ 磷酸末端。能被核酸内切酶 VIII 识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 VIII 与核酸内切酶 III 的活性相似，但核酸内切酶 VIII 具有 β 和 δ 裂解酶活性，而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。 

来源

克隆有 nei 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X Endonuclease VIII 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl，75 mM NaCl，1 mM EDTA（pH 8.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：75℃ 加热 10 分钟。 

质保声明

核酸内切酶 VIII 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中，37℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
*AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。 

彗星试验的推荐稀释倍数

1:104～1:105。详细步骤请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

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关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。