产品名称：Beyotime 抗荧光淬灭封片液(含DAPI)
产品货号： P0131-5ml
英文名称：Antifade Mounting Medium with DAPI
产品规格：5ml
产品介绍：
碧云天生产的抗荧光淬灭封片液(含DAPI) (Antifade Mounting Medium with DAPI)是一种含有细胞核蓝色荧光染料DAPI并能减缓荧光淬灭的封片试剂。本封片液不仅可以减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭，还能在封片的同时完成对细胞核的DAPI染色。
DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
DAPI的最大激发光波长为340nm，最大发射光波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，最大激发光波长为364nm，最大发射光波长为454nm。
本品已加DAPI，可同时完成细胞核染色和封片，并能减缓荧光淬灭，实验操作更简单，只需在封片时用移液器滴一滴本产品在样品上，盖上盖玻片即可完成操作。
按照每个样品封片需要50微升计算，5ml本产品足够用于100个样品的细胞核染色和封片，25ml本产品可以用于500个样品的细胞核染色和封片。
产品使用说明：
1. 贴壁细胞样品：
a. 染色完毕后，吸尽液体。
b. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。
c. 随后即可在荧光显微镜下观察细胞样品。
2. 组织切片：
a. 染色完毕后，吸尽液体。
b. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。
c. 随后即可在荧光显微镜下观察组织切片。
3. 其它样品：
其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
参照结果：
储存与运输：
-20℃避光保存，一年有效。
产品订购信息：
品牌 货号 名称 规格
Beyotime P0131-5ml 抗荧光淬灭封片液(含DAPI)5ml 5ml
Beyotime P0131-25ml 抗荧光淬灭封片液(含DAPI)25ml 25ml
产品名称：Beyotime 抗荧光淬灭封片液(含DAPI)
产品货号： P0131-5ml
关于公司：
Beyotime创办于2001年。近20年来专注于自主研发和生产。2007年成立上海碧云天生物技术有限公司，为 特新“小巨人”企业，并进一步入选第二批第一年建议支持的专精特新“小巨人”企业， 也是G60科创走廊一类重点扶持企业和上海市专精特新中小企业。江苏碧云天为江苏省优良企业，南通市双创优企。公司主要研发生产生物、医学研究用试剂、试剂盒、消耗品和仪器设备。
品牌：JinPan | 货号：C0065-10ml
DAPI 溶液（10ug/mL 即用型）说明书
货号：C0065
规格：10ml/50ml
保存：-20℃避光保存，一年有效。
产品说明：
DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与 DNA 中大部分 A，T 碱基相互结合的
荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为 DAPI 可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定
细胞的染色。当 DAPI 与双链 DNA 结合时，最大吸收波长为 358nm，最大发射波长为 461nm。DAPI
的发射光为蓝色，且 DAPI 和绿色荧光蛋白 GFP 或 Texas Red 染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有
少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
本产品为 DAPI 水溶液，纯度≥90%，为即用型工作液，可以直接用于固定细胞或组织的细胞
核染色。
使用方法：（仅供参考）
1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，
可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进
行 DAPI 染色。
2，对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少
加入待染色样品体积 3 倍的色液，混匀。
3，室温染色 5-10 分钟。
4，吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。
5，置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。
注意事项：
DAPI 被普遍认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。
本产品需避光，并尽量避免反复冻融。
荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。
为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂，货号为 S2100。
相关产品：
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SF9 羊抗小鼠 IgG-FITC
S9000 特级胎牛血
中文名称
DAPI 乳酸
英文名字
DAPI Dilactate
供应商
AAT Bioquest
产品货号
AAT-17509
产品报价
￥询价/25mg
美国AAT Bioquest Inc是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括显色、荧光和生物发光技术。
AAT代理,DAPI 乳酸,微信同号 18301939375，部分现货，欢迎来电咨询
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中文名称
FluoroQuest封片剂,含DAPI
英文名字
FluoroQuest Mounting Medium with DAPI
供应商
AAT Bioquest
产品货号
AAT-20004
产品报价
￥询价/50mL
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中文名称
DAPI【4,6-二脒基-2-苯基吲哚,二氢氯化物】
英文名字
DAPI[4,6-Diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride]
供应商
AAT Bioquest
产品货号
AAT-17513
产品报价
￥询价/25mg
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中文名称
DAPI【4,6-二脒基-2-苯基吲哚,二氢氯化物】,超级纯,
英文名字
DAPI[4,6-Diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride].UltraPure grade.
供应商
AAT Bioquest
产品货号
AAT-17511
产品报价
￥询价/100mg
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中文名称
DAPI【4,6-二脒基-2-苯基吲哚,二氢氯化物】,超级纯,
英文名字
DAPI[4,6-Diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride].UltraPure grade.
供应商
AAT Bioquest
产品货号
AAT-17510
产品报价
￥询价/10mg
美国AAT Bioquest Inc是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括显色、荧光和生物发光技术。
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中文名称
10mM DAPI水溶液
英文名字
DAPI[4,6-Diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride].10 mM solution in water.
供应商
AAT Bioquest
产品货号
AAT-17507
产品报价
￥询价/2mL
美国AAT Bioquest Inc是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括显色、荧光和生物发光技术。
AAT代理,10mM DAPI水溶液,微信同号 18301939375，部分现货，欢迎来电咨询
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Bacstain- DAPI solution试剂货号：BS04
4′,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride, solution
CAS号：28718-90-3(DAPI)
商品信息
Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit-DAPI/PI试剂盒货号：BS08
细菌活力检测试剂盒-DAPI/PI
Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit-DAPI/PI
商品信息
Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523
4’6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液
Cellstain- DAPI solution
商品信息
Cellstain- DAPI试剂货号：D212
4’6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐
Cellstain- DAPI
商品信息
储存条件：-20度保存，避光
运输条件：室温
特点：
● 可用于流式细胞仪
● 活细胞核染色试剂
● 激发和发射波长分别为488 nm和530 nm
规格
特性：该产物为黄色至微黄色的绿棕色粉末或固体，可溶于水和稀盐酸。
水溶性：试验成功
NMR光谱：试验成功
产品概述
荧光染料DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对细胞核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360 nm和460 nm。
操作说明
产品使用步骤
1.用PBS或适当的缓冲液制备10-50μMDAPI溶液。a）
2.在细胞培养基中加入体积为细胞培养基1/10的DAPI溶液。b）
3.将细胞在37℃下孵育10-20分钟。
4.用PBS或适当的缓冲液清洗细胞两次。
5.使用带有360 nm激发光和460 nm发射滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a）由于DAPI可能致癌，因此在处理过程中必须格外小心。
b）或者您可以用1/10浓度的DAPI缓冲溶液代替培养基。
注意事项
制备DAPI储备溶液时要用水（难溶于PBS）。
但是，那些溶解在水中的物质不适合长期储存。
考虑长期存储时，请使用解决方案类型产品-Cellstain®-DAPI解决方案（代码：D523），以提高解决方案的稳定性。
文献
1) W.Schnedl,A.V.Mikelsaar,M.Breitenbach and O.Dann,”DIPI and DAPI: Fluorescence Banding with Only Negligible Fading”,Hum. Genet.,1977,36,167.
2) I.W.Taylor and B.K.Milthorpe,”An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations”,J.Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.
3) F.Otto and K.G.Tsou,”A Comparative Study of DAPI,DIPI,and Hoechst 33258 and 33342 as Chromosomal DNA Stains”, Stain Technol.,1985, 60, 7.
4) N.Poulin, A.Harrison and B.Palcic,”Quantitative Precision of an Automated Image Cytometric System for the Measurement of DNA Content and Distribution in Cells Labeled with Fluorescent Nucleic Acid Stains”, Cytometry, 1994,16,227.
5)M.Kawai,N.Yamaguchi and M.Nasu,”Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacturing Process”, J.Appl. Microbiol.,1999, 86 (3),496.
常见问题Q&A
| Q1 核染色中所用染料的特征和区别是什么？ |
| A1:这里引入的染料具有通过与核酸相互作用而发出荧光或增加荧光强度的特性。
除荧光波长以外的差异如下。
[EB]
它没有碱基特异性，可与所有DNA和RNA结合。
它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。
[PI]
像EB一样，它没有基础特异性。它是一种更广泛使用的染料，因为插入时它的荧光强度比EB高。
它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。
[DAPI]
与双链小槽结合。它与腺嘌呤-胸苷簇具有高度结合。
它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。
[AO]
通过利用插入双链时和与单链磷酸结合时荧光波长不同的事实，可以在双链和单链之间进行区分。
它渗透到活细胞的细胞膜上。
[Hoechst33342，33258]
它与DNA的腺嘌呤胸苷部分特异性结合。
它是一种颜料，可以渗透到活细胞的细胞膜上并染色活细胞的DNA。 |
| Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。 |
| A2： |
| Q3 如何使用DAPI进行核染色？ |
| A3:有以下使用情况报告示例。制备DAPI储备溶液时要用水（难溶于PBS）。
但是，那些溶解在水中的物质不适合长期储存。
对于长期存储，请使用解决方案类型产品-Cellstain®-DAPI解决方案（货号：D523），具有更高的解决方案稳定性。使用时，用缓冲液或有机溶剂将储备溶液稀释至所需浓度。
[使用DAPI进行细胞染色的示例]
包含实体瘤或簇的样品的DAPI染色示例（参考文献3）
1）用0.02％胰蛋白酶-EDTA处理，在37°C下孵育30分钟，以1,500 rpm离心5分钟，然后冲洗上清液。
2）在-20°C下用50％甲醇（也可以使用乙醇）固定后，以1,500 rpm离心5分钟以除去上清液。
3）在-20℃下用30％甲醇洗涤后，以1,500rpm离心5分钟以除去上清液。
4）用0.2 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）洗涤后，以1,500 rpm离心5分钟以除去上清液。
5）每106个细胞添加0.2 mL的RNase的0.2 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）（pH 7.2）（1 mg / mL），并在37°C下孵育30分钟。
6）用0.2 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）洗涤后，以1,500 rpm离心5分钟以除去上清液。
7）加入10 mL 1μg/ mL DAPI溶液，并在黑暗中于4°C染色2小时。
[使用DAPI进行细胞染色的例子] Vollenweider等人在磷酸化因子激活的杀伤（LAK）细胞的细胞增殖试验中。
使用荧光打印机执行DAPI染色并进行测量（参考2）。
那时，请使用0.1 mg / mL的水溶液和1μg/ mL的甲醇溶液。
使用每孔100μL进行荧光染色。 |
