PMA,Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA;TPA;佛波脂酸(5mg/ml),CAS号16561-29-8

PMA,Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA;TPA;佛波脂酸(5mg/ml),CAS号16561-29-8,Ionomycin(离子霉素MB1379):钙离子载体,使细胞内Ca 2+浓度增加,激活calcineurin。来自PKC和calcineurin的共同信号最终引起T细胞活化。

中文名:PMA;TPA;佛波脂酸(5mg/ml)   英文名:Phorbol 12-myristate 13-acetate

分子式:C36H56O8     分子量:616.84
产品形式:本品为浓度为5MG/ML in DMSO储液,每只200UL含1MGPMA。
产品介绍:PMA即 Phorbol 12-myristate 13-acetate,,二酰基甘油(DG)的一种类似物,可通过与蛋白激酶C(PKC) 的C1区结合而使后者激活,产生类似于“双信使系统”的级联反应,信号通路研究中,
可与PHA/Ionomycin联合使用刺激细胞产生细胞因子,以及与蛋白转运抑制剂如Monensin和Brefeldin A连用研究细胞因子在细胞内的滞留等。PMA还可作为一种肿瘤促进剂用于体内外肿瘤研究。
用高浓度的PMA处理细胞并延长处理时间,可下调细胞总PKC活性以及引起细胞的癌化,而低浓度的PMA则具有保护性作用。PMA可促进造血细胞分化。
此外,PMA还可抗人白血病和嗜中性粒细胞减少症。PMA的水溶性是phorbol-12,13-dibutyrate (TLC)的10倍,因此更适合于细胞基础类研究。
使用方法:本品为溶于DMSO的储存液,使用时请根据实验需要稀释成工作液,推荐使用浓度为0.1-10μM,最常见的使用浓度为1μM,但具体的最佳工作浓度还需参考相关文献,或根据实验目的,以及所培养的特定细胞和组织,通过实验进行摸索和优化。
流式细胞内检测产品联合应用
PMA:佛波醇酯类多克隆刺激剂,是DAG(二酯酰甘油)的analog,脂溶性,自由通过细胞膜,直接作用于细胞活化信息传导通路上的PKC。
Ionomycin(离子霉素MB1379):钙离子载体,使细胞内Ca 2+浓度增加,激活calcineurin。来自PKC和calcineurin的共同信号最终引起T细胞活化。
PHA:(植物血凝素MB2559)类多克隆刺激剂,作用于TCR-CD3复合体引起T细胞活化。
PMA+Ion由于直接作用于T细胞活化信号传导通路的中游,细胞活化快,2h大部分细胞已活化,4h基本全部活化,作用强劲。PHA作用6h的效果大致相当于PMA+Ion活化2h的效果,作用温和一些。
PMA是DG的类似物,能自由透过细胞膜,因此能绕过细胞膜受体直接激活PKC。Ionomycin则能使细胞膜外Ca2+进入膜内增加,导致细胞内游离钙浓度升高;即使细胞膜或内质网本身存在缺陷不能使细胞内的游离钙浓度升高,IONO也能模拟Ca2+依赖的生物学事件。但单用Ionomycin并不能激活T淋巴细胞,单用PMA刺激T细胞的强度也不够,只有PMA+Ionomycin联合应用才是使T细胞进入细胞周期的最有效的方法之一
使用时候先加刺激剂,再加阻断剂。
PMA+离子霉素是刺激剂,作用是刺激Th17细胞增殖以及细胞内IL-17分泌。刺激一定时间后(如1h),
再加入阻断剂:如BFA MB3357,、Monensin MB5743),然后再培养4-6h,取细胞进行检测。
储存条件:-20℃,防潮密闭避光

运输条件:2~8℃运输
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CAS号:16561-29-8

英文名字:PMA,Phorbol 12-myristate 13-acetate

质量标准:浓度5mg/ML in DMSO
分子式:C36H56O8

C549/Cell Cycle Assay Solution Blue试剂

C549/Cell Cycle Assay Solution Blue试剂,细胞周期的调控系统与细胞增殖密切相关。一个细胞产生两个子细胞的细胞分裂是细胞周期的一部分。细胞周期可以通过流式细胞术测量细胞DNA染色,然后分析染色细胞核在细胞周期阶段的比例来分析。细胞周期分为两个主要阶段:间期和有丝分裂(M)期。间期由G1期(发生在细胞分裂之前的DNA合成准备)、S期(DNA合成和复制)和G2期(具有重复染色体的单个细胞)组成。M期包括有丝分裂和胞质分裂。

货号:C549
细胞周期检测试剂盒-蓝色
Cell Cycle Assay Solution Blue
储存条件:0-5 ℃
运输条件:常温

特点:

检测时间短
固定和不固定都可以用
悬浮细胞核贴壁细胞都可以用

选择规格:50 tests

 

产品概述

细胞周期的调控系统与细胞增殖密切相关。一个细胞产生两个子细胞的细胞分裂是细胞周期的一部分。细胞周期可以通过流式细胞术测量细胞DNA染色,然后分析染色细胞核在细胞周期阶段的比例来分析。细胞周期分为两个主要阶段:间期和有丝分裂(M)期。间期由G1期(发生在细胞分裂之前的DNA合成准备)、S期(DNA合成和复制)和G2期(具有重复染色体的单个细胞)组成。M期包括有丝分裂和胞质分裂。细胞周期的进展受细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶的调控。分析细胞周期检查点的作用机制,对确定抗癌药物及其他药物的作用具有重要意义

产品特性

产品特点:检测时间短

碘化丙啶(PI)通常用于使用流式细胞仪进行细胞周期分析。与这种分析方法相比,深红色细胞周期测定溶液具有良好的膜渗透性,并使用对DNA具有高特异性的染料,因此仅需将试剂添加到细胞悬液中就可以分析细胞周期。此外,深红色细胞周期测定解决方案中还提供了633 nm激光器,使您可以同时使用高度通用的488 nm激光器。

实验案例

对比实验:准确的判段活细胞的细胞周期

用细胞周期流式检测试剂(蓝色和深红色)染色的活CHO细胞,同时使用广泛应用的PI染色产品和同仁已有的细胞周期检测试剂盒,进行了类似的实验。结果,通过细胞周期流式检测试剂获得的结果与PI染色结果相同(如下所示)。与四种不同的产品相比,我们的产品在活细胞中获得了清晰的直方图峰。

示例:抗癌剂引起的细胞功能的变化

阿霉素(DOX)在细胞周期的G2 / M期抑制细胞增殖,并诱导细胞衰老。将DOX加入A549细胞后,G2 / M期的峰值增高(Cell Cycle Assay Solution Deep Red、Blue;C548\C549),诱导细胞衰老(Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal;SG03)和线粒体膜电位发生变化(JC-1 MitoMP Detection Kit;MT09)

常见问题Q&A

Q1:悬浮细胞和贴壁细胞都可以检测吗?

A1:悬浮细胞和贴壁细胞都可以使用。

Q2:胰酶会影响检测吗?

A2:如果实验中有胰酶残留,会影响检测;

如果回收细胞时使用胰酶,请确保按照方案进行清洁操作,去除残留胰酶。

Q3:需要固定细胞吗?

A3:固定和不固定细胞都可以。

Q4:如果需要对要检测的固定细胞进行保存,是应该染色前保存还是染色后保存?

A4:都可以,本公司实际对比案例:

分别在保存固定细胞前后做了染色实验,检测结果没有差异

・将固定细胞冷藏(4℃)后保存1周,根据使用说明书对细胞进行染色。

・根据使用说明书对固定细胞进行染色,将细胞冷藏(4℃)后保存1周。

*冷冻保存细胞的话有可能会沉淀不溶物,所以不推荐冷冻保存。

Q5:用Cell Cycle Assiay Soluton染色后,为了除去过量的试剂可以清洗细胞吗?

A5:不推荐染色后清洗细胞。

由于洗涤时的离心操作,有可能影响细胞周期解析的实验结果。

Q6:做流式检测时,应该注意哪些方面呢?

A6:流式检测时,需要在合适的条件下进行测检测。

以下列举了一些失败的案例。

1、检测通道选择不合适

例如一般的细胞周期检测都会使用PI(PE)通道,但是我们试剂盒选择PI通道并不能得到最适结果,请参照一下波段选择最适通道:

2、检测时电压过高(或过低)。

当流式检测时电压过高(或过低)时,都无法得到最适结果。

请通过直方图将G0/G1期、S期、G2/M期调整为清晰的测量电压。

3、细胞数量选择不合适

例如流式检测是圈门选择不恰当,会导致结果不好。

分析时请对选择所有细胞。