-20°C
含有重组白蛋白
· 超过 215 种的酶在单一缓冲液（rCutSmart 缓冲液）中具有 100% 活性，极大简化了双酶切反应体系的建立
· rCutSmart 缓冲液成分中含有重组白蛋白
NEB 提供的缓冲液浓度均为 10 X，酶及其相应的缓冲液均采用同样颜色的标签标记，以确保酶发挥 100% 活性。通常随酶提供提供的缓冲液为四种标准缓冲液中的一种，缓冲液成分中含有重组白蛋白（NEB #B9200）。
超过 215 种的酶在单一缓冲液（rCutSmart 缓冲液）中具有 100% 活性，极大简化了双酶切反应体系的建立。由于 rCutSmart 缓冲液成分中已包含重组白蛋白，从而减少了加样管、加样步骤及可能带来的问题。此外，许多 DNA 修饰酶在 rCutSmart 缓冲液中也具有 100% 活性，因此避免了后期的纯化步骤。
1X rCutSmart 缓冲液（绿）组分：
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r1.1（NEB #B6001）
50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r2.1（NEB #B6002）
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r3.1（NEB #B6003）
NEBuffer EcoRI：
50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。
NEBuffer EcoRI：
50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。
无核酸酶水是配制试剂和酶学反应使用的理想用水。生产过程中未使用DEPC等有毒溶剂，因此不会对酶学反应有任何抑制作用。
储存温度：
25℃
如果在使用过程中需要稀释内切酶，建议稀释后浓度不要低于 1,000 units/ml。
-20℃。
稀释液 A：
50 mM KCl，10 mM Tris-HCl，0.1 mM EDTA，1 mM dithiothreitol，200 μg/ml BSA，50% 甘油（pH 7.4 @25℃)
注意：以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
如果在使用过程中需要稀释内切酶，建议稀释后浓度不要低于 1,000 units/ml。
-20℃。
稀释液 B：
300 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，0.1 mM EDTA，1 mM dithiothreitol，500 μg/ml BSA，50% 甘油（pH 7.4 @25℃）。
注意：以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳，可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS，可使条带清晰，避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料（NEB#B7025）。凝胶上样染料中的 EDTA，可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+，从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中，除了一些最小的片段，橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。
1X 凝胶上样染料，蓝色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料，橙色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料，紫色：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.08% SDS ，0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料，紫色，无 SDS：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。
注意：25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料，或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。
预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳，可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS，可使条带清晰，避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料（NEB#B7025）。凝胶上样染料中的 EDTA，可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+，从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中，除了一些最小的片段，橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。
1X 凝胶上样染料，蓝色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料，橙色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料，紫色：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.08% SDS ，0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料，紫色，无 SDS：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。
注意：25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料，或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。
在 NEB 所有非预染的 DNA Ladder 中都包含紫色凝胶上样染料（含或不含 SDS），与其它染料相比，条带更加锐利并且消除了紫外的阴影。该预混的上样缓冲液包含两种染料，染料一（粉红/红色）和染料二（蓝色）。红色染料可以在琼脂糖电泳和非变性丙烯酰胺电泳中做为指示染料。两种染料在琼脂糖凝胶电泳过程中分离，红色染料作为指示染料与溴酚蓝迁移率一致。更具体的说，该染料不会在紫外成像时留下阴影。混合液中同时含有 EDTA 用来螯合酶反应过程中的镁（最多到 10 mM），从而使反应终止。染料中同时含有聚蔗糖，相比甘油混合的染料可以得到更亮更紧实的条带。紫色的 6X 凝胶上样染料含有 SDS，条带更清晰锐利，避免由于有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。
