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货号 |
品名 |
规格 |
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JPD530-50 |
甲基化检测样本前处理试剂盒 |
50次 |
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JPD530-200 |
甲基化检测样本前处理试剂盒 |
200次 |
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货号 |
品名 |
规格 |
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JPD530-50 |
甲基化检测样本前处理试剂盒 |
50次 |
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JPD530-200 |
甲基化检测样本前处理试剂盒 |
200次 |
标签： 甲基化
美国Zymo Research公司快速DNA甲基化试剂盒 EZ DNA Methlyation-Lightning Kit （D5031）
EZ DNA Methylation-Lightning™ Kit能够快速高效的进行DNA转化，进行甲基化分析，其特点是速度快，无需准备，直接将特异试剂加入DNA，大约1h既可完成反应。DNA变性和亚硫酸氢盐的转化过程结合了额外的热量，以促进快速变性。利用独特的低洗脱纯化柱对转化的DNA进行脱硫和纯化。高产量，转化的DNA可用于PCR，芯片及二代测序等。
美国Zymo Research公司快速DNA甲基化试剂盒 EZ DNA Methlyation-Lightning Kit （D5031）
特点：
1. DNA起始量：100pg-2ug DNA起始；起始量200-500ng效果最理想
2. 转化效率：＞99.5%的非甲基化胞嘧啶转化成U，＞99.5%的甲基化胞嘧啶被保护不被转化
3. DNA回收率：＞80%
4. 操作时间：1.5h
5. 样本类型：纯化的DNA，酶切的DNA，线性质粒DNA等，需要高质量DNA，无RNA污染
6. 洗脱体积：≥10ul
NEB代理,限制性内切酶,用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶,AbaSI#R0665S
产品资料 – 限制性内切酶 – 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶
AbaSI
#R0665S 1,000 units
识别位点
特性
重组酶，EpiMark 验证
概述
AbaSl 是一种 DNA 修饰依赖型核酸内切酶, 能够识别双链 DNA 中的 5-葡糖基羟甲基胞嘧啶
（ghmC），并能在距修饰的胞嘧啶 3´ 侧 11-13 碱基处进行切割，形成一个 2-3 碱基的 3´ 突出末端。该酶只有在距修饰的胞嘧啶 3´ 侧 20-23 核苷酸处有一个鸟嘌呤基团存在时,才可以切割。AbaSl 也识别 5-羟甲基胞嘧啶（hmC），但效率较低；不识别 5-甲基胞嘧啶（mC）或未修饰的胞嘧啶。
反应条件
：1X CutSmart 缓冲液，25℃ 温育。
热失活： 65℃ 20 分钟。
浓度
10,000 units/ml。
NEB代理 , 限制性内切酶 , 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶,DpnI星选酶#R0176L
产品资料 – 限制性内切酶 – 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶
DpnI（星选酶）
#R0176L 5,000 units
#R0176S 1,000 units
#R0176V 500 units
识别位点
在不同反应缓冲液的活性
NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 75%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、EpiMark 验证、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。
浓度
20,000 units/ml。
甲基化敏感性
只有当识别位点被甲基化时，Dpnl 才能切割。从 dam+ 菌株纯化而来的 DNA 才是Dpnl 切割的底物。对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。
NEB代理 , 限制性内切酶 , 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶,FspEI#R0662S
产品资料 – 限制性内切酶 – 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶
FspEI
#R0662S 200 units
识别位点
特性
重组酶，EpiMark 验证
概述
FspEl 是经 EpiMark 验证过的产品，是一种修饰依赖型核酸内切酶，能够识别 CmC 位点并能在修饰的胞嘧啶 3´ 侧 N12/N16 处切割双链 DNA。能被识别的胞嘧啶修饰包括：C5-甲基化胞嘧啶（5-mC）和 C5-羟甲基化胞嘧啶（5-hmC）。
反应条件
1X CutSmart 缓冲液 + 1X 酶活性液，37℃ 温育。
热失活：80℃ 20 分钟。
浓度
5,000 units/ml。
注意事项
延长酶切时间可能会出现星号活性。
NEB代理 , 限制性内切酶 , 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶,LpnPI#R0663S
产品资料 – 限制性内切酶 – 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶
LpnPI
#R0663S 200 units
识别位点
特性
重组酶，EpiMark 验证
概述
LpnPl 是经 EpiMark 验证过的产品，是一种修饰依赖型核酸内切酶，能够识别 CmCDG 位点并能在修饰的胞嘧啶 3´ 一侧 N10/N14 处切割双链 DNA。能识别的胞嘧啶修饰有：C5-甲基化胞嘧啶（5-mC）和 C5-羟甲基化胞嘧啶（5-hmC）。
反应条件
1X NEBuffer 4 + BSA + 1X 酶活性液，37℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。
浓度
5,000 units/ml。
注意事项
延长酶切时间可能会出现星号活性。
NEB代理 , 限制性内切酶 , 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶,MspJI#R0661L
产品资料 – 限制性内切酶 – 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶
MspJI
#R0661L 1,000 units
#R0661S 200 units
识别位点
特性
重组酶，EpiMark 验证
特性
MspJl 是经 EpiMark 验证过的产品，是一种修饰依赖型核酸内切酶，能够识别 mCNNR 位点并能在修饰的胞嘧啶 3´ 一侧 N9/N13 处切割双链 DNA。能被识别的胞嘧啶修饰有：C5-甲基化胞嘧啶（5–mC）和 C5-羟甲基化胞嘧啶（5-hmC）。
反应条件
1X NEBuffer 4 + BSA + 1X 酶活性液，37℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。
浓度
5,000 units/ml。
注意事项
延长酶切时间可能会出现星号活性。
NEB代理,限制性内切酶,用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶,McrBC#M0272L
产品资料 – 限制性内切酶 – 用于表观遗传学甲基化敏感性内切酶
McrBC
#M0272L 2,500 units
#M0272S 500 units
识别位点
特性
测定 CpG 二核苷酸的甲基化状态
测定胞嘧啶甲基化的 DNA
与 McrBC 一起温育的人类和果蝇基因组 DNA。在脊椎动物中估计有 60-90% 的 CpGs 是被甲基化的（6），而果蝇 DNA 中甲基化的 CpGs 非常稀少（大约 12.5 kb 的 DNA 中仅出现一个甲基胞嘧啶，7）。泳道 1：人类 DNA；泳道 2：与 McrBC 一起温育的人类 DNA；泳道 3：果蝇DNA；泳道 4：与 McrBC 一起温育的果蝇 DNA；泳道 M：BstEII 消化的 λDNA（NEB #N3014）。
概述
McrBC 是一种核酸内切酶，无论甲基胞嘧啶*是在 DNA 的一侧链上还是在对侧链上，McrBC都能切割。对未甲基化的 DNA，McrBC 无作用。DNA 上 McrBC 的识别位点由两个 (G/A)mC 形式的半位点组成，这两个半位点之间的距离可以达到 3 kb，但是最佳距离为 55-103 bp。McrBC 的切割需要 GTP，当存在不可水解的 GTP 类似物时，该酶可以特异地结合到甲基化 DNA 上，但不能进行切割。McrBC 作用于一对 PumCG 序列元件,以此检测高比例甲基化的 CpGs，但是不能识别内部胞嘧啶甲基化了的 HpaII/MspI 位点（CCGG）。
* 5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶或者 N4-甲基胞嘧啶。
来源
两种组成蛋白分别纯化自含有编码 McrB和 McrC 质粒的 E.coli K-12 菌株。
反应条件
NEBuffer 2 + BSA + GTP，37℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂
10X NEBuffer 2
100X BSA
100X GTP (100 mM)
对照质粒 DNA
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时切割 0.5 μg 含有多个 McrBC 位点的质粒所需要的酶量。
浓度
10,000 units/ml。
注意事项
McrBC 在每对半位点之间切割一次，切割位点靠近某一个半位点，但是通常距最近的甲基化碱基大约 30 bp。因此，当 DNA 中存在多个 McrBC 半位点时（例如胞嘧啶甲基化基因组DNA），识别序列的可变性导致位点重叠，产生弥散状而不是细窄的条带。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375
有关该产品性质和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。