Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade
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- Promega
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- Promega
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胰蛋白酶 (Trypsin) 是丝氨酸蛋白酶,可特异性地切开赖氨酸和精氨酸残基的羧基端。胰蛋白酶这种严格的特异性是蛋白质鉴定的基础。天然胰蛋白酶易于自我水解,产生假胰蛋白酶,后者特异性较广,含有胰凝乳蛋白酶样活性。存在于胰蛋白酶制剂中的这些自我水解产物能产生多余的肽片段,从而干扰质谱检测到的片段的数据分析。Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade ( 胰蛋白酶,质谱分析级 ) 能提供最大限度的灵敏度。猪胰蛋白酶中的赖氨酸残基已经过还原甲基化修饰,成为活性高且稳定的分子,抗拒自我水解的性能特别强。 纯化的胰蛋白酶的特异性又由于 TPCK 处理使胰凝乳蛋白酶失活而进一步提高。处理过的胰蛋白酶又经过亲和层析纯化,制成冻干粉,成为 Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade。胰蛋白酶常用于胶内消化。消化产物经纯化和浓缩,然后再进行质谱分析确定分子量。然后用肽段的质量搜索数据库,鉴定分离在胶中的蛋白质。产品耐受轻度变性条件 ( 如 0.1% SDS,1M 尿素或 10% 乙腈 ),并在 2M 盐酸胍中仍保留 50% 的活性。当酸性残基存在于易感键任一侧时,胰蛋白酶的活性会降低。如果脯氨酸存在于赖氨酸或精氨酸的羧基端,形成的肽键几乎完全抗胰蛋白酶切割。每批经过质检的 Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade 能够保障进行胶内消化和质谱分析。
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金畔生物试剂,ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix
ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix
通用型高灵敏度染料法定量PCR 检测试剂盒
广泛的平台适用性:特殊的ROX参比染料,适用于所有qPCR仪,无需在不同的仪器上调整ROX浓度。
较高的扩增特异性:使用新型抗体法热启动酶Champagne Taq DNA Polymerase,配以优化的Buffer和特异性促进因子Exactor,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。
优异的扩增灵敏度:预混液在宽广的模板区间具有优异的线性关系,同时可检测出具有个位数拷贝的待测模板。
程序兼容性:预混液可用标准程序和快速程序定量,解决程序的兼容性。
1.优异的特异性
图1
以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix Vazyme #Q711 和Vazyme #Q311 预混液及其它品牌染料法qPCR 试剂,在相同条件下测试25 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示:Vazyme #Q711 预混液能够完成超过96%(24/25) 的目标基因检测,特异性高。
2.平台通用
图2
使用ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme#Q711)在不同类型的qPCR 仪(机型:StepOnePlus、QuantStudio 3、CFX Connect )上扩增GAPDH 基因,定量结果优异。说明Vazyme #Q711 预混液仪器适用性广,无需针对不同仪器调整ROX 浓度。
3.宽广的定量阈
图3
图A 是将pEMT 质粒进行8 个10 倍梯度稀释,图B 是根据图A 的C T 值得出的标准曲线。第8 个梯度中质粒拷贝数浓度约为6 copies/4 μl,使用ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme #Q711)预混液对各稀释梯度中的pEMT 质粒进行检测,每孔模板使用量为4 μl。结果显示,Vazyme #Q711 预混液在宽广的模板量区间内具有优异的线性关系,可以检测出个位数拷贝的待测模板,灵敏度较高。
本产品是使用SYBR Green I嵌合荧光法进行qPCR反应的专用预混液,其中Champagne Taq DNA Polymerase为一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶,具有特异性强、检测灵敏度高等诸多优点,配以针对qPCR优化的合适Buffer以及特异性促进因子Exactor,适合于进行高特异性、高灵敏度的qPCR反应。本产品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye,适应于所有qPCR仪器,无需在不同的仪器上调整ROX的浓度,只需在配制反应体系时加入引物和模板即可进行扩增。
– 20℃避光保存,解冻后可于4℃避光条件下稳定存放6 个月。
可冻融30次;配置好的混合体系(引物、模板、试剂)可于4℃存放6h。