标签： 染色

产品货号:  554656 BD stain buffer染色缓冲液 500mL装

产品名称：BD stain buffer染色缓冲液 500mL装

产品货号:  554656

英文名称：Stain Buffer (FBS)

产品规格：500 mL

产品品牌：BD

产品简介：

BD Pharmingen stain buffer染色缓冲液(FBS)可用于淋巴组织、骨髓、外周血或培养细胞制备的单细胞悬液的免疫荧光染色。染色缓冲液(FBS)对荧光试剂的稀释和应用以及用于流式细胞仪分析的细胞的悬浮液、洗涤和存储都是有用的。基于之前对染色培养基的报道，染色缓冲液(FBS)被配制成中性pH (pH 7.4)缓冲盐溶液(即DPBS)，其中添加了热灭活(56°C, 30分钟)胎牛血清(FBS)蛋白。因此，染色缓冲液(FBS)旨在维持细胞活力，并最大限度地提高ph敏感荧光色素(如异硫氰酸荧光素(FITC))产生的荧光信号强度。此外，染色缓冲液(FBS)含有代谢抑制剂。NaN3抑制抗体交联引起的细胞表面抗原的潜在再分配(例如，由于脱落或内化)。因此，在后续的流式细胞术分析中，NaN3(与维持低温环境温度相结合)可以防止免疫荧光染色细胞产生的荧光信号强度的潜在损失。

 

产品应用:

流式细胞术(常规检测)

 

运输与储存：

保存在4°C未稀释。

 

推荐的实验流程：

1. 使用标准方案从淋巴组织、骨髓、外周血或细胞培养中制备单细胞悬液。

2. 在冷染色缓冲液(FBS)中洗涤细胞两次，并通过离心将细胞制成颗粒(例如，在4°C下300 x g)。用冷染色缓冲液(FBS)重悬细胞颗粒至最终浓度为2 × 10e7 cells/ml。

3.将50µl等量的细胞悬液(10e6细胞)分配到试管或微孔板的圆底孔中。

4. 在染色缓冲液(FBS)中稀释荧光抗体至预定的最佳浓度，并将少量稀释抗体(如10µl)加入含有目标细胞悬液的试管或微孔中。在避光冰上孵育20分钟。染色时间可能增加(≥45分钟)取决于荧光抗体的热情。

5. 用200µl(微孔板)或1ml(试管)染色缓冲液(FBS)洗涤细胞两次，以去除未结合的抗体。细胞以300 x g离心5分钟。每次离心后，小心地抽吸(用于微孔板或试管)或倒置并吸走(用于试管)细胞颗粒上清。

6. 将细胞颗粒重悬在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于试管)的染色缓冲液(FBS)中。将染色细胞从微孔板转移到适当的试管中进行流式细胞分析(将最终体积调整到~0.5 ml)。

7. 染色后尽快(如≤4小时)用流式细胞仪分析染色后的细胞样本。如果必须延迟分析，那么染色细胞可以用缓冲多聚甲醛固定(例如，BD Cytofix™固定缓冲液;猫。编号554655)，4°C保存(避光)。应尽快对固定的细胞进行分析(如染色和固定后一周)

注1:染色缓冲液(FBS)同样可以用于细胞的间接免疫荧光染色。在这种情况下，当使用未标记或生物素化一抗时，重复步骤4和步骤5。当使用生物素化抗体和荧光偶联亲和素对细胞进行染色时，最好使用不含生物素的染色介质，如染色缓冲液(BSA) (Cat。554657号)

注2:染色缓冲液(FBS)也可用于固定细胞表达的表面抗原的免疫荧光染色和细胞内抗原(如细胞因子)的免疫荧光染色。细胞内细胞因子染色的细胞可以在流式细胞仪分析之前，在染色缓冲液(FBS)中重悬和维持(例如，在4°C，避光)。

 

产品订购信息：

货号                名称                   规格

554656   BD   stain buffer     500mL

产品名称：BD stain buffer染色缓冲液 500mL装

产品货号:  554656

关于公司：

BD 多色流式细胞术提供了各种目标细胞亚群的快速、多参数分析。其应用包括免疫学、免疫肿瘤学、病毒学、免疫监测等。

BD Biosciences开发了跨越每条激光线的创新染料，以提供多色实验方案设计灵活性和全面的偶联抗体组合，帮助深度表征表面、细胞内或分泌标记物。从简单到复杂研究应用的流式细胞仪和分选仪，到广泛的试剂选择和教育资源、工具和方案的全面收集，我们支持您有效地管理多色流式细胞仪工作流程。

 

Lifeline 阿尔辛蓝色染色试剂盒

产品说明：

生命线®爱茜蓝染色试剂盒包含：固定溶液，蔗糖稳定剂溶液，爱茜蓝染色溶液和乙酸洗涤溶液用于染色由软骨细胞沉积的硫酸化蛋白聚糖。

产品名称：Lifeline 阿尔辛蓝色染色试剂盒

产品货号：LL-0051

爱茜蓝染色剂的硫酸化蛋白聚糖沉积物指示功能的软骨细胞和它与生命线使用时的有用工具®间充质干细胞和生命线® ChondroLife™全软骨平台。

生命线®成人间充质干细胞分化为软骨细胞和与阿尔新蓝（100X）染色

 

产品订购信息：

品牌      产品货号  产品名称

lifeline  LS-1063   DermaLife Ma LifeFactor Kit

lifeline  LS-1041   DermaLife M LifeFactor Kit

lifeline  LM-0004   DermaLife Basal Medium皮肤活性基础培养基

lifeline  LS-1040   VascuLife SMC LifeFactor Kit

lifeline  LM-0002   VascuLife Basal Medium血管活性基础培养基

lifeline  LL-0014   VascuLife SMC Complete Kit*培养基

lifeline  LL-0059   AdipoLife WJ/BM Complete Kit 成脂培养基套装

lifeline  LL-0050   AdipoLife Ad Complete Kit成脂培养基套装

lifeline  LM-0023   Osteolife Complete Medium, 100成骨*培养基

lifeline  LM-0022   Chondrolife Complete Med., 100软骨形成*培养基

lifeline  LL-0062   StemLife MSC BM Complete Kit骨髓MSC*培养基

lifeline  LL-0034   StemLife MSC Complete Kit*培养基

lifeline  LS-1090   StemLife MSC-BM Lifefactors ki

lifeline  LL-0011   FibroLife-S2 Complete Kit

lifeline  LS-1060   StemLife MSC Lifefactor Kit

lifeline  LS-1083   DifFactor 3, 10 ml, ea

lifeline  LS-1058   MSC LifeFactor, 10ml, Bovine

lifeline  LM-0021   AdipoLife Basal Medium, 100 ml基础培养基

lifeline  LM-0011   StemLife MSC, 485 ml基础培养基

lifeline  LS-1075   DifFactor 2, 5 ml

lifeline  LS-1074   DifFactor 1, 1 ml

产品名称：Lifeline 阿尔辛蓝色染色试剂盒

产品货号：LL-0051

关于公司：

Lifeline是International Stem Cell Corporation（ISCO.OB）的全资子公司，该公司是一家加利福尼亚公司，Lifeline CellTechnology的创始人在25年前帮助引进了正常的人类细胞系统和培养媒体进行研究。生命线仍然是行业的LING导者，通过细致的质量测试、不断的创新和提供客户和技术关怀的热情。Lifeline专门开发和制造纯化的原代人类细胞和优化的细胞培养试剂。开发了突破性的人类干细胞系，有望消除患者免疫系统对移植细胞的排斥。Lifeline致力于为生命科学行业生产高质量的细胞培养介质以及细胞培养中遇到问题的解决方案，凭借其超过25年的专业研究经验，为生命科学研究和生物制药行业提供熟练的技术以及量身定制的试剂，以推进全球生命科学研究的发展。

Lifeline 油红O染色试剂盒

产品说明：

生命线®  油红O染色试剂盒包含：对脂肪细胞染色脂质囊泡固定液，脱水溶液，油红O染色溶液和染色差的解决方案

产品介绍：

它们通过官能脂肪细胞与生命线使用时创建并且是一个有用的工具油红O污渍脂质囊泡®  人间充质干细胞和生命线®  AdipoLife TM  DfKt TM -1或DfKt TM -2脂肪生成媒体。

产品名称：Lifeline 油红O染色试剂盒

产品货号：LL-0052

产品订购信息：

品牌      产品货号  产品名称

lifeline  LM-0050   A HBTEC-ALI Differentiation Media上皮分化培养基

lifeline  LL-0023   BronchiaLife Complete Kit气道上皮细胞培养基完整试剂盒

lifeline  LM-0007   BronchiaLife Basal Medium, 485气道上皮基础培养基

lifeline  LL-0025   RenaLife Medium Complete Kit肾脏上皮细胞培养基完整试剂盒

lifeline  LM-0010   RenaLife Basal Medium, 485 ml肾脏上皮基础培养基

lifeline  LM-0002   VascuLife Basal Medium

lifeline  LL-0002   VascuLife EnGS Complete Kit

lifeline  LL-0003   VascuLife VEGF Complete Kit

lifeline  LL-0004   ENGS-MV Complete Kit

lifeline  LL-0005   VEGF-MV Complete Kit

lifeline  LM-0001   FibroLife®成纤维细胞基础培养基

lifeline  LL-0001   FibroLife®成纤维细胞无血清中等*成套工具

lifeline  LM-0013   FibroLife®XenoFree成纤维细胞冷冻培养基

lifeline  LL-0011   FibroLife®S2成纤维细胞培养基完整试剂盒

lifeline  LL-0039   DermaLife Ma Complete Kit皮肤活性马氏黑素细胞培养基套装

lifeline  LS-1075   DifFactor 2, 5 ml

lifeline  LS-1074   DifFactor 1, 1 ml

产品名称：Lifeline 油红O染色试剂盒

产品货号：LL-0052

关于公司：

Lifeline是International Stem Cell Corporation（ISCO.OB）的全资子公司，该公司是一家加利福尼亚公司，Lifeline CellTechnology的创始人在25年前帮助引进了正常的人类细胞系统和培养媒体进行研究。生命线仍然是行业的LING导者，通过细致的质量测试、不断的创新和提供客户和技术关怀的热情。Lifeline专门开发和制造纯化的原代人类细胞和优化的细胞培养试剂。开发了突破性的人类干细胞系，有望消除患者免疫系统对移植细胞的排斥。Lifeline致力于为生命科学行业生产高质量的细胞培养介质以及细胞培养中遇到问题的解决方案，凭借其超过25年的专业研究经验，为生命科学研究和生物制药行业提供熟练的技术以及量身定制的试剂，以推进全球生命科学研究的发展。

G-biosciences 糖蛋白染色试剂盒

产品名称：G-biosciences 糖蛋白染色试剂盒

产品货号：786-254

英文名称：Glycoprotein Staining

产品规格：10 reactions

产品品牌：G-biosciences

 

产品简介：

用于在凝胶电泳或将蛋白质转移到硝酸纤维素膜后对糖蛋白进行高灵敏度检测。

该试剂盒使用增强型高碘酸希夫 (PAS) 方法检测糖蛋白糖。提供的氧化剂首先将顺式二醇糖基氧化成醛。醛基与敏感的 Glyco-Stain 溶液反应形成席夫键并产生强烈的洋红色带。

除了糖蛋白染色外，该试剂盒还提供 快速染色™，增强的考马斯染色。RAPIDstain™ 可在糖蛋白染色后用于检测非糖基化蛋白，使用该染色剂可增强糖蛋白染色。

糖蛋白染色试剂盒非常方便，因为提供了染色所需的所有关键试剂，并包括*的阳性和阴性对照。此外，该试剂盒允许在单个凝胶或膜上检测糖基化和非糖基化蛋白质。

糖蛋白染色试剂盒提供增强型考马斯染色， 快速染色™，这增强了糖蛋白染色以及染色非糖基化蛋白。

该试剂盒足以容纳 10 块迷你凝胶（8 x 8 厘米）或 20 块硝酸纤维素膜（8 x 8 厘米）。

 

产品特点：

特定糖基化蛋白染色和可选的非糖基化蛋白染色

一个套件中的两个污渍

纳克级灵敏度

稳定的高碘酸盐/希夫染色

 

产品应用：

改进糖蛋白检测

染色聚丙烯酰胺凝胶或硝酸纤维素膜

 

产品组分：

Glyco‐Stain Solution   250ml

Glyco‐Oxidizing Reagent   For 250ml

Glyco‐Reducing Regent For 250ml

Glyco‐Positive & Negative Control 100µg

RAPIDstain™ 250ml

 

产品配套使用：

DMF

15ml collection tubes

 

储存条件

该套件在环境温度下运输。到达后，储存Glyco -Positive负控制在‐20°C，所有其他组件在4°C。

 

产品使用说明：

1. 洗涤液I(3%乙酸):将30ml冰醋酸与970ml去离子水混合水。

2. 洗涤液II(50%甲醇):将250ml甲醇与250ml去离子水混合水。

3.格列柯染色液:使用前，将适量格列柯染色液转移至15或50ml离心管。如果晶体存在，然后在1000 x g离心5用清上清液进行染色。不要使用Glyco‐Stain与用于染色或加热溶解晶体的溶液。

4. 糖氧化试剂:直接加入250ml洗涤液I到糖氧化试剂中氧化试剂瓶。混合以溶解存在于其中的干氧化剂

瓶子。将溶液储存在室温下。

5. 糖还原试剂:直接将250ml去离子水加入糖还原试剂中减少瓶子摄政。混合溶解中存在的干性还原剂

瓶子。将溶液储存在室温下

6. 糖苷‐阳性和阴性对照:在打开试管前，离心试管

以15000xg的速度持续5分钟。将蛋白悬浮在105µl SDS负载缓冲液中;在室温下定期搅拌15分钟(旋涡)。

 

产品订购信息：

货号               名称                                          规格

786-254  糖蛋白染色试剂盒  10个迷你凝胶

 

产品名称：G-biosciences 糖蛋白染色试剂盒

产品货号：786-254

 

关于公司：

Geno Technology, Inc. 的成立旨在简化生命科学研究。我们的主要目标是针对蛋白质研究的关键技术，并找到经济实惠的方法来简化和改进这些技术。多年来，Geno Technology, Inc. 已经扩展到其他研究领域，但我们的主要目标仍然是蛋白质，我们的主要目标“简化和改进这些技术”仍然成立。这一信息在 2010 年随着我们标志性吉祥物“蛋白质人”和 G-Biosciences 品牌（Geno Technology, Inc. 的注册商标）的演变而得到加强。

G-Bioscience 的团队检查了特定实验技术的各个方面，从蛋白质提取到蛋白质纯化和检测，以确定我们可以针对改进的关键领域。因此，我们现在生产各种产品，从浓度和尺寸方便的简单缓冲液到定制设备，例如 Tube-O-Dialyzer，可增强和简化关键技术。我们关注的关键领域包括但不限于蛋白质测定、样品制备、电泳、蛋白质印迹、质谱、测定开发、抗体生产和蛋白质纯化。

G-Biosciences 现在为蛋白质和生命科学研究市场提供数千种产品，所有产品的设计都是为了让研究人员的实验室时间更简单、更实惠。

G-Biosciences Swift免疫印迹膜染色试剂

产品名称：G-Biosciences Swift免疫印迹膜染色试剂

产品货号：786-677

英文名称：Swift Membrane Stain™

产品规格：For 20 Blots

产品品牌：G-biosciences

 

产品简介：

斯威夫特™膜染色是一个*的快速、可逆的,现成的膜染色蛋白质硝基或PVDF膜。与常规使用的Ponceau-S染色剂和其他商业可用的蛋白染色剂相比，Swift™膜染色剂对蛋白质的染色速度更快，灵敏度高出500倍。Swift™膜染色的检测下限为硝化纤维素膜上每条带约0.5ng蛋白(BSA)。Swift™膜染色只对蛋白质进行染色，留下非常清晰的背景，而不需要执行额外的背景去除步骤。强大的染色允许更容易的图像捕捉，因为强大的明亮的蓝色染色对清楚的白色背景。Swift™膜染色可以在不到一分钟的时间内从膜上*去除，而不影响固定化蛋白的生物学或免疫学特性。这比考马斯基染色剂有优势，因为这些染色剂是不可逆的，可以干扰Western印迹。该试剂盒组件足够用于20个8 × 8cm大小的印迹。

 

产品组分：

Swift™ Membrane Stain 250ml 25ml

Swift™ Destain [5X] 200ml 20ml

 

产品特点：

可逆的，即用的蛋白质膜染色

与硝基或PVDF兼容

低检出限为~0.5ng蛋白(BSA)/硝基纤维素膜条带

优于常规使用的Ponceau-S

优于考马斯基污渍

 

产品应用：

PVDF和硝基纤维素膜的可逆染色

 

储存条件：

该套件在环境温度下运输。到达后，将试剂储存在房间内温度，4℃保存试剂将严重影响染色性能。正确储存和处理时，试剂盒组件可以稳定12个月

产品订购信息：

货号         名称                                  规格

786-677  Swift Membrane Stain™   For 20 Blots

 

产品名称：G-Biosciences Swift免疫印迹膜染色试剂

产品货号：786-677

关于公司：

Geno Technology, Inc. 的成立旨在简化生命科学研究。我们的主要目标是针对蛋白质研究的关键技术，并找到经济实惠的方法来简化和改进这些技术。多年来，Geno Technology, Inc. 已经扩展到其他研究领域，但我们的主要目标仍然是蛋白质，我们的主要目标“简化和改进这些技术”仍然成立。这一信息在 2010 年随着我们标志性吉祥物“蛋白质人”和 G-Biosciences 品牌（Geno Technology, Inc. 的注册商标）的演变而得到加强。

G-Bioscience 的团队检查了特定实验技术的各个方面，从蛋白质提取到蛋白质纯化和检测，以确定我们可以针对改进的关键领域。因此，我们现在生产各种产品，从浓度和尺寸方便的简单缓冲液到定制设备，例如 Tube-O-Dialyzer，可增强和简化关键技术。我们关注的关键领域包括但不限于蛋白质测定、样品制备、电泳、蛋白质印迹、质谱、测定开发、抗体生产和蛋白质纯化。

G-Biosciences 现在为蛋白质和生命科学研究市场提供数千种产品，所有产品的设计都是为了让研究人员的实验室时间更简单、更实惠。

埃文斯蓝

品牌：JinPan | 货号：E8010-1g

产品简介

英文名称 EvansBlue
CAS：314-13-6

埃文斯蓝是一种有机化合物，它的化学名称是亚甲基蓝。其CAS号为314-13-6。埃文斯蓝是一种具有广泛应用的染料，主要用于生物医学和实验室研究中的染色实验。
埃文斯蓝具有很强的亲和力，可以与蛋白质和DNA结合，通过染色的方式来观察和研究这些生物分子的性质和功能。
在生物医学领域，埃文斯蓝常用于细胞培养和组织切片的染色工作。它可以用来标记细胞的核酸和蛋白质，从而帮助科研人员观察和研究细胞的结构和功能。
在实验室研究中，埃文斯蓝也被广泛应用于各种染色实验。它可以用来检测DNA片段的大小和纯度，也可以用于凝胶电泳分析和核酸杂交实验等。
总之，埃文斯蓝是一种重要的染料，它在生物医学和实验室研究中扮演着重要的角色，帮助科研人员观察和研究生物分子的特性与功能。
别名 伊文思兰，依文斯蓝，T1824；DirectBlue53
纯度 Dyecontentapprox.80%
分子式 C34H24N6Na4O14S4
分子量 960.81
外观（性状） 红色至红棕色结晶粉末
危险代码 R：45S：53-45
储存条件 RT
有效期 4年
溶解性 1mg/mLinwater
规格 1g
单位 瓶
埃文斯蓝是生物染色剂；测定血容量。用于科研实验研究。

备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

改良天狼星红染色试剂盒

品牌：JinPan | 货号：G1472-2*50ml

改良天狼星红染色试剂盒

产品简介
英文名称 Modified Sirius Red Stain Kit（No Picric Acid）
储存条件 室温,避光
有效期 1年
规格 2*50ml
单位 盒

胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱；Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ型胶原纤维主要在基膜中。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。偏振光镜检查，胶原纤维有正的单轴双折射光的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分不同类型的胶原纤维。

改良天狼星红染色试剂盒主要由铁苏木素染色液和天狼星红染色液组成，不含苦味酸。主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色法试剂便宜，操作简单。

备注：
以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

Fluorochrome,进口品牌

Fluorochrome

Fluorochrome公司专业生产荧光金及荧光金抗体。公司拳头产品荧光金于1985年推向市场，广泛用于神经生物学研究。荧光金在紫外线激发下发金黄色光，特点是非常灵敏，不仅能标记胞浆，而且能很好地显示树突分枝，但核和核仁不染色；在胞体内分解慢，甚至在注射后存活2月标记强度仍无明显变化；比较耐紫外线的照射，褪色比较慢；可以经受许多组织学染色处理，因而可以和HRP、免疫组织化学等方法结合。Fluorochrome公司还提供荧光金抗体及红色荧光金，扩大了其应用范围。

公司网址：http://www.fluorochrome.com/

上海金畔生物科技有限公司代理各种进口试剂耗材，欢迎来电咨询18301939375，量多优惠。网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

-Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341
2′-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
CAS号：23491-45-4
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C25H27Cl3N6O

分子量：

533.88

特点：

● 可用于活/死细胞DNA检测

● 蓝色荧光，毒性低

● 试剂盒稳定性高。

选择规格：
1ml

规格

特性：该产品为黄色液体。

内容：试验成功

产品概述

荧光染料Hoechst 33258是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258,常用于细胞凋亡检测。

Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst染料可透过细胞膜并对DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。它们在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合。Hoechst 33258和Hoechst 33342均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。

图片1.png

荧光特性

λex=350nm, λem=461nm

原理

图片2.jpg

操作说明

染色步骤

1.用PBS或适当的缓冲液制备10-50μMHoechst染料溶液。a）

2.在细胞培养基中加入体积为细胞培养基1/10的Hoechst染料溶液。b）

3.将细胞在37ºC下孵育10-20分钟。

4.用PBS或适当的缓冲液清洗细胞两次。

5.在带有350 nm激发和460 nm发射滤光片的荧光显微镜下观察细胞。

a）由于赫斯特染料可能具有致癌性，因此在处理过程中必须格外小心。

b）或者您可以用1/10浓度的Hoechst染料缓冲溶液代替培养基。

文献

1) M.   J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, “Vital   DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry”, J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.

2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H.   L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang,   “Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA:   Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin   Complex”, Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.

3) T. Ohara and T. Tsuge, “FoSTUA, Encoding a Basic Helix-Loop-Helix Protein, Differentially   Regulates Development of Three Kinds of Asexual Spores, Macroconidia,   Microconidia, and Chlamydospores, in the Fungal Plant Pathogen Fusarium oxysporum”, Eukaryot. Cell, 2004, 3, 1412.

常见问题Q&A

Q1:如何使用Hoechst 33258。

 
A1：有多种使用方法，但以形态观察为例。

它用作观察凋亡细胞中核变化（染色质浓缩，断裂）的简便方法。

<试剂>

・细胞固定液：1％戊二醛/ PBS（-）

・荧光染色：1 mM Hoechst33258 / PBS（-）

•Dojindo的产物为[1 mg / mL]（约1.87 mmol / L）

<操作方法>

1. 将含有约1 x 106个细胞的细胞培养基以400 Xg离心5分钟，并弃去上清液。

2.加入100μL细胞固定溶液，并通过移液或类似方法混合。

3.在室温下静置30分钟。

4.离心400Xg，5分钟，弃去上清液。

加入1 mL PBS（-），用移液器等混合，以400Xg离心5分钟，弃去上清液。

（*此时，戊二醛经常被洗涤和去除。可能会导致变色）

5.添加20μLPBS（-）并混合，然后添加4μL荧光染料并混合。

6.将1滴（5）的细胞溶液滴在载玻片上，盖上玻璃盖，然后按边缘。

7.在荧光显微镜下观察。

*由田沼靖（Yasushi Tanuma）指导的细胞工程独立体积实验规程系列“细胞凋亡实验规程”

 
Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

excel11.png

Q3：Hoechst 33258和Hoechst 33342解决方案的激发波长和发射波长及其区别。
A3:波长如下。
Hoechst33342 Ex：350 nm Em：461 nm
Hoechst33258 Ex：352 nm Em：461 nm

两者的基本用法是相同的。
我们的产品是水溶液，所以稀释至所需浓度并添加。

两者之间的区别在于，它基本上是一种特异性结合腺嘌呤-胸苷部分的药物。
它也穿过活细胞的膜并与活细胞的DNA结合。
Hoechst 33342的膜渗透性略高。
Hoechst 33258似乎是dsDNA的选择性抗体。

活细胞质染色-绿色——Calcein-AM货号：C326

活细胞质染色-绿色——Calcein-AM货号：C326
3′,6′-Di(O-acetyl)-4′,5′-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester
CAS号：148504-34-1
商品信息
储存条件：-20度保存
运输条件：室温
分子式：

C46H46N2O23

分子量：

994.86

特点：

 

● 活细胞和死细胞可同时染色

● 490 nm激发波长，515 nm发射波长

下载说明书
产品文献
SDS下载
选择数量：

选择规格：
1 mg
价格：
¥2480.00现货（会员请登录查看专享价！）
细胞染色
活动进行中
规格性状
产品概述
原理
产品特性
荧光特性
操作说明
参考文献
常见问题Q&A

活动进行中

订购满5000元，200元礼品等你拿

凑单关联产品TOP5

NO.1.    Cell Counting Kit-8     细胞增殖毒性检测

NO.2.    Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST    乳酸脱氢酶(LDH)检测

NO.3.    FerroOrange    细胞亚铁离子检测

NO.4.    Cellstain- PI    细胞核染色

NO.5.    Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit    细胞凋亡检测

 

规格性状

规格

 

特性：该产物为无色至微黄色固体，可溶于二甲基亚砜和乙腈。

可溶于二甲基亚砜：试验成功

NMR光谱：试验成功

产品概述

Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，由于它在Calcein的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Calcein留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂 (如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate) 相比，Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的，因为它的细胞毒性很低。Calcein不会抑制任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。使用了Calcein的活性检测的实验结果是十分可信并且与标准的51Cr-释放法所得结果相一致的。Calcein的激发和发射波长分别为490nm和515nm。

Calcein-AM可与PI结合使用，分别对活细胞和死细胞染色，可用于同时对活细胞和死细胞进行荧光染色。

*Caution* 

Please tap the tube before opening, and open it with care. The content may have relocated from the bottom of the tube during the shipping.

*警告*

打开前请先轻敲试管，并小心打开。 在运输过程中，内装物可能已从试管底部移开。

C326-1.png

原理

Fig. 1  Cell staining mechanism

C326-2.jpg

产品特性

钙黄绿素-AM通过钙黄绿素的四个羧基的乙酰氧基甲基酯化（AM转化）而使其可透过细胞膜。钙黄绿素-AM本身几乎不显示荧光，但通过细胞内酯酶水解变成钙黄绿素。该钙黄绿素是不透膜的化合物，表现出强的黄绿色荧光（λex= 490 nm，λem= 515 nm）。羧基荧光素二乙酸盐（CFDA）和荧光素二乙酸盐（FDA）与荧光素-AM具有相同的荧光素骨架，被称为染色活细胞的染料。但是，这些化合物在显色后容易从细胞膜泄漏，这已成为使用中的问题之一。与这些染料相比，钙黄绿素-AM越来越多地用作显色后从细胞泄漏较少的染料。还已知它不抑制细胞功能，例如淋巴细胞增殖和白细胞趋化性。另外，钙黄绿素-AM在利用杀伤性T细胞和NK细胞的细胞毒性活性的测定中，与使用广泛使用的放射性同位素的51Cr释放方法得到相同的结果，因此细胞毒性较小。钙黄绿素-AM对活细胞染色，并用于在荧光显微镜和流式细胞仪下观察，但是当与死细胞染色染料组合使用时，常用于活细胞和死细胞的双重荧光染色。Papadopoulus等人使用Calcein-AM和Ethidium homodimer（EthD-1）进行双重染色，并使用两种染料的荧光波长差异通过流式细胞术研究细胞毒性。钙黄绿素-AM目前是用于染色活细胞的最有用的染料，因为它的细胞毒性较小，荧光后细胞泄漏较少。如上所述，目前正在使用放射性同位素的测量方法，但是从安全性和便利性的角度出发，期望使用荧光化合物的细胞研究的分析将继续进行。

荧光特性

λex=490 nm, λem=515 nm

操作说明

1. 用1ml无水DMSO溶解1 mg Calcein-AM，制备成1 mmol/l的Calcein-AM母液，-20℃下密闭冷冻保存。

2. 用PBS将Calcein-AM母液稀释制成1-50 µM的Calcein-AM溶液(现配现用)。

3. 吸掉预培养好的细胞中的培养基，用合适的缓冲液清洗2-3次。a)

4. 加入适量的Calcein-AM溶液，在37℃培养细胞15-30分钟。

5. 用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。

6. 用490 nm激发波长，515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

a) 如果Calcein-AM很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如Pluronic® F127。

参考文献

1) K. McGinnes, G.Chapman, R.Marks and R.Penny, “A Fluorescence NK Assay Using Flow Cytometry”, J.Immunol.Methods,1986,86,7.

2) S.J.Morris,”Real-time Multi-wavelength Fluorescence Imaging of Living Cells”, BioTechniques,1990,8(3),296.

3) S.A.Weston and C.R.Parish,”New Fluorescent Dyes for Lymphocyte Migration Studies Analysis by Flow Cytometry and Fluorescent Microscopy”, J.Immunol.Methods,1990,133,87.

4) D.M.Callewaert,G.Radcliff,R.Waite,J.Lefevre and D.Poulik,”Characterization of Effector-Target Conjugates for Cloned Human Natural Killer and Human Lymphokine Activated Killer Cells by Flow Cytometry”,Cytometry,1991,12,666.

5) Han-Qing Xie, R.Huang and V.W.Hu, “Intercellular Communication Through Gap Junctions Is Reduced in Senescent Cell”, Biophys.J,1992,62,45.

6) S.A.Weston and C.R.Parish,”Calcein: a Novel Marker for Lymphocytes Which Enter Lymph Nodes”,Cytometry,1992,13,739.

7) X.M.Wang, P.I.Terasaki,G.W. Rankin Jr. ,D.Chia,H.P.Zhong and S.Hardy,”A New Microcellular Cytotoxicity Test Based on Calcein AM Release”, Hum. Immunol.,1993,37,264.

8) N.G.Papadopoulos,G.V.Dedoussis,G.Spanakos,A.D.Gritzapis, C.N.Baxevanis and M.Papamichail,”An Improved Fluorescence Assay for the Determination of Lymphocyte-Mediated Cytotoxicity Using Flow Cytometry”, J.Immunol.Methods,1994,177,101.

9) L.S.De Clerck,C.H.Bridts,A.M.Mertens,M.M.Moens and W.J.Stevens,”Use of Fluorescent Dyes in the Determination of Adherence of Human Leucocytes to Endothelial Cells and the Effects of Fluorochromes on Cellular Function”, J.Immunol. Methods,1994,172,115.

10) H.Ohata,Y.Ujiki and K.Momose,”Confocal Imaging Analysis of ATP-Induced Ca2+ Response in Individual Endothelial Cells of the Artery in Situ”, Am.J.Physiol. ,1997,272(6),1980.

常见问题Q&A

Q1：与51Cr释放方法有关吗
 

A1: “钙黄绿素-AM与51Cr释放方法之间存在相关性。

以下文件中有一份报告。N.G.Papadopoulos, et.al., J.Immunol.Methods, 177,101-111(1994)”
 

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

excel11.png

 

Q3:细胞染色试剂Cellstain的哪些活细胞染色染料可以在细胞中长时间停留？
 

A3: “就细胞内保留而言，“ CFSE”可以在细胞中停留最长时间。尽管荧光强度降低，但是已经证实细胞中存在荧光染料达8周。用“ Calcein-AM”和“ BCECF-AM”观察到荧光达3天。也有报道称“钙蛋白-AM”在6小时内在细胞中保留了90％”

・S.A.Weston, et.al., J.Immunol.Methods, 133, 87-97(1990)

・H.P.Zhong, et.al., Hum.Immunol., 37, 264-270(1993)”

但是，“钙调蛋白-AM”和“ BCECF-AM”对细胞毒活性没有影响。

・L.S.D.Clerck, et.al., J.Immunol.Methods, 172, 115-124(1994)

还要注意的一点是，原始的基本骨架是荧光素，因此由于激发光而褪色由于容易发生，因此可能难以通过长期激发来观察荧光。

（尽管最好使用防褪色剂等）
Q4：如何使用Calcein-AM。
 

A4：下面以HeLa细胞的情况为例进行介绍。

根据细胞类型和观察条件考虑并固定试剂浓度。

【试剂】

溶液A：将1 mg钙黄绿素-AM溶于1 ml DMSO→1 mmol / L溶液

*将溶液存放在-20°C的阴凉处，以防止变质。

溶液B：用PBS（-）将溶液A稀释500倍（用5 mL PBS稀释10μl溶液A得到2μmol/ L）。

* Calcein-AM在水溶液中分解，因此在使用前请准备溶液B。

【操作】

1）用胰蛋白酶-EDTA收集HeLa细胞并制备细胞悬液。

2）离心细胞悬液（1,000 rpm，3分钟）

3）除去上清液并添加PBS（-）（此时，准备细胞数为105至106细胞/ mL）。

4）用移液器充分分散。

*由于培养液中的血清可能会升高背景，请执行操作2）至4）。

重复并彻底清洗。

5）将30μl在4）中获得的细胞悬液添加至1.5ml微管中。

6）向其中加入15μL[液体B]。

7）盖上微管并在37°C下孵育15分钟。

8）将10μL7）的溶液放在盖玻片上，从上方堆叠盖玻片，然后将染色的细胞悬液夹在中间。

9）将盖玻片放在荧光显微镜下，用490 nm的滤光片激发，观察发出黄绿色荧光的活细胞。

（对于滤光片，如果是490±10 nm，则可以观察到）

*排除血清和酚红，因为它们是背景。

*如果背景很高，请清洁它。

*在载玻片上培养的细胞可以用相同的方式染色和观察。

*有关使用PI的双重染色方法，请参阅方案“我要分别对活细胞和死细胞进行染色”。
 

Q5：我已经购买了钙黄绿素-AM（粉末），并希望将其制成溶液。 我该怎么办？
 

A5:溶于DMSO。

分子量几乎为1000，因此，如果将1 mg溶于1 mL DMSO，它将是1 mM的溶液。

请使用尽可能干燥的DMSO。