支原体检测试剂盒(MycoAlert Mycoplasma Detection Kit)
定义:支原体(mycoplasma),又称霉形体,没有细胞壁的原核生物,为目前发现的zui小的zui简单的原核生物。支原体细胞中*可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。它对许多抗生素具有抗性,如类胸膜肺炎微生物。
一.支原体污染成为细胞培养的重大隐患:
1.研究表明,世界范围内超过15%的培养细胞都有支原体污染。
2.支原体污染会对细胞造成多方面的影响,包括代谢、免疫或生化特性、生长状况、以及细胞存活等多方面的改变。
3.支原体污染会影响实验结果的稳定性、可靠性和准确性。
4.支原体难以检测,同时也很难消除。支原体能轻易地通过标准滤膜,同时也能拮抗绝大多数的抗生素,给细胞培养造成巨大损失。
二.常规检测才能有效避免细胞支原体污染:
1.常规性的进行支原体检测是保证细胞培养中不受到支原体污染影响的*途径。
2.传统的支原体检测方法需要在特殊的选择性培养基作用下对样品进行培养,时间往往达数周,费时,费力并且无法获得足够的灵敏度和特异性。
三. 检测原理
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美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性,进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作,能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解,然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应,将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一个比率,该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在,第二次读数相对于*次读数就没有增加;如果酶与底物进行特异性反应,就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到,其公式如下:
Luciferase
ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP
Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT
这个反应的发生是在室温(18°C~22°C)进行的,也是荧光素酶反应的zui适温度。
在支原体检测试剂盒的检测原理中,zui后通过分光光度计读数,由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系,因此可检测支原体的污染问题。
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Lonza支原体检测试剂盒的产品特征
Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是专门检测细胞培养过程中是否被支原体污染的经典试剂盒,它包含检测所用到的各种试剂和产品操作手册。该支原体检测试剂盒具有操作简单、快速高效、结果稳定可靠、灵敏度*等优点,让您在支原体检测时轻松容易,并确保您的培养洁净无污染。该支原体检测试剂盒的主要特征如下:
四.*Lonza(原Cambrex)公司 MycoAlert 支原体检测试剂盒:
采用发光检测,更能快速反映细胞培养中的支原体污染。避免支原体造成的损害,省力。
1.快速–20分钟就可以得到结果。
2.敏感度–可检测极少量的支原体。
3.简易–仅混合2种试剂和您的样品,将2种读数放到照度计上就可以得到确切结果。
4.完整–试剂盒包括检测用所需要的全部试剂! |
MycoAlert Mycoplasma Detection Kit产品介绍:
Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是专门检测细胞培养过程中是否被支原体污染的经典试剂盒,它包含检测所用到的各种试剂和产品操作手册。MycoAlert支原体检测试剂盒检测原理主要是:细胞培养中存活的支原体被溶解,然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应,将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一个比率,该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在,第二次读数相对于*次读数就没有增加;如果酶与底物进行特异性反应,就会导致ATP含量上升。zui后通过分光光度计读数,由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系,因此可检测支原体的污染问题。同时,该支原体检测试剂盒具有操作简单、快速高效、结果稳定可靠、灵敏度*等优点,让您在支原体检测时轻松容易,并确保您的培养洁净无污染。
MycoAlert Mycoplasma Detection Kit产品特性:
快速检测:20分钟内即可诊断出你的细胞培养是否健康无污染,而其它方法一般要几个小时到一周的时间
应用方便:只需把你的细胞培养物与两种试剂混合配成100l,在分光光度计上读2次数
通用性强:可以检测所有支原体在细胞培养过程中的污染,如支原体属、无胆甾原体属、虫原体属、脲原体属、螺原体属等
检测灵敏:可检测50 cfu/ml的支原体,避免出现像PCR和荧光染色方法出现的阴性结果
成分完备:该支原体检测试剂盒包含实验所需的所有试剂,而不像商业PCR检测方法中需要你提供PCR酶、核酸、限制性内切酶和琼脂糖电泳所需的其它试剂
MycoAlert Mycoplasma Detection Kit英文简述:
The MycoAlert Mycoplasma Detection Kit is a selective biochemical test that exploits the activity of mycoplasmal enzymes which are found in all six of the main mycoplasma cell culture contaminants and the vast majority of 180 mycoplasma species, but are not present in eukaryotic cells. Viable mycoplasma in a test sample (cell supernatant) are lysed and the enzymes react with the MycoAlert Substrate, catalyzing the conversion of ADP to ATP. The ATP is then transferred into a light signal via the luciferase enzyme in the MycoAlert Reagent. By measuring the level of ATP in a sample both before (read A) and after the addition of the MycoAlert Substrate (read B), a ratio can be obtained which is indicative of the presence or absence of mycoplasma.
Convenient fast
Simply add two reagents to the culture supernatant
Perform two luminescence readings
Easy interpretation of results
Results in 20 min
Universal
Detects all common mollicute contaminations (Mycoplasma, Acholeplasma, Entomoplasma and Spiroplasma; except Ureaplasma)
Negligible interference with media components
订购信息
货号 品名 规格
LT07-118 MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 10 tests
LT07-218 MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 25 tests
LT07-418 MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 50 tests
LT07-318 MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 100 tests