One-Step PAGE Gel Fast Preparation Kit (6%)
一步制胶，快到飞起
制胶速度快
上层胶有颜色，操作简便
电泳后条带清晰
无添加TEMED
One-Step PAGE Gel Fast Preparation Kit适用于聚丙烯酰胺凝胶的快速制备。本产品采用上层胶和下层胶的预混配方，只需将试剂两两混合，加入促凝剂即可凝胶。灌入下层胶后，无需液封，可直接灌入上层胶，简便快捷。所配的上层胶带有颜色，方便点样和区分不同凝胶。 配套提供的改良型促凝剂APS，具有良好的稳定性和促凝效果，配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125块mini PAGE胶(以 0.75 mm厚度胶计算)，灌制的凝胶可用于变性或非变性PAGE凝胶电泳。
不同浓度的蛋白胶预混液制胶后，加 5 μl 180 kDa 蛋白 Marker (Vazyme #MP102)电泳；结果显示，在每个浓度下条带均清晰可见。
APS，-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输，可在2 ~ 8℃保存至少3个月；
其他组分，2 ~ 8℃保存
HiScript® II One Step RT-PCR Kit (Dye Plus)
一步法高效RT-PCR试剂盒
逆转录和PCR在同一管内进行
检测灵敏度可达1 pg总RNA
可扩增长达10 kb以上的长片段
PCR产物可直接加样电泳
本试剂盒专为以RNA 为模板( 如RNA 病毒) 的终点法PCR 检测而设计。使用基因特异引物(GSP)，逆转录和PCR 反应在一管内完成，不需要额外的开管/ 移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。试剂盒以便捷的Master Mix 形式提供。2 × One Step Mix (Dye Plus) 包含优化的缓冲体系、dNTP 及加样用染料成分，使用更加方便快捷。
-30 ~ -15℃保存。
HiScript® II One Step RT-PCR Kit
一步法高效RT-PCR 试剂盒
逆转录和PCR 在同一管内进行
检测灵敏度可达1 pg 总RNA
可扩增超过10 kb 的长片段
图1
A. 以Hela细胞总RNA为模板，用HiScript® II One Step RT-PCR Kit (P611) 扩增555 bp GAPDH片段。检测灵敏度可达到0.1 pg。
B. 以猪蓝耳病毒PRRSV RNA为模板，用HiScript® II One Step RT-PCR Kit (P611) 扩增660 bp片段。检测灵敏度可达到0.2 TCID50。
C. 以1 μg Hela细胞总RNA为模板，用HiScript® II One Step RT-PCR Kit (P611)扩增不同长度的片段。可成功扩增长达12.1 kb的UTRN片段。
本试剂盒专为以RNA 为模板( 如RNA 病毒) 的终点法PCR 检测而设计。使用基因特异引物(GSP)，逆转录和PCR 反应在一管内完成，不需要额外的开管/ 移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。整合HiScript® II Reverse Transcriptase以及Champagne Taq DNA Polymerase 的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，HiScript® II One Step RT-PCR Kit 可扩增片段长达10 kb 以上。试剂盒以便捷的Master Mix 形式提供。2 × One Step Mix 包含优化的缓冲体系和dNTPs；One Step Enzyme Mix 包含比例优化的HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor 以及Champagne Taq plus DNA Polymerase，操作简单快捷。
-30 ~ -15℃保存。
新一代AccurSTART一步法RT-qPCR单管预混液
支持引物探针提前预混，加入模板即可反应
探针引物提前预混：探针引物可提前加入预混液中，性能保持稳定
DNA/RNA 共检：稳定实现 DNA、RNA 模板的灵敏扩增
灵敏高效：实现个位数拷贝模板稳定检出
多重扩增：兼容4-5 重扩增
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix (ONE TUBE)是一管式探针法RT-qPCR专用预混液，适用于以RNA为模板(如RNA病毒) 的单重或多重定量PCR检测。本预混液使用基于酶改造的热启动技术，搭配新一代高亲和力Taq酶抗体，实现了酶的高效封闭、准确释放。配合一步法专用Reverse Transcriptase和优化后的化学缓冲，支持引物探针提前预混，配制成工作液后，低温下可长期保存，使用时直接添加待测样品即可，不需要额外的开管/移液操作。预混液中引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。本产品还可兼容快速程序，大大缩短了检测时间。
支持探针引物预先加入的全预混试剂
将AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix (ONE TUBE)（Vazyme #Q621）及其他品牌试剂提前加入探针引物配制成工作液，分别进行4℃ 2周、37℃ 5天的加压和50次的冻融，随后以相同体系的现配工作液为对照进行扩增反应。结果表明Q621可以支持探针引物提前加入配制成工作液，保持长期稳定，在后续实验中仅需加入模板即可实现高效扩增。
模板灵活性
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix (ONE TUBE)经精心优化，可实现 RNA和DNA靶标特异性检测。在各类待检样本中同时检测RNA和DNA病毒是很常见的。以DNA/RNA为模板，在多重体系中进行检测，结果表明Q621可以同时实现DNA、RNA的检测。
|
组分 |
Q621-01 200 rxn（20 ul/rxn） |
Q621-02 1,000 rxn（20 ul/rxn） |
Q621-03 10,000 rxn（20 ul/rxn） |
|
RNase-free ddH2O |
1 ml |
10 ml |
100 ml |
|
U+ One Step RT-qPCR Probe 5 × Master Mixa |
800 μl |
4×1 ml |
40 ml |
|
50×ROX Reference Dye 1b |
80 μl |
400 μl |
4×1 ml |
|
50×ROX Reference Dye 2b |
80 μl |
400 μl |
4×1 ml |
a. 包含dNTP/dUTP Mix、Mg2+、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Heat-labile UDG以及Taq DNA Polymerase。
b. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOnePlus时使用50 × ROX Reference Dye 1；ABI 7500、7500 Fast Real-Time PCR System、Stratagene Mx3000P使用50 × ROX Reference Dye 2；Roche、Bio-Rad的Real Time PCR仪不必使用ROX。
-30～ -15℃保存，≤0℃运输。
扩增性能对标Vazyme#Q225
支持除探针引物外全预混形式
具有较高的稳定性。Vazyme#Q611分别进行4℃存放4周、37℃存放7天、反复冻融10次/30次/50次，经广州、北京、成都三地往返运输7天加压测试，扩增性能保持稳定。
HiScript® III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix是一管式RT-qPCR预混液，适用于以RNA为模板(如RNA病毒)的单重或者多重定量PCR检测，具有较高的稳定性。检测灵敏度可达到0.1 pg总RNA或<10拷贝的RNA模板。
预混液中引入了dUTP/UDG防污染系统，室温下即可发挥作用，55℃逆转录时，Heat-labile UDG迅速失活，不影响qRT-PCR的效率和灵敏度。整合HiScript® III Reverse Transcriptase以及热启动的Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，适用于TaqMan等荧光标记探针的高灵敏度检测系统。
扩增性能对标Vazyme#Q225
分别使用Q611(Vazyme)与Q225(Vazyme)在不同体系(病毒体系、Hela体系)进行RT-qPCR扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增情况。结果显示，不同体系下的Vazyme#Q611与Vazyme#Q225的灵敏度一致，ΔCT均在±0.5之间。
表1：扩增灵敏度对比（Vazyme#Q611 &Vazyme#Q225）
优异的高低模板扩增均衡性
分别使用Vazyme#Q611与竞品TR、NB、TH和ME在不同体系(病毒体系、Hela体系)，对不同模板类型(病毒RNA、HelaRNA)进行梯度稀释，进行RT-qPCR扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增情况，包括扩增灵敏度、扩增平台及扩增线型。结果显示，Vazyme#Q611在高低模板扩增的均衡性上表现更好，扩增性能优异。
图1:扩增曲线对比示意图（Vazyme#Q611 &竞品）
-30～ -15℃保存，≤0℃运输
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)
金畔生物新一代AccurSTART无甘油一步法RT-qPCR预混液
灵敏高效：扩增性能优异
储存稳定：加压和冻融稳定性优越
兼容耐杂：可兼容粪便、组织及拭子等多类型样本
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)是一款以RNA为模板(如RNA病毒)的无甘油一步法RT-qPCR试剂，适用于冻干产品的开发设计。本产品整合一步法专用Reverse Transcriptase以及热启动Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，搭配精心优化的可冻干化学缓冲，具有更优的扩增效率、均衡性和特异性，可兼容不同的冻干工艺。此外，试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。
1. 扩增性能优越
针对不同体系，分别使用QL227与其他品牌的无甘油一步法试剂进行扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增性能。结果显示，QL227在不同体系下的扩增性能均优于对照试剂，扩增性能表现优异。
2. 储存稳定
将QL227分别做不同温度存放和冻融处理，以-20℃储存的试剂为对照，通过扩增性能测试试剂稳定性。结果显示，测试组和对照组试剂的Ct值相差均在±0.5以内，表明QL227具有优异的稳定性。
-30～ -15℃保存，≤0℃运输。
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)
新一代一步法RT-qPCR快检试剂
快速扩增：能够实现 30min 扩增，提高实验效率
兼容耐杂：可兼容鼻咽拭子样本粗裂解液
灵敏高效：可实现低浓度样本稳定检出
DNA/RNA 共检：可稳定实现 DNA、RNA 模板的均衡扩增
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)是一款探针法RT-qPCR快速检测试剂盒，适用于以RNA为模板 ( 如RNA病毒 ) 的单重或多重定量PCR。本产品使用新一代抗体修饰的Taq DNA Polymerase与一步法专用Reverse Transcriptase，搭配专为快速扩增优化的缓冲体系，具有更快的扩增速度、更高的扩增效率以及特异性，可在较短时间内完成多重均衡扩增。此外，本产品引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR 的影响，保证结果的准确性。
实现 30 min 内快速扩增
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) (Vazyme #Q231) 经精心优化，能够耐受较快的升降温速率，实现在ABI Q3 仪器上 30 min 扩增。结果显示，Q231 在快速程序和常规程序下的 CT 值差异在 ±1 之间，平台期差在 10% 之内。
 |
 |
 |
 |
样本兼容性
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) (Vazyme #Q231) 和其他市面品牌的RT-qPCR 试剂，分别扩增粪便和组织等不同类型的样本。计算对照组和测试组的 CT 值差异，结果表明，Q231 在不同类型样本中的扩增灵敏度均优于对照试剂。
体系1 |
体系2 |
低浓度稳定检出
以低浓度新冠假病毒为模板，使用 AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)（Vazyme #Q231）进行扩增。结果表明，在两个多重体系中，32 个低浓度样本检出率均达到 95% 以上。
 |
 |
 |
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
更高的检测灵敏度
适用于多重qPCR
兼容快速程序
更优越的储存稳定性
高低模板浓度扩增均衡
引入 dUTP/UDG 防污染系统
HiScript® III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit专为以RNA为模板（RNA病毒）的定量PCR检测而设计。整合HiScript® III Reverse Transcriptase、RNase inhibitor以及热启动的Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，逆转录和qPCR反应在一管内完成，不需要额外的开管/移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。该产品还引入了dUTP/UDG防污染系统，并且适用于TaqMan等荧光标记探针的高特异性检测系统。此外，本产品还可提供可以冻干的无甘油版本预混液。
优异的扩增性能
HiScript® III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit（Vazyme#Q225）和其他品牌的qRT-PCR试剂进行扩增检测。结果表明，Vazyme#Q225在单重体系和多重体系中扩增性能均优于其他品牌。
优越的储存稳定性
Q225处理组进行反复冻融10次、30次、50次；37℃加压1天、3天、5天、7天，处理组与正常-20℃保存的对照组在不同体系、不同浓度下进行扩增比较。结果表明，Vazyme#Q225试剂具有优越的储存稳定性。
冻融测试：10次、30次、50次
37℃测试：1天、3天、5天、7天
|
组分 |
Q225-01 100 rxns (30 μl/rxn)
|
Q225-02 1,000 rxns (30 μl/rxn)
|
Q225-03 5,000 rxns (30 μl/rxn)
|
|
RNase-free ddH2O |
2 × 1 ml |
20 ml |
100 ml |
|
5 × One Step U+ Mixa |
600 μl |
6 × 1 ml |
30 ml |
|
One Step U+ Enzyme Mixb |
150 μl |
2 × 750 μl |
7.5 ml |
|
50 × ROX Reference Dye 1c |
60 μl |
600 μl |
3 × 1 ml |
|
50 × ROX Reference Dye 2c |
60 μl |
600 μl |
3 × 1 ml |
a. 包含dNTP/dUTP Mix、Mg2+等。
b. 包含HiScript III Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Heat-labile UDG以及Champagne Taq DNA Polymerase。
c. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOnePlus时使用50 × ROX Reference Dye 1；ABI 7500、7500 Fast Real-Time PCR System、Stratagene Mx3000P使用50 × ROX Reference Dye 2；Roche、Bio-Rad的Real Time PCR仪不必使用ROX。
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit
高灵敏度探针法qRT-PCR预混液
优异的扩增灵敏度：整合HiScript® II Reverse Transcriptase及热启动的Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，提升了检测灵敏度
UDG防污染系统：热敏感(Heat-labile)UDG在室温下即可将含U的污染物迅速降解；55℃逆转录时，Heat-labile UDG迅速失活，不会影响qRT-PCR的效率和灵敏度
支持快速程序：兼容快速程序，提高检测效率
兼容多重探针检测
1. 优异的扩增灵敏度
选取三个不同的病毒体系，分别使用HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit (Vazyme #Q222-CN)及其他品牌探针法qRT-PCR试剂(Supplier P、Supplier T)，在相同反应条件下进行扩增。结果显示，与同类产品相比，Q222-CN拥有更高的扩增灵敏度及扩增平台。
 |
 |
 |
|
病毒体系1 |
病毒体系2 |
病毒体系3 |
图1.不同病毒体系单重扩增示意图
2. 优异的多重体系兼容性
选取两个病毒体系(三重、四重体系)，使用HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit (Vazyme #Q222-CN)进行扩增。结果显示，Q222-CN兼容多重体系扩增。
 |
 |
| 病毒体系-三重 | 病毒体系-四重 |
图2.病毒体系多重扩增示意图
HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit专为以RNA为模板(如RNA病毒)的定量PCR检测而设计。检测灵敏度可达到0.1 pg总RNA或<10拷贝的RNA模板。
本试剂盒中引入了dUTP/UDG防污染系统。热敏感(Heat-labile)UDG在室温下即可将含U的污染物迅速降解；55℃逆转录时，Heat-labile UDG迅速失活，不会影响qRT-PCR的效率和灵敏度。试剂盒以便捷的Master Mix形式提供。2×One Step U+ Mix包含优化的缓冲体系和dNTP/dUTP mix，适用于TaqMan等荧光标记探针的高特异性检测系统。
|
组分 |
Q222-CN-00 |
Q222-CN |
|
RNase-free ddH2O |
2 × 800 µl |
76 ml |
|
2×One Step U+ Mixa |
2 × 760 µl |
2 × 38.4 ml |
|
One Step U+ Enzyme Mixb |
154 µl |
7.7 ml |
|
50×ROX Reference Dye 1c |
60 µl |
3 × 1 ml |
|
50×ROX Reference Dye 2c |
60 µl |
3 × 1 ml |
a. 包含dNTP/dUTP mix，Mg2+。
b. 包含HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Heat-labile UDG以及Champagne Taq DNA Polymerase。
c. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
-30 ~ -15℃保存，运输条件≤0℃。
HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit
无缝衔接 dUTP/UDG 防污染系统与一步探针法 qRT-PCR试剂盒
支持多重探针检测
UDG防污染系统： Heat-labile UDG 室温下迅速降解含U 的双链DNA 污染物，Heat-labile UDG 在50-55℃迅速失活，维持cDNA 的完整性
高的检测灵敏度：可检测到个位数拷贝的模板或 0.1 pg 总 RNA
图1. HiScript® II U + One Step qRT-PCR Probe Kit 工作原理
图2. 以 HeLa 细胞总 RNA 为模板，用 HiScript® II U + One Step qRT-PCR Probe Kit 扩增 RFLPO 基因
由图可见，优化的 dUTP 浓度以及 Heat-labile UDG 使得扩增效率和灵敏度不会受到影响。相比之下，E.coli 来源的 UDG 会严重影响 One Step RT-qPCR的检测灵敏度。
dUTP/UDG 防污染系统是一种非常有效的控制 PCR 扩增产物污染的手段。在以 DNA 为模板的 PCR 检测试剂中，已逐渐成为了一种强制标准。不过，常用的 E. coli UDG 在通常的逆转录温度 (42-55℃ ) 下仍具有较高的活性，会降解 cDNA，导致 One Step RT-PCR/qPCR 的灵敏度降低。
HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit 含有比例优化的dUTP/dNTP mix，并加入了来源于嗜冷海洋细菌的Heat-labile UDG。Heat-labile UDG在室温下具有很高的活性，在反应体系混合过程中即可充分降解含U的双链DNA。当反应体系升温至50-55℃ (HiScript® II 的最适反应温度)时，Heat-labile UDG 迅速失活，维持cDNA 的完整性，保证检测灵敏度不受影响。
– 20℃避光保存
HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit
以RNA为模板的探针法qRT-PCR试剂盒
高的检测灵敏度：可检测到个位数拷贝的模板或 0.1 pg 总 RNA
多重检测：支持多重探针检测
图1.A.以1 ng-0.1 pg HeLa 细胞总 RNA 为模板，扩增 RFLPO 基因，线性范围达 5 个数量级，灵敏度可达 0.1 pg。
B.以 10 7 -101 拷贝体外转录的 RNA 为模板，扩增 HCV 基因，线性范围达 7 个数量级，灵敏度可达 10 拷贝。
C.以 10-1 -10-7 稀释度的鸡胚尿囊液病毒 RNA 为模板，扩增新城疫病毒特异基因，可稳定检测到 10-7 稀释度。
图2. 以鸡胚尿囊液病毒RNA 为模板，使用 HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit 同时扩增禽流感 F 和 M 基因
荧光通道为 FAM (M 基因 ) 和 HEX (F 基因 )。可见，双重 PCR 体系中，F 和 M 基因的扩增效率和灵敏度均与单重 PCR 体系中基本一致。
低拷贝数模板或弱阳性样本的检出率仍然是临床诊断的挑战之一。HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit含有比例的HiScript® II Reverse Transcriptase和Champagne Taq DNA Polymerase，以及充分优化的缓冲体系，无论是总RNA，体外转录RNA，或者是病毒RNA，HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit都具有较高的灵敏度，提供稳定可靠的扩增表现。无需过多优化，亦可实现多重扩增。
– 20℃避光保存
HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit
以RNA为模板的染料法qRT-PCR试剂盒
优异的特异性：特殊的添加剂成分，较大程度抑制引物二聚体的产生，定量结果更准确
较高的检测灵敏度：兼顾高扩增效率，可检测低至 1 pg 的总RNA 模板
图1. 以 HeLa 细胞总 RNA 为模板，使用 HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit 及市售其他品牌试剂同时扩增 B2M (A)和 GUSB (B) 基因
与市售其他品牌试剂相比，HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit 扩增效率更高，具有更小的 CT值，且在低模板量下几乎没有引物二聚体产生。
HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit 采用 SYBR Green I 嵌合荧光法，专为以 RNA 为模板( 如 RNA 病毒) 的定量 PCR 检测而设计。 使用基因特异引物 (GSP)，逆转录和 PCR 反应在一管内完成，不需要额外的开管/移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。 整合 HiScript® II Reverse Transcriptase 以及 Champagne Taq DNA Polymerase 的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，检测灵敏度可达到 1 pg 总 RNA。缓冲液中加入的特异性增强因子，可以有效减少引物二聚体的形成，提高特异性。
-20℃避光保存
Bst DNA Polymerase Large Fragment
等温扩增用酶
具有较强的链置换活性
Bst DNA Polymerase Large Fragment 是 Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分， 具有5´→ 3´DNA聚合酶活性，以及较强的链置换 (strand displacement)活性，但缺失5´→ 3´核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应，例如LAMP (Loop-mediated isothermal amplification), RCA (Rolling-circle amplification)等。
|
组 分 |
P701- 01 800 U |
P701- 02 8,000 U |
|
Bst DNA Polymerase Large Fragment a (8 U/μl) |
100 μl |
1 ml |
|
10 × ThermoPol Buffer b |
1 ml |
3 × 1 ml |
|
MgSO4 (100 mM) |
1 ml |
2 × 1 ml |
a. 贮存于10 mM Tris-HCl pH 7.5，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50% 甘油。
b. 200 mM Tris-HCl pH 8.8，100 mM KCl，100 mM (NH4)2SO4，20 mM MgSO4，1% Triton X-100。
-20℃保存。
