金畔生物试剂,Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

优异的扩增性能

兼容不同粗裂解样本

可室温建立体系

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment是经Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的大片段定向改造而来,具有 5'→3' DNA聚合酶活性以及很强的链置换活性,但缺失5'→3'核酸外切酶活性,同时产品结合了新一代的热启动技术,可在低于 50°C 的 温度下抑制聚合酶活性,50°C以上可快速释放酶活性。Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应,具有较高的扩增速度、特异性、耐盐性和热稳定性,支持室温下配制反应试剂。

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

扩增性能强

以λDNA为模板,将λDNA稀释到 2×10copies/μl,模板添加量为5 μl。从图中可以看出,检测灵敏度上,Vazyme #P703与测试Bst酶都能够检测到103 copies/rxn λDNA;在反应速度上,Vazyme #P703快于绝大部分常见同类产品;同时,Vazyme #P703相比于对照产品在抑制非特异扩增上性能更好。

 

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment
Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment  

 

高杂质耐受度

以human-Actin为检测靶标,采集唾液、口腔拭子、全血加入裂解液后涡旋混匀室温放置5 min,模板添加量为5 μl,使用Vazyme #P703和Supplier A、B、C、D按照说明书进行反应,可以看到Vazyme #P703在粗裂解样本中扩增速度优于大多数同类产品。

 

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

 

室温建立体系

使用Vazyme #P703和Supplier A、B、C、D按照各自说明书,分别在加完试剂后立即检测及室温放置3 h后再进行检测,从图中可以看出室温放置3 h后,Vazyme #P703和Supplier B、Supplier C稳定性好,扩增性能基本不发生变化。

 

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment
Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

Bst II Pro DNA Polymerase Large Fragment

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

金畔生物试剂,Bst II DNA Polymerase Large Fragment

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

扩增速度较快

特异性强

杂质耐受度强

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

Bst II DNA Polymerase Large Fragment是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的大片段经定向改造而来,具有5'→3' DNA聚合酶活性,以及很强的链置换活性,但缺失5'→3'核酸外切酶活性。Bst II DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应,如LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification),HDA(Helicase-Dependent Amplification),RCA(Rolling Circle Amplification)等。与Bst DNA Polymerase Large Fragment相比,Bst II DNA Polymerase Large Fragment具有更高的扩增速度、dUTP耐受性、耐盐性和热稳定性。

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

扩增速度快

将λDNA模板稀释到 2×102 copies/μl,2×101 copies/μl,添加量为5 μl/rxn,由图可知,Vazyme #P702产品扩增速度和灵敏度优于对照产品。

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

特异性强

按照各自产品说明书配制反应Mix,进行LAMP反应检测阴性样本,共检测88个阴性样本,根据测试结果可知,使用Vazyme #P702测试所有阴性样本,有98.86%不起峰,说明Vazyme #P702特异性较好。

 

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

 

杂质耐受度强

以human-Actin为检测靶标,采集唾液、口腔拭子、全血加入裂解液后涡旋混匀室温放置5 min,模板添加量为5 μl,从图中可以看出,Vazyme #P702产品耐杂性能较好。

 

Bst II DNA Polymerase Large Fragment Bst II DNA Polymerase Large Fragment Bst II DNA Polymerase Large Fragment

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

Bst II DNA Polymerase Large Fragment

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

金畔生物试剂,疫苗评价CRO服务

疫苗评价CRO服务

 

 

 

   背景

自新冠病毒流行爆发以来,在国家药品监督管理局的部署下,2020年8月药审中心组织制定了《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则(试行)》等一系列指导原则。原则中指出对于新冠疫苗的生物效价检测,要求进行体液免疫的指标评价,必要时对细胞免疫等其他免疫也进行相关研究,特别是采用新佐剂/新辅料或载体系统的疫苗,如目前市面上的mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗等。金畔生物具有完善的抗原、抗体开发和生产平台以及假病毒构建平台,自主研发了新冠抗体ELISA检测试剂盒以及HIV和VSV双系统的新冠假病毒产品,并积极参与了国内各种新冠疫苗技术路线的临床前和临床研究工作,建立起对体液免疫和细胞免疫等的方法学。金畔生物为您提供新冠疫苗评价服务,从临床前到临床“一站式”解决方案,助力疫苗的快速上市!

 

   生物样本分析

 

1. 体液免疫检测

A.  基于新冠假病毒系统的中和活性检测服务

金畔生物新冠假病毒系统基于非复制型慢病毒,具有较高的安全性。该慢病毒外壳插入新冠病毒Spike蛋白,可以高度模拟新冠病毒经细胞表面受体ACE2而侵入细胞的机制;假病毒携带萤火虫荧光素酶报告基因,感染目的细胞的程度与发光信号成正比。

【服务详情

样本类型

血清、血浆或抗体等样本,由客户自行提供

检测试剂

金畔生物提供实验所需HEK293-ACE2稳转细胞系,表达新冠病毒Spike蛋白的假病毒

质控标准品

提供的阳性对照(人源化多抗)

交付文件

项目检测报告及原始数据

检测周期

8-10个工作日

服务优势

1.技术平台:金畔生物自主研发了HIV和VSV双系统的新冠假病毒产品;

2.突变株种类齐全:WT、Delta、Omicron(包括亚型BA.1、BA.2、BA.3、BA.4/BA.5、BA.2.12.1)等响应速度快;

3.检测能力:检测通量高,已为多家疫苗公司及科研机构提供假病毒中和抗体检测服务,保证结果真实可靠

 

【数据展示

使用假病毒系统,在P2安全等级实验室条件下,测评具有潜在中和活性的候选抗体,并绘制抑制曲线(图1)。经P3实验室真病毒感染Vero E6的体外中和功能验证,确认候选抗体体外真病毒中和功能活性与本次假病毒试验结果基本一致。

供试品免疫小鼠后,于不同时间点收集血清,检测免疫后小鼠血清中针对WT假病毒毒株的中和抗体水平(图2)。

疫苗评价CRO服务

 

假病毒相关产品详情<<<<

 

   B. 基于ELISA的结合抗体检测服务

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

【服务详情

样本类型

血清、血浆等样本,由客户自行提供

检测试剂

小鼠新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)检测试剂盒

小鼠新型冠状病毒Spike (Delta)抗体(IgG)检测试剂盒

小鼠新型冠状病毒Spike (Omicron)抗体(IgG)检测试剂盒

新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)检测试剂盒

新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)定量检测试剂盒

交付文件

项目检测报告及原始数据

检测周期

8-10个工作日

服务优势

1.技术平台:金畔生物具有完善的抗原、抗体开发和生产平台,自主研发了新冠抗体ELISA检测试剂盒;

2.检测能力:响应速度快,已为多家疫苗企业及科研单位提供抗体检测服务;

3.可针对突变株(Delta、Omicron)进行结合抗体的检测

 

【案例展示

用ELISA法半定量的方法(起始稀释倍数为500),测定小鼠血清中的新型冠状病毒的S相关IgG抗体。

表1 小鼠血清S IgG抗体滴度检测结果汇总表

样品编号

Sample Number

滴度值

Titer Value of Antibody

空白组1

<500

空白组2

<500

低剂量1

4500

低剂量2

500

高剂量1

13500

高剂量2

13500

(注:表中数据为我司内部研发数据)

 

试验结果判断:

样本A值≥500,则测试样本为IgG抗体检测阳性。

样本A值<500,则测试样本为IgG抗体检测阴性。

 

Elisa试剂盒相关产品详情<<<<

 

 

2. 细胞免疫检测

《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则(试行)》指南中明确提出,对于新冠疫苗的生物效价检测,由于对病原体认知有限及不同类型疫苗免疫机制不尽相同,鼓励对细胞免疫水平的生物学活性开展相关研究,特别是采用新佐剂/新辅料或载体系统的疫苗,如目前市面上的mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗等。因此细胞免疫检测具有重要意义。

 

C. 基于ELISpot的细胞因子检测服务

【检测原理】

在以PVDF膜为基质的96孔板中预先包被抗细胞因子的抗体,待检细胞与抗原刺激物共同在板孔中孵育,受到刺激后的待检细胞会产生细胞因子,细胞因子当即就被位于细胞下方的膜上的单克隆抗体所捕获。在洗去细胞之后,被捕获的细胞因子可以与生物素标记的第二抗体结合,然后用酶标亲和素再与生物素结合,进行化学酶联显色就会形成清晰可辨的斑点,一个斑点代表着一个能够产生细胞因子的细胞。根据斑点数目就可以分析分泌该细胞因子的细胞的频率,可直观的展示出细胞免疫的效果。

【服务详情】

样本类型

脾细胞、PBMC等,由客户自行提供

检测指标

IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13等常见细胞因子

交付文件

项目检测报告

检测周期

8-10个工作日

服务优势

可提供新冠病毒野生株S蛋白全长肽库;可进行方法学验证

【案例展示】

利用野生株S蛋白肽库刺激小鼠脾细胞,检测疫苗免疫后T细胞免疫反应效果,即可通过斑点数监测细胞因子的表达。

 

疫苗评价CRO服务

图 3

 

D. 基于ICS的细胞因子检测服务

【检测原理】

用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌情况。不同于传统的细胞表面抗体染色,此方法先对细胞进行固定,以便稳定细胞膜和交联蛋白质,之后破膜处理,使抗体进入细胞内结合胞内细胞因子并显色。利用3激光10色流式细胞仪,检测疫苗免疫后的T细胞免疫,分析Th1和Th2比例。

【服务详情】

样本类型

脾细胞、PBMC等,由客户自行提供

检测指标

IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13等常见细胞因子

交付文件

项目检测报告

检测周期

15-20个工作日

服务优势

可提供新冠病毒野生株S蛋白全长肽库

 

【案例展示】

利用ICS技术从单细胞水平上分析不同类型细胞因子的表达和对应细胞因子的细胞类型,用多种荧光标记单克隆抗体可在同一细胞水平上,同时测定多种不同的细胞因子表达情况。

疫苗评价CRO服务

图 4

 

   服务流程

 

业务咨询 →  签订合同 →  样品收验 →  实验检测 →  出具报告 →  交付结果

金畔生物试剂,ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

ClonExpress® Ultra One Step Cloning Kit

灵活多变的一体化快速克隆试剂盒

ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

快速:5 – 15min快速重组

简单:一管式Mix,操作简便

高效:高效克隆50 bp~10 kb片段,阳性率>95%

兼容:单片段、多片段、入门克隆三合一

零背景:提供零背景、氨苄/卡那双抗性载体

提供在线引物设计:提供在线引物设计软件CE Design

ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

1.高度简化的实验流程

通过PCR扩增,使插入片段5’和3’最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列(15 – 20 bp)。用2 × ClonExpress® Mix,50℃反应5-15 min,进行重组。重组产物直接转化感受态细胞,平板上会形成数百个单克隆供阳性筛选。

 

2.优异的克隆效率

试剂盒能够高效克隆50 bp-10 kb片段,不同长度单片段50 bp、2 kb、4.5 kb、7.5 kb、10 kb;多片段:四个片段(3 kb)、三个片段(10 kb)、五个片段(3 kb)、五个片段(6 kb),纯化后分别与pCE-Zero vector进行同源重组,重组产物转化化学感受态细胞DH5α(Vazyme #C502),菌落数如下图所示。

试剂盒独特的非连接酶依赖体系,无载体自连,克隆阳性率高达95%以上。重组产物转化平板后,各挑取50个单克隆进行菌落PCR鉴定,不同长度插入片段阳性率如下图所示。

ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit       ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

 

3.广泛的体系兼容性

试剂盒兼容1至5个片段同源重组,搭配Vazyme高保真酶,PCR产物可不经过纯化直接进行克隆。重组产物转化化学感受态细胞DH5α(Vazyme #C502),XL10(Vazyme #C503),Fast-T1(Vazyme #C505),得到较高克隆效率。

 

4.载体序列信息及测序方案

pCE-Zero vector载体,测序时使用通用测序引物(M13)即可。

ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

ClonExpress® Ultra One Step Cloning Kit是新一代的重组克隆试剂盒,可快速高效的将1-5个片段定向克隆至任意载体的任意位点,高度优化的2 × ClonExpress® Mix,50℃反应5-15 min完成重组,操作简单快捷。

ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

组分

C115-01(25 rxns)

C115-02(50 rxns)

2 ×ClonExpress Mix

125 μl

2 × 125 μl

pCE-Zero vector,linearized (50 ng/μl) *

25 μl

50 μl

500bp control insert (20 ng/μl)

5 μl

5 μl

*双抗性载体:Amp+,Kan+

ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

– 20℃保存。

金畔生物试剂,ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

ClonExpress® MultiS One Step Cloning Kit 

非连接酶依赖型的多片段一步克隆技术

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

可在几乎任何载体的任意位点进行多片段拼接克隆

无需考虑插入片段自身携带的酶切位点

可一次实现二至五个插入片段的顺序拼接

线性化克隆载体和 PCR 产物可不进行纯化直接克隆

提供在线引物设计软件CE Design

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

ClonExpress® MultiS是针对多片段克隆开发,试剂盒中包含专门针对多片段重组优化的buffer和重组酶Exnase® MultiS。首先将载体进行线性化,并在插入片段PCR引物5'-端引入线性化载体的末端序列;之后将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化载体按一定比例混合后,在Exnase®的催化下,仅需反应30 min即可进行转化,完成定向克隆,阳性率可达95%以上。使用本试剂盒,可以将多至五个片段一次性顺序拼接,简化了实验步骤。

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit

 

– 20℃保存

 

金畔生物试剂,ClonExpress II One Step Cloning Kit

ClonExpress® II One Step Cloning Kit 

非连接酶依赖型单片段快速克隆试剂盒

ClonExpress II One Step Cloning Kit

  • 简单、快速、高效,适用于任何载体

  • 无需考虑插入片段携带的酶切位点

  • 可高效克隆 50 bp-10 kb 的 DNA 片段

  • 线性化克隆载体和 PCR 产物可不纯化直接克隆

  • 无连接酶,无自连,阳性率 >95%

  • 提供在线引物设计软件CE Design

ClonExpress II One Step Cloning Kit

1.克隆效率高

ClonExpress II One Step Cloning Kit

1

重组产物转化后平板上一般可形成数千个单克隆,而无插入片段的阴性对照反应转化后只有数个单克隆形成。因此ClonExpress® 系统的自连背景会大大降低连接酶依赖的克隆方式。

 

2.克隆阳性率95%以上

ClonExpress II One Step Cloning Kit

图2 

鉴定酶切结果表明,克隆阳性率可达95%以上。

ClonExpress II One Step Cloning Kit

ClonExpress® 技术是一种简单、快速并且高效的 DNA 无缝克隆技术,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。 ClonExpress® II 是新一代重组克隆试剂盒,包含增强的重组酶 Exnase® II。使用任意方式将载体进行线性化;在插入片段正 / 反向 PCR 引物 5’ 端引入线性化载体的末端序列,使得 PCR 产物 5’ 和 3’ 最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列 (15 bp-20 bp)。这种两端带有载体末端序列的 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后,在Exnase®II 重组酶的催化下,仅需反应 30 min 即可进行转化,完成定向克隆,阳性率可达 95% 以上。

ClonExpress II One Step Cloning Kit

ClonExpress II One Step Cloning Kit

ClonExpress II One Step Cloning Kit

– 30℃~-15℃保存

金畔生物试剂,Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express® MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

一步法多点突变试剂盒

Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

Phanta® Max Super-Fidelity DNA Polymerase提供突变率低的高保真PCR

Phanta® Max Super-Fidelity DNA Polymerase优异的长片段扩增能力,广泛适用于20 kb以内任何质粒的扩增

扩增以指数方式进行,模板使用量低,有利于原始甲基化模板的彻底降解

ClonExpress®快速克隆系统高效环化PCR产物

DpnI消除原始模板污染

可一步实现目标质粒上三至五个不连续位点(相距超过50 bp)的定点突变

提供在线引物设计软件CE Design

Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

使用Mut Express® MultiS 进行不连续三点突变实验流程:

以待突变位点A、B、C 为界,将质粒分为AB、BC 和CA 三段。在每个待突变位点处设计部分反向互补的引物。以原始质粒为模板,分别扩增AB 段(A Forward Primer 和B Reverse Primer)BC 段(B Forward Primer 和C Reverse Primer) 和CA 段(C Forward Primer和A Reverse Primer) (I)。扩增产物经DpnI消化(I) 后,进行重组环化(II)。重组产物直接进行转化即可完成定点突变(III)。

Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

 

Mut Express® MultiS Fast Mutagenesis Kit V2 是基于ClonExpress® 快速克隆技术的多位点定点突变系统。使用本试剂盒,可一次性向目标质粒上三至五个不连续位点同时引入定点突变。该试剂盒由Phanta® Max Super-Fidelity DNA Polymerase 扩增模块和ClonExpress®快速克隆模块组成。Phanta® Max Super-Fidelity DNA Polymerase 较高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性。ClonExpress® 快速克隆系统利用高效同源重组技术替代了传统的退火成环反应,大大提高了环化效率。使用Mut Express® MultiS 定点突变试剂盒进行DNA 定点突变时,引物设计灵活、模板需求量低,且如扩增产物特异,DpnI 消化后可不进行DNA 纯化而直接用于重组反应。专门针对多位点定点突变而优化的重组酶、高度优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及惊人的定点突变效率,使得Mut Express® MultiS Fast Mutagenesis Kit V2 成为DNA 多点突变选用试剂盒。

Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2

– 20℃储存

金畔生物试剂,Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express® II Fast Mutagenesis Kit V2

一步法单 / 双点突变试剂盒

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

Phanta® Max Super-Fidelity DNA Polymerase 高保真酶提供保真度高的PCR 反应
       扩增以指数方式进行,模板使用量低,有利于原始甲基化模板的彻底降解
       扩增产物经DpnI 消化后可直接用于重组反应
       可对目标质粒上单个位点或两个不连续位点( 相距超过50 bp) 同时进行定点突变

提供在线引物设计软件CE Design

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

实验流程:

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express® II Fast Mutagenesis Kit V2 是基于ClonExpress® 快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒,目标质粒扩增产物经DpnI 消化、ClonExpress® 重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由Phanta® Max Super-Fidelity DNA Polymerase 扩增模块和ClonExpress® 快速克隆模块组成。Phanta® MaxSuper-Fidelity DNA Polymerase 较高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性,ClonExpress® 快速克隆系统利用高效同源重组反应替代了传统的退火成环反应。高度优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及高的成功率,使得Mut Express® II Fast Mutagenesis Kit V2 成为DNA 定点突变选用试剂盒

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

Mut Express II Fast Mutagenesis Kit V2

– 20℃储存

金畔生物试剂,5min Universal Ligation Mix

5min Universal Ligation Mix

快速的酶连克隆试剂盒

5min Universal Ligation Mix

兼容:兼容黏性末端,平滑末端,TA连接,Linker或Adapter连接;

快速:25℃,5 min即可快速连接;

高效:克隆效率高。

5min Universal Ligation Mix
5min Universal Ligation Mix

图1. 5 min Universal Ligation Mix实验流程示意图

5min Universal Ligation Mix

5 min Universal Ligation Mix是一种酶和Buffer混合的即用型2 × 预混液,内含T4 DNA ligase,催化双链DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。本试剂盒不仅适用于黏性末端连接,也兼容平滑末端和单碱基突出末端的DNA连接,优化的连接增强剂及反应缓冲液使反应更加高效便捷,25℃反应5 min即可快速连接,连接产物可直接转化多种化学感受态细胞。

5min Universal Ligation Mix

组分

 C311-01(50 rxns)
 C311-02(100 rxns)

2 × Universal Ligation Mix

250 μl

2 × 250 μl

5min Universal Ligation Mix

-30 ~ -15°C保存

金畔生物试剂,T4 DNA Ligase

 T4 DNA Ligase

催化 dsDNA 平末端或粘性末端连接反应

T4 DNA Ligase

纯度大于99%,无外源核酸酶活性残留

经典的缓冲液成分,使连接反应可以高效进行

T4 DNA Ligase

T4 DNA Ligase 可催化dsDNA 平末端或粘性末端相邻核苷酸的5’ 磷酸末端和3’ 羟基末端形成磷酸二酯键,还可催化RNA 和双链中的ssDNA 或RNA 链连接,但不能催化全单链核苷酸连接。适用于标记RNA 3’ 末端,环化RNA 和DNA 寡聚核苷酸,克隆长片段cDNA 等核酸操作。

T4 DNA Ligase

组分

C301-01 40,000 U

10 × Ligase Buffer *

1 ml

T4 DNA Ligase (400 U/μl)

100 μl

*Buffer 在融解时,如果出现少量沉淀属正常现象,请颠倒混匀后使用。

T4 DNA Ligase

-30 ~ -15°C保存。

金畔生物试剂,Fast-T1 化学感受态细胞

Fast-T1 化学感受态细胞

Fast-T1 化学感受态细胞

生长快速:在氨苄青霉素抗性平板上,培养8-9 h 可见克隆;过夜培养的单克隆在2 ml 的LB 液体培养基中,培养4-5 h 可进行小量质粒DNA 提取

兼容抗性:具有T1 和T5 噬菌体抗性

操作简便:对于含氨苄青霉素抗性质粒及连接产物,5 min 完成快速转化

Fast-T1 化学感受态细胞

1.生长快速

Fast-T1 化学感受态细胞

 

图A:使用pUC19质粒DNA分别转化Fast-T1,XL10,DH5α和T1,过夜培养。取单克隆至3 ml LB液体培养基中培养。取相同起始量的各菌液接种至50 ml LB液体培养基中培养,每隔0.5 h检测OD600。如右图所示:Fast-T1感受态细胞生长速度与T1一致,均高于DH5α和XL10。

图B:使用pUC19质粒DNA分别转化Fast-T1和XL10感受态细胞,测试可见克隆及小量质粒DNA提取所需时间。如右图所示:在氨苄青霉素抗性平板上,培养8-9 h可见克隆;将过夜培养的单克隆在2 ml的LB液体培养基中,培养4-5 h即可进行小量质粒DNA提取。说明Fast-T1感受态细胞的生长速明显快于XL10。

 

2.操作简便

 

Fast-T1 化学感受态细胞

Fast-T1 化学感受态细胞

对于含氨苄青霉素抗性质粒及连接产物,5 min完成快速转化。

Fast-T1 化学感受态细胞

组分

C505-02

C505-03

Fast-T1 competent cell

10 ×100 μl

20 × 100 μl

Fast-T1 化学感受态细胞

-70°C保存。请勿将本品置于-20°C或液氮中保存。

金畔生物试剂,BL21 (DE3) 化学感受态细胞

BL21 (DE3) 化学感受态细胞

BL21 (DE3) 化学感受态细胞

遗传背景明确

BL21 (DE3) 品系,以T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主

适合非毒性蛋白重组表达

BL21 (DE3) 化学感受态细胞

本品为使用大肠杆菌BL21 (DE3) 菌株制备的化学转化感受态细胞,转化效率超过107 cfu/μg。适用于T7 启动子系统的表达载体( 如pET 系列),基因型F-ompThsdS(rB-mB-) galdcm (DE3)。

BL21 (DE3) 化学感受态细胞

组分

C504-02

C504-03

BL21(DE3) competent cell

10 ×100 μl

20 × 100 μl

BL21 (DE3) 化学感受态细胞

-85 ~ -65°C储存。

金畔生物试剂,XL10化学感受态细胞

XL10化学感受态细胞

XL10化学感受态细胞

XL10 品系,具有四环素(Tetr) 和氯霉素(Camr) 抗性,新型克隆菌株

适合PCR 产物、cDNA 以及其他来源的非甲基化DNA 的高效转化

endA1,RecA1 突变,确保外源DNA 在宿主菌中的稳定性,有利于高质量质粒DNA 提取

Hte 基因型,增强大片段DNA 转化效率,并使宿主菌细胞生长速度大幅度提高

无外源质粒DNA 残留,转化效率≥10cfu/μg pUC19

XL10化学感受态细胞

本品为克隆用化学感受态细胞使用改良Inoue 法制备,增强大片段DNA 转化效率,并使宿主菌细胞生长速度大幅度提高。转化效率超过108 cfu/μg,广泛适用于质粒转化、基因克隆、蓝白斑筛选等用途。改良的大肠杆菌,增强大片段DNA 转化效率,并使宿主菌细胞生长速度大幅度提高。基因型Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacTetr Hte [F′ proAB lacI qZΔM15 Tn10(Tet r) Amy Camr ]

XL10化学感受态细胞

XL10化学感受态细胞

XL10化学感受态细胞

-80°C保存。请勿将本品置于-20°C或液氮中保存。

 

金畔生物试剂,DH5α 化学感受态细胞

DH5α 化学感受态细胞

DH5α 化学感受态细胞

适合PCR 产物、cDNA 以及其他来源的非甲基化DNA 的高效转化。

endA1,RecA1 突变,确保外源DNA 在宿主菌中的稳定性,有利于高质量质粒DNA 提取

可用于对重组质粒进行蓝白斑筛选

转化效率≥108cfu/μg pUC19 DNA

DH5α 化学感受态细胞

本品为使用大肠杆菌DH5α 菌株制备的化学转化感受态细胞,转化效率超过108 cfu/μg,广泛适用于质粒转化、基因克隆、蓝白斑筛选等用途。基因型deoR endA1 gyrA96 hsdR17 (rk-mk+)recA1 relA1 supE44 thi-1 Δ(lacZYA-argF)U169 Φ80lacZ ΔM15F – λ –

DH5α 化学感受态细胞

组分

C502-02

C502-03

DH5α Competent cell

10 × 100 μl

20 × 100 μl

DH5α 化学感受态细胞

-85 ~ -65°C储存。

金畔生物试剂,5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

高阳性率

反应快速

连接片段更长

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit采用第三代Topoisomerase,配合合适的Buffer,活性更高,搭配自连抑制因子,提高克隆阳性率,5 min 完成高效连接。C602适用于平末端连接。

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

连接片段更长,高阳性率

将1kb、3kb、7kb回收后的片段使用C602 25℃连接5 min,进行转化涂板后,挑取单克隆进行菌落PCR验证。如图1,1kb、3kb、7kb片段的阳性率均为100%。

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

图1:1kb、3kb、7kb三个片段连接后的阳性率鉴定

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

5 min TOPO-Blunt Cloning Kit

-30~ -15℃ 保存

金畔生物试剂,5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

基于拓扑异构酶的快速克隆试剂盒

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

兼容:能够同时兼容TA克隆和平末端克隆;

快速:加入片段,反应5 min即可。

高效:克隆效率高且阳性率>95%。

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

1.兼容性强

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

 

2.简单快速

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

 

3.阳性率高:使用插入片段为1kb,转化后随即挑取单克隆进行菌落PCR鉴定,Marker为金畔生物DL5000 DNA Marker(MD102)

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

本产品是第二代TOPO克隆试剂盒,包含第二代Topoisomerase、含有自杀基因ccdB的载体以及平末端因子。使用第二代Topoisomerase,配合合适的buffer,活性更高,进一步提高克隆效率,室温5 min完成高效连接。使用含有自杀基因ccdB的载体,当插入片段与载体成功连接时,破坏ccdB正确表达,宿主细胞能够正常生长,否则宿主细胞不能正常生长,从而实现“Zero”背景。添加平末端化因子,使得本产品能够同时兼容TA克隆与平末端克隆。

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

组分

C601-01(25 rxns)

C601-02(50 rxns)

5×TA/Blunt-Zero Cloning Mixa

25 μl

2 × 25 μl

500 bp Control insert(20 ng/μl)

5 μl

10 μl

M13 Primer Mix(10 μM)b

200 μl

400 μl

a.包含Topoisomerase和pCE2 TA/Blunt-Zero Vector(双抗性载体:Amp+,Kan+)

b.包含M13 Forward Primer 和M13 Reverse Primer

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

-30~-15°C保存,可于-20~0°C运输。

金畔生物试剂,100 bp DNA Ladder

DNA Marker/Ladder

稳定、清晰、准确的DNA 分子量Marker

100 bp DNA Ladder

稳定性好:室温可存放6 个月,所有条带清晰、致密

操作简便:即用型产品,跑胶时可直接取适量本产品进行电泳

100 bp DNA Ladder

100 bp DNA Ladder

100 bp DNA Ladder

DNA Marker/Ladder 由特定分子量的双链DNA 片段组成,已混有含蓝色染料的上样缓冲液,适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA 分子量标准。DNA Marker/Ladder 中所有片段均由质粒经酶切、纯化后获得,电泳时Marker/Ladder 的条带更加清晰、致密;条带之间的质量比更准确、真实。DL2000 Plus DNA Marker 中的750 bp 片段、DL5000 DNA Marker 中的1,000 bp 片段、100 bp DNA Ladder 中的500 bp 片段以及1 kb DNA Ladder 中的5 kb 片段的DNA 浓度为100 ng/5 μl,显示亮带;其余所有条带的DNA 浓度为50 ng/5 μl。

100 bp DNA Ladder

100 bp DNA Ladder

100 bp DNA Ladder

-20℃保存;融化后于4℃保存,避免反复冻融。

金畔生物试剂,DL 15000 DNA Marker

DNA Marker/Ladder

稳定、清晰、准确的DNA 分子量Marker

DL 15000 DNA Marker

稳定性好:室温可存放6 个月,所有条带清晰、致密

操作简便:即用型产品,跑胶时可直接取适量本产品进行电泳

DL 15000 DNA Marker

DL 15000 DNA Marker

DL 15000 DNA Marker

DNA Marker/Ladder 由特定分子量的双链DNA 片段组成,已混有含蓝色染料的上样缓冲液,适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA 分子量标准。DNA Marker/Ladder 中所有片段均由质粒经酶切、纯化后获得,电泳时Marker/Ladder 的条带更加清晰、致密;条带之间的质量比更准确、真实。DL2000 Plus DNA Marker 中的750 bp 片段、DL5000 DNA Marker 中的1,000 bp 片段、100 bp DNA Ladder 中的500 bp 片段以及1 kb DNA Ladder 中的5 kb 片段的DNA 浓度为100 ng/5 μl,显示亮带;其余所有条带的DNA 浓度为50 ng/5 μl。

DL 15000 DNA Marker

DL 15000 DNA Marker

DL 15000 DNA Marker

-20℃保存;融化后于4℃保存,避免反复冻融。

金畔生物试剂,DL5000 DNA Marker

DNA Marker/Ladder

稳定、清晰、准确的DNA 分子量Marker

DL5000 DNA Marker

稳定性好:室温可存放6 个月,所有条带清晰、致密

操作简便:即用型产品,跑胶时可直接取适量本产品进行电泳

DL5000 DNA Marker

DL5000 DNA Marker

DL5000 DNA Marker

DNA Marker/Ladder 由特定分子量的双链DNA 片段组成,已混有含蓝色染料的上样缓冲液,适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA 分子量标准。DNA Marker/Ladder 中所有片段均由质粒经酶切、纯化后获得,电泳时Marker/Ladder 的条带更加清晰、致密;条带之间的质量比更准确、真实。DL2000 Plus DNA Marker 中的750 bp 片段、DL5000 DNA Marker 中的1,000 bp 片段、100 bp DNA Ladder 中的500 bp 片段以及1 kb DNA Ladder 中的5 kb 片段的DNA 浓度为100 ng/5 μl,显示亮带;其余所有条带的DNA 浓度为50 ng/5 μl。

DL5000 DNA Marker

DL5000 DNA Marker

DL5000 DNA Marker

-20℃保存;融化后于4℃保存,避免反复冻融。

金畔生物试剂,DL2000 Plus DNA Marker

DNA Marker/Ladder

稳定、清晰、准确的DNA 分子量Marker

DL2000 Plus DNA Marker

稳定性好:室温可存放6 个月,所有条带清晰、致密

操作简便:即用型产品,跑胶时可直接取适量本产品进行电泳

DL2000 Plus DNA Marker

DL2000 Plus DNA Marker

DL2000 Plus DNA Marker

DNA Marker/Ladder 由特定分子量的双链DNA 片段组成,已混有含蓝色染料的上样缓冲液,适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA 分子量标准。DNA Marker/Ladder 中所有片段均由质粒经酶切、纯化后获得,电泳时Marker/Ladder 的条带更加清晰、致密;条带之间的质量比更准确、真实。DL2000 Plus DNA Marker 中的750 bp 片段、DL5000 DNA Marker 中的1,000 bp 片段、100 bp DNA Ladder 中的500 bp 片段以及1 kb DNA Ladder 中的5 kb 片段的DNA 浓度为100 ng/5 μl,显示亮带;其余所有条带的DNA 浓度为50 ng/5 μl。

DL2000 Plus DNA Marker

DL2000 Plus DNA Marker

DL2000 Plus DNA Marker

-20℃保存;融化后于4℃保存,避免反复冻融。

金畔生物试剂,Ultra GelRed (10,000 ×)

Ultra GelRed (10,000 ×)

 高安全性跑胶助手

Ultra GelRed (10,000 ×)

无毒性:Ultra GelRed 的大分子特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果表明其诱变性远远小于EB

稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶

适用范围广:适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA 及RNA 染色

Ultra GelRed (10,000 ×)

SYBR Green、SYBR Safe 和Ultra GelRed 细胞膜通透性实验。由图可知,Ultra GelRed 不能进入细胞内

Ultra GelRed (10,000 ×)

Ultra GelRed (10,000 ×)

Ultra GelRed是一种可以替代溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,具有灵敏度高,热稳定性强等诸多优势,对微量DNA,尤其是微量小分子DNA具有更高的检测灵敏度。经本品染色的DNA条带在紫外光透射下呈现红色荧光,适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。

Ultra GelRed (10,000 ×)

Ultra GelRed (10,000 ×)

Ultra GelRed (10,000 ×)

15 ~ 25℃避光保存。

金畔生物试剂,HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

HiScript® II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

稳定性高、适配自建一步法体系的可冻干逆转录酶

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

稳定性高:拥有较高的试剂稳定性

适配于自建一步法体系:在自建一步法体系(qRT-PCR预混液)中有着高效的逆转录性能

 HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

HiScript® II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)HiScript® II Reverse Transcriptase(Vazyme #R201)的可冻干版本。Vazyme #RL201完全去除甘油,将冻干的可行性与甘油版逆转录酶良好的性能、稳定性结合在一起。该产品适配自建一步法体系,稳定性高。

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

稳定性高 

HelaRNA为模板(100 ng/μl),使用Vazyme #RL201进行逆转录反应,得到的cDNA在四个体系下(T28/T29/T76/T78)进行qPCR定量分析。从图中可以看出Vazyme #RL201在冻干前后稳定性测试、批次间稳定性测试、热稳定性测试实验中,△CT均在±0.5之间(△CT= CT (不同处理后样品)– CT(未处理样品),说明Vazyme #RL201具有优异的稳定性。

 

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

 

适配于自建一步法体系

以不同拷贝H1N1/乙流/HeLa20000/2000/200 copies/mlRSV(50000/5000/500 copies/mlRNA为混合模板,使用Vazyme #RL201自建一步法体系进行检测,可以看到所有复孔均能稳定检出且检出率100%,说明Vazyme #RL201在自建一步法体系中具有良好的逆转录性能。

 

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

HiScript II Reverse Transcriptase (Glycerol-free)

– 30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

金畔生物试剂,HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

第三代高效cDNA 一链合成试剂盒(去基因组)

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

基于更高效的HiScript® III Reverse Transcriptase:逆转录效率高于二代产品

灵活选择引物: 针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物

gDNA wiper Mix可迅速彻底去除基因组污染:保证后续结果更加可靠,并可简化qPCR引物设计,无需跨内含子设计引物

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

1.后续实验为PCR

以1μg  HeLa细胞RNA为模板,按照R302说明书推荐体系进行逆转录,以1μl cDNA为模板,用2 × Vazyme Lamp® Master Mix (Dye Plus)(Vazyme #P312)进行长片段扩增,将得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如图1所示:扩增条带单一且产量高

 

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

图1.长片段扩增电泳图

注:M:DL15000 Marker(Vazyme #MD103)

 

2. 后续实验为qPCR

以100 ng HeLa 细胞 RNA为模板,使用 HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)(Vazyme #R312) 以及其他逆转录产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应。将得到的 cDNA 进行多个基因的 qPCR定量分析。以不同公司产品为横坐标,△CT (△CT = Vazyme #R312 cDNA扩增CT值–各公司逆转录产品 cDNA 扩增CT值)为纵坐标绘图。从图中可以看出,除一些体系Th1△CT>0外,其余逆转录产品均△CT<0,说明 Vazyme #R312逆转录效率优于相关逆转录产品。

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)是HiScript® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)的升级版本,包含新一代逆转录酶HiScript® III Reverse Transcriptase和针对逆转录优化的合适Buffer,进一步提高了一链合成的效率。该试剂盒中的5 × gDNAwiper Mix可在42℃,2 min条件下快速去除基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠,并可简化qPCR引物设计,无需跨内含子设计引物。试剂盒中包含单组分逆转录引物Oligo (dT)20VN和Random hexamers,用户可根据需要,灵活选择逆转录引物进行后续实验。本试剂盒既可合成用于克隆等下游实验的全长cDNA (可达20 kb),亦可合成高度均一的用于qPCR定量的cDNA。

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

– 30℃~- 15℃保存。

金畔生物试剂,Hiscript III Reverse Transcriptase

HiScript® III Reverse Transcriptase

更高效的第三代逆转录酶

Hiscript III Reverse Transcriptase

广泛的模板兼容性:可兼容动物、植物、病毒等多种模板

杂质耐受度:对于常见杂质(乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸)均具有较强的耐受度

逆转录效率:逆转录效率高于二代产品

Hiscript III Reverse Transcriptase

以1μg HeLa细胞RNA为模板,按照R302说明书推荐体系进行逆转录,以1μl cDNA为模板,用2 × Vazyme Lamp® Master Mix (Dye Plus)(Vazyme #P312)进行长片段扩增,将得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如图所示:扩增条带单一且产量高。

Hiscript III Reverse Transcriptase

长片段扩增电泳图

注:M:DL15000 Marker(Vazyme #MD103)

Hiscript III Reverse Transcriptase

HiScript® III Reverse Transcriptase是HiScript® II Reverse Transcriptase的升级版本,37℃条件下即可进行高效率的逆转录反应。HiScript® III Reverse Transcriptase依旧保留二代产品HiScript® II Reverse Transcriptase的热稳定性,对于复杂二级结构的RNA,可将逆转录温度提高至50~55℃,避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制,可有效合成高质量的cDNA。除此之外,本产品仍具有优异的持续合成能力和强的杂质耐受度。

Hiscript III Reverse Transcriptase

Hiscript III Reverse Transcriptase

Hiscript III Reverse Transcriptase

– 30℃~- 15℃保存。

金畔生物试剂,Murine RNase inhibitor

Murine RNase inhibitor

更高抗氧化活性的RNase 抑制剂

Murine RNase inhibitor

增强的抗氧化能力不会形成人源蛋白在氧化条件下会产生的二硫键

高纯度大肠杆菌可溶性表达,无RNase 残留,与RT-PCR/qPCR 系统兼容

Murine RNase inhibitor

Murine RNase inhibitor 是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种RNase (RNase A,B,C)。Murine RNase inhibitor 经过RT-PCR、RT-qPCR 检验,能与各类商业化逆转录酶及各种DNA Polymerase 兼容。与人源RNase inhibitor 相比,鼠源RNase inhibitor 不含两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性,且更加适合于对高DTT 敏感的实验( 如qPCR)。

Murine RNase inhibitor

组分

R301-01 2,000 U

R301-02 10,000 U

R301-03 20,000 U

Murine RNase Inhibitor (40 U/μl)

50 μl

250 μl

500 μl

Murine RNase inhibitor

-20℃保存。

金畔生物试剂,HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper) 

高效cDNA 一链合成试剂盒(去基因组)

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase,较强的温度耐受能力确保在高温条件下能打开RNA 复杂二级结构,得到更长的cDNA

宽广的模板起始量范围,从10 pg-5 μg 总RNA,可扩增片段长达15 kb 以上

Anchored Oligo(dT) 23 VN 设计结合位点锚定,特异性高,保证第一链cDNA 合成效率和成功率

针对不同下游应用选择不同的引物,合成的一链cDNA 广泛应用于分子克隆、杂交、PCR 扩增及qPCR 反应等

gDNA wiper Mix 可迅速彻底去除基因组污染

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

分别投入500ng、50ng、5ng HeLa gDNA 使用Vazyme #R212和Supplier T 中基因组去除模块做清除效率检测,结果显示,相对于竞品,Vazyme #R212 中的4 × gDNA wiper 可清除高达500 ng 的基因组残留,并且清除效率达到99% 以上。

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

本产品是使用HiScript® II Reverse Transcriptase 从Total RNA或Poly (A) + mRNA 合成一链cDNA 的试剂盒,含有一链cDNA合成所需的全部试剂,HiScript® II Reverse Transcriptase 具有更高的cDNA 合成效率及模板的杂质耐受度,更加适合具有复杂二级结构或低丰度的RNA 模板的逆转录。Anchored Oligo(dT) 23 VN设计结合位点锚定,特异性高,保证第一链cDNA 合成效率和成功率。产品中的4 × gDNA wiper 可在逆转录步骤前快速彻底去除基因组污染,提高实验结果的可信度。

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

-30 ~ -15℃保存。

10 × RT Mix中含有高浓度DTT,低温下可能有沉淀析出。使用前请还原至室温并轻摇混匀,待沉淀重新溶解后使用。

金畔生物试剂,HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 

高效cDNA 一链合成试剂盒

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase,较强的温度耐受能力确保在高温条件下能打开RNA 复杂二级结构,得到更长的cDNA

宽广的模板起始量范围,从1 pg-5 μg 总RNA,并且可扩增片段长达15 kb 以上

Anchored Oligo(dT) 23 VN 设计结合位点锚定,特异性高,保证第一链cDNA 合成效率和成功率

针对不同下游应用选择不同的引物,合成的一链cDNA 广泛应用于分子克隆、杂交、PCR 扩增及qPCR 反应等

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

图1.R211可完整逆转录长达20 kb 的RNA 模板

以1 μg HeLa 细胞总RNA 或小鼠骨骼肌细胞总RNA (for Nebulin) 为模板,Oligo(dT) 23 VN为引物进行逆转录。

取1 μl cDNA 为模板,用Vazyme LAmp® DNA Polymerase 扩增。

M: DL 15000 Marker。

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

图2. R211 对qPCR 具有宽广且灵敏的线性逆转录范围

以1 μg-1 pg HeLa 细胞总RNA 为模板做逆转录,使用Random hexamers 和Oligo(dT) 23 VN 共同逆转录,取1 μl cDNA 为模板,分别用AceQ® qPCR SYBR Green Master Mix 扩增ACTB 基因和CBR3 基因。

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

本产品是基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase 从总RNA 或Poly (A) + mRNA 合成一链cDNA 的试剂盒。含有一链cDNA 合成所需的全部试剂,其中HiScript® II Reverse Transcriptase 具有更高的cDNA 合成效率及模板的杂质耐受度,更加适合具有复杂二级结构或低丰度的RNA 模板的逆转录。Anchored Oligo (dT) 23 VN 设计结合位点锚定,特异性高,保证第一链cDNA 合成效率和成功率。合成的一链cDNA 可广泛应用于二链cDNA 合成、杂交、PCR 法扩增等。特别适用于全长cDNA文库制作、高纯度全长cDNA 合成等。

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

-20℃保存。

金畔生物试剂,HiScript II Reverse Transcriptase

HiScript® II Reverse Transcriptase

具有强耐热性和延伸效率的新一代逆转录酶

HiScript II Reverse Transcriptase

50℃半衰期超过240 min,55℃半衰期可达60 min

5 min 即可合成长达10 kb 的cDNA,适合快速逆转录反应

更高的杂质耐受度、更高的检测灵敏度

HiScript II Reverse Transcriptase

1.高的热稳定性

HiScript II Reverse Transcriptase

2.更强的杂质耐受度

以1 μg HeLa 细胞总RNA 为模板,用不同的酶进行逆转录,同时在体系中加入不同浓度的各种反应抑制物。取1 μl cDNA 为模板,AceQ® qPCR SYBR Green Master Mix 扩增human B2M基因,比较各种条件下CT 值大小。更小的CT 值代表更高的逆转录效率,即更高的杂质耐受度。

HiScript II Reverse Transcriptase

3.更高的检测灵敏度

以1 μg-1 pg HeLa 细胞总RNA 为模板,用HiScript® II Reverse Transcriptase (R201) 做逆转录,取1 μl cDNA为模板,用AceQ® qPCR SYBR Green Master Mix分别扩增B2M基因(A)和EGFR 基因(B)。

HiScript II Reverse Transcriptase

HiScript II Reverse Transcriptase

通过体外分子进化技术,在HiScript® Reverse Transcriptase的基础上,获得的一个新的逆转录酶突变体HiScript® II ReverseTranscriptase,其热稳定性大幅提高。HiScript® II ReverseTranscriptase 在50℃的半衰期超过240 min,并可在55℃长时间反应而保持稳定,提高了具有复杂二级结构模板的逆转录成功率,可获得长至20 kb 的cDNA。同时,高温下保持的高活性能够带来更高的cDNA 产量。

HiScript II Reverse Transcriptase

HiScript II Reverse Transcriptase

HiScript II Reverse Transcriptase

-30 ~ -15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript® 1st Strand cDNA Synthesis Kit

cDNA 一链合成试剂盒

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript® Reverse Transcriptase 提供可靠的逆转录表现

宽泛的模板量范围,可成功逆转录从10 pg-5 μg 总RNA

高效的合成能力:可合成长达10 kb 的cDNA

针对不同下游应用可选择不同引物,合成的一链cDNA 可广泛应用于分子克隆、杂交、PCR 扩增及qPCR 反应等。

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

以HeLa 细胞总RNA 为模板,使用Vazyme #R111 分别和其他公司的逆转录试剂Supplier T,Supplier G 在各自说明书所提供的反应体系及反应条件下逆转1 pg-1 ug 总RNA,用qPCR 检测基因ACTB。结果显示,与同类产品相比,Vazyme #R111 呈现良好的线性关系,并且检测灵敏度低至1 pg。

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

本产品是使用HiScript® Reverse Transcriptase 从Total RNA 或Poly (A)+ mRNA 合成1st Strand cDNA 的试剂盒。HiScript® Reverse Transcriptase 是在M-MLV (Moloney Murine Leukemiavirus) 基础上经过多点突变得到的新型逆转录酶。该酶能够有效合成长达10 kb 的cDNA,适用于常规RNA、富含GC 区域或具有复杂二级结构RNA 模板的逆转录。本产品基于HiScript® Reverse Transcriptase,包含合成高质量第一链cDNA 所需的所有成分,适合于后续的PCR、qPCR 实验。

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

-20℃保存。
 

金畔生物试剂,HiScript Reverse Transcriptase

HiScript® Reverse Transcriptase

热稳定的逆转录酶

HiScript Reverse Transcriptase

耐受50℃的反应温度,适用于具有二级结构的RNA 模板

模板的亲和力强,可获得更多全长的cDNA

高度灵敏,可检测到低至10 pg 的总RNA

HiScript Reverse Transcriptase

高的灵敏度

HiScript Reverse Transcriptase

使用不同逆转录酶在50℃反应30 min,将100 ng 至1 pg 小鼠肝脏总RNA 逆转录为cDNA。取1/10 cDNA 为模板,用AceTaq® DNA Polymerase 扩增β-Actin 基因。HiScript® 具有高的cDNA 产量和高的检测灵敏度。

HiScript Reverse Transcriptase

HiScript® Reverse Transcriptase 是在M-MLV (RNase H-)Reverse Transcriptase 基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶。HiScript® Reverse Transcriptase 在50℃下活性高,可用于具有二级结构的RNA 模板的逆转录。增强与模板的亲和力,可获得更多全长的cDNA,并可检测到低至1 pg 的总RNA,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。

HiScript Reverse Transcriptase

HiScript Reverse Transcriptase

HiScript Reverse Transcriptase

-20℃保存。

金畔生物试剂,M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

稳定可靠的逆转录酶

M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

点突变消除RNase H活性以获得长的cDNA产物

对于100 ng以上的RNA模板具有稳定可靠的逆转录表现

合成片段≤5 kb

可用于5’-RACE反应以及cDNA文库构建等实验

M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

野生型M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus) 具有以下几种活性:依赖于RNA 的DNA 聚合酶活性,依赖于DNA 的DNA 聚合酶活性和RNase H 活性。由于RNase H 活性能够催化降解RNA/DNA 杂合体中的RNA,因此在cDNA 第一条链的合成反应中可能会降解模板RNA。M-MLV (H-) Reverse Transcriptase 是通过定点突变得到的RNase H 活性缺失的M-MLV 突变体。与常见的通过删除(deletion) RNase H 结构域方法得到的突变体相比,本产品保留了完整的蛋白结构,因此具有与野生型相同的聚合酶活性,可用于较长的cDNA 合成以及全长cDNA 文库的构建等。

M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

-30 ~ -15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

HiScript® III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

简便、快捷、高效

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

简便快捷的操作:基因组清除与逆转录一步完成

较高的cDNA 稳定性:热敏型DNase,失活更彻底,cDNA长久保存更稳定

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

简便快捷的操作

基因组清除与逆转录一步完成,只需加入RNA 模板,15min 即可完成反应。

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

优异的逆转录效率

分别以Hela 细胞、小鼠肝脏、拟南芥叶片10 ng / 1 μg RNA 为模板,使用HiScript® III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR (Vazyme # R333) 与市面常见All-in-one 产品(Supplier TG-H、TG-E、TI)、非All-in-one 产品(Supplier Vazyme #R323、TA)同时进行逆转录。将得到的 cDNA 进行qPCR定量分析。

 

从图中可以看出,在不同模板上,Vazyme #R333 的扩增CT 值较小,说明Vazyme #R333 的逆转录效率更优异。

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

较高的cDNA稳定性

使用HiScript® III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR (Vazyme #R333) 逆转100 ng HeLa 细胞RNA,将得到的cDNA 于37℃放置7 天、4℃放置4 周、冻融30 次进行测试,同时以-20℃存放cDNA 作为对照。将不同处理后的 cDNA 进行qPCR 定量分析。

 

从图中可以看出, cDNA 在各种条件下定量得到的△ CT 均在0.5 范围内(△CT 于±0.5 以内,认为两者差异可忽略不计),说明Vazyme #R333 逆转得到的
cDNA 可于37℃存放7 天、4℃存放4 周、反复冻融30 次,cDNA 依然具有良好的稳定性。

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

HiScript® III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR是HiScript® III RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)的升级版本,只需一步操作,即可同时完成基因组清除与逆转录反应,操作简便、快捷,并可有效降低复杂加样过程造成的样品污染与RNA降解的风险。本产品包含HiScript® III Reverse Transcriptase、热敏型DNase以及针对基因组清除与逆转录一步反应优化的合适Buffer,延续了第三代逆转录产品高效率的特点;其中热敏型DNase生效快、效率高、易失活,cDNA可长久稳定保存。逆转录产物兼容染料法和探针法qPCR,可进行高性能的基因表达分析。

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

储存温度:-30 ~ -15℃,≤0℃运输。

 

金畔生物试剂,HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

更高效的两步法RT-qPCR预混液(去基因组)

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

简便快捷的操作:5 × HiScript® III qRT SuperMix包含逆转录反应所需的所有组分,只需加入模板 RNA,20 min内即可完成逆转录反应

广泛的模板兼容性:可兼容不同物种,完整度较差的 RNA 模板

较强的杂质耐受度:对于逆转录常见杂质如乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸等,具有较强的耐受度

优异的逆转录效率:与常见逆转录产品相比,HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) 逆转得到的cDNA定量CT值小,具有优异的逆转录效率

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

1.简便快捷的操作

HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)(Vazyme #R323)包含基因组清除模块,可彻底去除 RNA 模板中残留的基因组 DNA;同时Vazyme #R323 包含逆转录反应所需的所有组分,只需加入模板 RNA,20 min 内即可完成逆转录反应,操作简便快捷。

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

2.广泛的模板兼容性

分别以 HeLa 细胞、小鼠肝脏、拟南芥叶片的完整 RNA 与降解 RNA 为模板,使用 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) (Vazyme#R323)以及常见逆转录试剂 (Supplier T) 进行逆转录。将得到的 cDNA 进行多个基因的 qPCR 定量分析,以不同基因为横坐标,扩增 CT 值为纵坐标绘图,比较不同产品的逆转录效率。从图中可以看出,以 HeLa 细胞、小鼠肝脏、拟南芥叶片完整 RNA 以及降解 RNA 为模板进行逆转录定量,Vazyme #R323的扩增CT 值小于或等于T公司相关产品,说明Vazyme #R323逆转不同物种RNA、完整度较差的RNA模板皆具有优异的逆转录效率。

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

3. 较强的杂质耐受度

在RNA的提取过程中常常因操作或样本的特殊性导致RNA中混有有机试剂或杂质,这些物质的残留会严重影响逆转录效率。乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸是 RNA 提取过程中较为常见的杂质,测试其对逆转录效率的影响。

分别对上述 5 种杂质设置 3 个不同浓度梯度,添加至 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) (Vazyme #R323) 逆转录体系中,将得到的 cDNA 进行 qPCR 检测。以不同浓度杂质为横坐标,△CT  (△CT = 含杂质逆转录 cDNA 扩增 CT 值 – 未含杂质逆转录 cDNA 扩增 CT 值 ) 为纵坐标绘图。从图中可以看出,△CT 均小于 0.15,说明 Vazyme #R323 对上述 5 种常见杂质具有较强的耐受度。

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

4. 优异的逆转录效率

以 100 ng HeLa RNA 为模板,使用 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) (Vazyme #R323) 以及其他逆转录产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应。将得到的 cDNA 进行多个基因的 qPCR 定量分析。以不同公司产品为横坐标,△CT (△CT = Vazyme #R323 cDNA 扩增 CT 值 – 各公司逆转录产品 cDNA 扩增 CT 值 ) 为纵坐标绘图。从图中可以看出,除一些体系Th1 △CT >0 外,其余公司逆转录产品均△CT <0,说明 Vazyme #R323 逆转录效率优于 Ta、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti 相关逆转录产品。

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)   

HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)为HiScript® II二代产品的升级产品,包含全新升级三代逆转录酶 HiScript® III Reverse Transcriptase与针对逆转录特殊优化的合适 Buffer,进一步提高了cDNA合成效率。本产品包含基因组清除模块,可彻底去除 RNA 模板中残留的基因组 DNA,确保后续定量结果更加真实可靠。与此同时,本产品将所有逆转录反应所需组分融于一管,只需加入模板 RNA,20 min 内即可完成逆转录反应,同时终止gDNA wiper作用,保证cDNA的完整性,并减少操作步骤,有效防止在操作过程中带来的污染。

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

– 30℃~- 15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

HiScript® II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

可灵活选择逆转录引物的两步法 RT-qPCR 选用预混液(去基因组)

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase

针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物

gDNA wiper Mix 可迅速去除基因组污染

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

本产品以高性价比的HiScript® II Reverse Transcriptase为基础,使用设计独特的Oligo(dT) 23  VN 引物,提高了反应特异性及灵敏度,获得质量更好的cDNA。针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物,满足多样化的实验需求,可根据逆转录后续实验需要选择Oligo (dT) 23  VN primer/Random Hexamers 或基因特异性引物(GSP)。同时对反应体系进行大幅简化,5 × qRT SuperMix 含有反转录反应除引物以外所需的全部试剂且在-20℃不会冻结,使用方便。试剂盒中的4 × gDNA wiper Mix 可彻底去除残留的基因组DNA 污染,保证后续定量结果更加可靠。逆转录得到的产物可用于SYBR Green qPCR分析法和探针分析法,进行高性能的基因表达分析。

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

-30 ~ -15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR

HiScript® II Q Select RT SuperMix for qPCR

可灵活选择逆转录引物的两步法RT-qPCR 选用预混液

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR

基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase,逆转录效率更高

针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物

即用型SuperMix 预混液使用方便省时

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR

本产品以高性价比的HiScript® II Reverse Transcriptase为基础,使用设计独特的Oligo(dT) 23  VN 引物,提高了反应特异性及灵敏度,获得质量更好的cDNA。针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物,满足多样化的实验需求,可根据逆转录后续实验需要选择Oligo (dT) 23  VN primer/Random Hexamers 或基因特异性引物(GSP)。同时对反应体系进行大幅简化,5 × qRT SuperMix 含有反转录反应除引物以外所需的全部试剂且在-20℃不会冻结,使用方便。

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR

HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR

-30 ~ -15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript® II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

预混液形式的两步法RT-qPCR 选用试剂(去基因组)

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase,逆转录效率更高

Anchored Oligo (dT) 23  VN 设计独特,确保反应特异性,提高第一链cDNA 合成效率和成功率

即用型的SuperMix 预混液使用方便省时

gDNA wiper Mix 可迅速去除基因组污染

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

 

以HeLa 细胞RNA 为模板,使用Vazyme #R223 和Supplier Ta、Supplier Tg 同类产品,在各自说明书所提供的反应体系及反应条件下进行逆转录,然后用qPCR 检测基因ACTB 和CBR3。结果表明与同类产品相比,Vazyme #R223 在扩增效率和扩增线性上表现都较优异。

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

本产品是以高性价比的HiScript® II Reverse Transcriptase 为基础的两步法qPCR 试剂盒。试剂盒中的4 × gDNA wiper Mix 可彻底去除残留的基因组DNA 污染,保证后续定量结果更加可靠。5 × HiScript®II qRT SuperMix II 中含有逆转录反应所需的所有组分,加入模板RNA 和水即可迅速进行反应,同时终止gDNA wiper 作用,保证cDNA 的完整性。本产品针对qPCR 进行特别优化,逆转录产物兼容SYBR Green 和探针法qPCR,可以根据实验目的,选择相应的试剂配合使用,进行高性能的基因表达分析。

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

-20℃保存

金畔生物试剂,HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

HiScript® II Q RT SuperMix for qPCR 

预混液形式的两步法RT-qPCR 选用试剂

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase,逆转录效率更高

Anchored Oligo (dT)23 VN 设计独特,确保反应特异性,提高第一链cDNA 合成效率和成功率

即用型的SuperMix 预混液使用方便省时

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

以HeLa 细胞总RNA 为模板,使用Vazyme #R222 和SupplierT 同类产品,在各自说明书所提供的反应体系及反应条件下逆转1 pg-1 ug 总RNA,然后用qPCR 检测基因ACTB 和B2M。结果表明与同类产品相比,Vazyme #R222 在扩增效率和扩增线性上表现都较优异。

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

本产品是以高性价比的HiScript® II Reverse Transcriptase 为基础的两步法qPCR 试剂盒。比例优化的Random primers/Oligo(dT)23  VN primer mix,使cDNA 合成可从RNA 转录本的各个区域起始并具有相同的逆转录效率,较大程度保证了qPCR 结果的真实性和可重复性。本试剂盒为即用型的SuperMix,将合成高质量第一链cDNA 所需的所有成分合并为一管5 × SuperMix,同时对反应体系进行大幅简化,只需加入RNA 和水即可进行逆转录反应,且SuperMix 在-20℃不会冻结,使用方便。

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

HiScript II Q RT SuperMix for qPCR

-30 ~ -15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

 HiScript® Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

预混液形式的两步法RT-qPCR 试剂(去基因组)

HiScript  Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

即用型的SuperMix 预混液使用方便省时

gDNA wiper Mix 可迅速去除基因组污染

HiScript  Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript® 两步法RT-qPCR 系列试剂盒(含gDNA 去除模块)以高性价比的HiScript® Reverse Transcriptase 为基础,对反应体系进行大幅简化,即用型的SuperMix 将合成高质量第一链cDNA 所需的所有成分合并为一管5 × SuperMix,只需加入RNA和水即可进行逆转录反应,且SuperMix 在-20℃不会冻结,使用方便。产品中包含的4 × gDNA wiper 可在逆转录前快速去除体系中潜在的基因组干扰。本产品操作简便,降低操作过程中的污染机率。合成的cDNA 可以用于SYBR Green qPCR 分析法和探针分析法,进行高性能的基因表达分析。

HiScript  Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript  Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

HiScript  Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

-30 ~ -15℃保存。

金畔生物试剂,HiScript Q RT SuperMix for qPCR

HiScript® Q RT SuperMix for qPCR

预混液形式的两步法RT-qPCR 试剂

HiScript Q RT SuperMix for qPCR

 即用型的SuperMix 预混液使用方便省时

HiScript Q RT SuperMix for qPCR

HiScript® 两步法RT-qPCR 试剂盒以高性价比的HiScript® Reverse Transcriptase 为基础,对反应体系进行大幅简化,即用型的SuperMix 将合成高质量第一链cDNA 所需的所有成分合并为一管5 × SuperMix,只需加入RNA 和水即可进行逆转录反应,RNA 体积最多可加至反应总体积的80%,非常适合于低浓度RNA 模板的逆转录反应,且SuperMix 在-20℃不会冻结,使用方便。

HiScript Q RT SuperMix for qPCR

HiScript Q RT SuperMix for qPCR

HiScript Q RT SuperMix for qPCR

-20℃保存。

金畔生物试剂,Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

用于单细胞或微量总RNA中转录组的扩增

Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

适用于1-1000个细胞

一步法RT-PCR预扩增

可扩增500个靶基因

扩增产物适合用任何实时荧光定量PCR仪分析

高灵敏度,低成本

Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

Single Cell Squence Specific Amplification Kit 是基于一步RT-PCR的扩增方法,实现单细胞或者微量总RNA中转录组的扩增,检测单个细胞之间不同基因的表达水平。本试剂盒实现了细胞裂解、RNA逆转录和PCR反应在同一管内完成,不需要额外的移管操作,具有节约时间、减少实验误差、降低污染、提高灵敏度等优势。

Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

Single Cell Sequence Specific Amplification Kit

-30 ~ -15℃保存。-20 ~ 0℃运输。

金畔生物试剂,miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA加尾法逆转录试剂盒

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

简便快捷的操作

优异的逆转录性能

较高的逆转录特异性

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)是适用于microRNA (miRNA)加尾法合成cDNA的专用试剂盒,只需一步操作,即可完成加尾反应和逆转录反应。本产品以miRNA或总RNA为模板,在Poly A polymerase (PAP)的作用下,在其3'末端加Poly (A),随后使用通用逆转录引物进行逆转录反应。本产品中,HiScript miRNA Enzyme Mix包含专为miRNA逆转录定向改造的逆转录酶和PAP,配以优化的缓冲体系,在具有高灵敏度的同时,较大限度降低miRNA前体的逆转录,保证后续结果稳定可靠。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

1. 简便快捷的操作

一步操作完成加尾反应和逆转录反应

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

2. 优异的逆转录性能

以HeLa miRNA为模板(100 ng/μl),使用 Vazyme #MR201 以及品牌相关产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应,将得到的cDNA分别在六种引物体系(T1/2/5/12/15/20)中进行qPCR定量分析。从图中可以看出,除两个体系中存在部分ΔCT<-0.5,其余均ΔCT>0.5或-0.5<ΔCT<0.5,说明Vazyme #MR201的逆转录效率优于同类产品。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

注:ΔCT = CT(竞品)– CT(Vazyme)

 

3. 较高的逆转录特异性

以HeLa miRNA为模板(100 ng/μl),分别使用专为miRNA逆转录定向改造的逆转录酶(Vazyme #MR201)和未定向改造的逆转录酶(其余组分与Vazyme #MR201一致)进行逆转录反应,在相同条件下对逆转录反应得到的cDNA进行qPCR检测2个体系。可以看到,使用Vazyme #MR201逆转录miRNA后qPCR检测得到的溶解曲线单峰且峰形优异,特异性更高。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

金畔生物试剂,miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

microRNA 逆转录产品(茎环法)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

优异的线性关系:在宽广的模板区间内具有良好的线性关系,可检出低至pg 级RNA 模板

优越的反应体系:适合的Buffer 组分及浓度,更适用于microRNA 的逆转录

简便的引物设计:提供配套的引物设计软件,使得引物设计更加简便

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

以小鼠肝脏组织Total RNA 的10 倍稀释梯度(10 pg-1 μg) 为模板,使用miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) (Vazyme #MR101) 进行逆转录,得到的cDNA 使用miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix (Vazyme #MQ101)扩增mmu-miR-16 基因。结果显示,在宽广的模板区间内,该配套产品具有优异的线性关系。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) 是适用于茎环法miRNA cDNA 一链合成的专用试剂盒,含基因组DNA 去除步骤,可以在42℃ 2 min 条件下快速去除基因组DNA 的污染,保证后续结果更加可靠。试剂盒基于的HiScript® II Reverse Transcriptase 具有较高的热稳定性,配以针对优化的缓冲体系,均有利于miRNA 特异性逆转录产物的生成。cDNA 产物后续定量,推荐使用本公司的miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix (Vazyme # MQ101),以获得优异的实验结果。同时,配套推出miRNA逆转录茎环引物和定量引物的设计软件,操作简单,为miRNA 实验保驾护航。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

-20℃保存。

金畔生物试剂,HiScript-TS 5'/3' RACE Kit

HiScript-TS 5'/3' RACE Kit

HiScript-TS 5&#039;/3&#039; RACE Kit

优异的逆转录性能

高效的 cDNA 扩增性能

实验便捷:配套的RACE 引物设计软件和测序比对软件

HiScript-TS 5&#039;/3&#039; RACE Kit

HiScript-TS 5’/3’ RACE Kit 以 RNA 为模板高效逆转全长 cDNA,并以 cDNA 为模板快速扩增其 5’末端或 3’末端。试剂盒提供定向改造的具有 Template-Switching 活性的逆转录酶和高保真 PCR 扩增 Mix,无需进行接头连接。其中逆转录模块可逆转长度高达 15 kb 的转录本,识别丰度低至 0.9 RPKM(Reads Per Kilobase Per Million Reads) 的转录本;PCR 模块可兼容 GC 含量范围为 36-70% 的转录本。优异的逆转录性能与 cDNA 扩增性能提高了 RACE 成功率。产品 Mix 形式简化了加样流程,使操作更为简便快捷。同时配套RACE 引物设计软件和测序比对软件,使 RACE 实验变得不再复杂。

HiScript-TS 5&#039;/3&#039; RACE Kit

HiScript-TS 5&#039;/3&#039; RACE Kit

HiScript-TS 5&#039;/3&#039; RACE Kit

Box 1, -80 ~ -65°C保存,干冰运输;

Box 2, -30 ~ -15°C保存,干冰运输。

 

 

 

 

金畔生物试剂,Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

高产量、平台通用的qPCR专用预混液

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

较高的扩增平台值:扩增产量大幅度提升,拥有较高扩增平台值

灵敏度与特异性:采用的Taq Pro DNA Polymerase是经过升级改造的、基于抗体法修饰的新一代热启动聚合酶,配以针对 qPCR 优化的合适Buffer以及特异性促进因子,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生

广泛的平台适用性:特殊的ROX参比染料,适用于所有qPCR仪,无需在不同的仪器上调整ROX浓度

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

较高的扩增平台值

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

图1

 

以 Hela cDNA 为模板,使用 Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme #Q712) 预混液以及其他品牌染料法qPCR 试剂,在同样反应条件下扩增 6 个不同的基因。结果显示,在不同扩增体系上,与同类产品相比,Vazyme #Q712 预混液灵敏度高,扩增产物产量高,拥有较高的平台值。

 

灵敏度与特异性平衡

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

图2

 

图 A 是将 pUC19 质粒进行 8 个 10 倍梯度稀释,图 B 是根据图 A 的 CT 值得出的标准曲线。第 8 个梯度中质粒拷贝数浓度约为 6 copies/4 μl,使用 Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme #Q712) 预混液对各稀释梯度中的 pUC19 进行检测,每孔模板使用量为4 μl。结果显示,Vazyme #Q712 预混液在宽广的模板量区间内具有优异的线性关系,可以检测出个位数拷贝的待测模板,灵敏度较高。

 

图 C 是以HeLa 细胞cDNA为模板,使用Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme #Q712) 预混液以及其他品牌染料法 qPCR 试剂,在相同条件下测试24个体系,检测扩增特异性。统计结果显示:Vazyme #Q712预混液能够检测超过92%(22/24) 的目标基因。

 

平台通用

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

图3

 

使用 Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme #Q712) 在不同类型的 qPCR 仪(机 型:ABI Stepone、ABI QuantStudio 3、Roche LightCycler 480)上扩增基因,定量结果优异。说明Vazyme #Q712预混液仪器适用性广,无需针对不同仪器调整ROX浓度。

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix为SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行 qPCR 反应的专用预混液。本产品采用的Taq Pro DNA Polymerase是经过升级改造的、基于抗体法修饰的新一代热启动聚合酶,具有特异性强、检测灵敏度高、扩增产量高等诸多优点。配以针对qPCR优化的合适Buffer以及特异性促进因子,较大地提高了qPCR扩增产量,拥有较高平台值,适用于进行高特异性、高灵敏度的qPCR扩增。Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix含有特殊的ROX Reference Dye,适用于所有qPCR仪器,无需在不同的qPCR仪器上调整 ROX 的浓度。

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix

-30 ~ -15℃避光保存,Master Mix解冻后可于2 ~ 8℃避光条件下稳定存放6个月;≤ 0℃运输。

-20℃存放18个月;37℃存放9天;25℃存放一个月;可冻融30次。

金畔生物试剂,AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

AceQ® Universal SYBR qPCR Master Mix

通用型高特异性染料法定量PCR 检测试剂盒

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

平台通用:特殊的ROX参比染料,适用于所有qPCR仪,无需在不同的仪器上调整ROX浓度

严谨的热启动酶:基于化学法热启动的AceTaq® DNA Polymerase提供优异的扩增特异性

优化的反应体:缓冲液配方,较大程度抑制非特异扩增和引物二聚体,无需反复优化条件

优异的扩增性能:重复可靠的定量结果,满足高水平杂志的数据要求

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

图1.广阔的定量阈

以HeLa 细胞cDNA 为稀释液,将pUC19 质粒进行7 个10 倍梯度稀释,第7 个稀释梯度中质粒拷贝数浓度约为7 copies/4 μl。使用AceQ® Universal 预混液对各稀释梯度中的pUC19 质粒进行检测,每孔模板使用量为4 μl。可以看到,AceQ® Universal预混液在宽广的模板量区间内具有优异的线性关系,可轻松检测出个位数拷贝的待测模板。

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

图2.优异的特异性

对随机选取的38 个体系进行qPCR 检测,验证AceQ® Universal预混液扩增特异性。通过对融解曲线分析可知,38 个体系均无非特异性扩增。说明AceQ® Universal 预混液拥有优异的特异性。

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

图3.平台通用

使用AceQ® Universal 预混液在不同类型的qPCR 仪(机型:StepOnePlus、QuantStudio 3、LightCycler 96)上扩增GAPDH 基因,定量结果优异。说明AceQ® Universal 预混液仪器适用性广,无需针对不同仪器调整ROX 浓度。

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

本产品是使用SYBR Green I 嵌合荧光法进行qPCR的专用试剂,采用化学法修饰的热启动DNA聚合酶AceTaq® DNA Polymerase,配合针对qPCR优化的合适Buffer,可以有效抑制非特异扩增,从而显著提高扩增效率,适用于进行高灵敏度的qPCR反应。本产品是一种含有qPCR反应合适浓度SYBR Green I2 × 预混试剂,可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。另外,产品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye,适应于所有qPCR仪器,无需在不同仪器上调整ROX的浓度,只需在配制反应体系时加入引物和模板即可进行扩增。

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix

-20℃避光保存。

4℃存放5天;可冻融30次;配置好的混合体系(引物、模板、试剂)可于4℃存放6h。

金畔生物试剂,ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix(High ROX Premixed)

模板示踪型染料法定量PCR检测试剂盒

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

减少移液错误:通过提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,减少移液错误。

扩增高度特异:新型抗体法热启动酶Champagne Taq  DNA Polymerase,配以优化的Buffer和特异性促进因子Exactor,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。

扩增性能优异:可以检测到个位数拷贝的基因表达,对目标基因定位准确、可信。

兼容程度:提供ROX预混版本,适用于所有主流定量PCR仪

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

图1.广阔的定量域 

 

图A 是将pUC19 质粒进行8 个10 倍梯度稀释,图B 是根据图A 的CT 值绘制的标准曲线。第8 个梯度稀释中质粒拷贝数浓度约为5 copies/4 μl,使用ChamQ Color 预混液对各稀释梯度中的pUC19 质粒进行检测,每孔模板使用量为4 μl。可以看到,ChamQ Color 预混液在宽广的模板量区间具有优异的线性关系,可以检测出具有个位数拷贝的待测模板,灵敏度较高。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

图2.优异的特异性 

 

以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Color 预混液以及其他品牌染料法试剂在同样的反应条件下测试48 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示。ChamQ Color 预混液在默认条件下能够完成超过95%(46/48)的目标基因检测,特异性较高。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

图3.稳健的重复性 

 

以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Color 预混液以及其他品牌染料法试剂在同样的反应条件下测试48 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示。ChamQ Color 预混液在默认条件下能够完成超过95%(46/48)的目标基因检测,特异性较高。以HeLa 细胞cDNA 为模板,用ChamQ Color 预混液检测B2M 基因的表达,设置48 孔重复,用以检测扩增稳定性。可以看到,ChamQ Color 预混液实验结果重复性较高。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

图4.准确的分辨力 

 

以HeLa 细胞cDNA 原液以及10 个2 倍稀释梯度共计11 个样品为模板,使用ChamQ Color 预混液检测P450C17 基因的表达,每个模板设置6 个复孔。可以看到,ChamQ Color 预混液可以在宽广的范围内,准确分辨2 倍的模板浓度差异,且扩增高度特异。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

该产品通过扩增模板加入后的变色反应,实现了加样过程的可视化,提高了加样效率。其采用的Champagne Taq DNA Polymerase是一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶,具有兼容性广、扩增性能强、灵敏度高等诸多优点,配以针对Realtime-PCR优化的合适Buffer以及特异性促进因子Exactor,平衡了扩增特异性和扩增效率之间的矛盾。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (High ROX Premixed)

2 x ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix(High ROX Premixed):长期储存应置于-20C避光;如短期内反复使用,解冻后可于4℃避光条件下稳定存放6个月;

10 x Dilution Buffer:于-20℃保存。

4℃存放6个月;可冻融30次;Dilution Buffer稀释的cDNA可于-20℃存放7天;配置好的混合体系(引物、模板、试剂)可于4℃存放6h。

金畔生物试剂,ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix(Low ROX Premixed)

模板示踪型染料法定量PCR 检测试剂盒

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

减少移液错误:通过提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,减少移液错误。

扩增高度特异:新型抗体法热启动酶Champagne Taq  DNA Polymerase,配以优化的Buffer和特异性促进因子Exactor,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。

扩增性能优异:可以检测到个位数拷贝的基因表达,对目标基因定位准确、可信。

兼容程度:提供ROX预混版本,适用于所有主流定量PCR仪

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

图1.广阔的定量域 

 

图A 是将pUC19 质粒进行8 个10 倍梯度稀释,图B 是根据图A 的CT 值绘制的标准曲线。第8 个梯度稀释中质粒拷贝数浓度约为5 copies/4 μl,使用ChamQ Color 预混液对各稀释梯度中的pUC19 质粒进行检测,每孔模板使用量为4 μl。可以看到,ChamQ Color 预混液在宽广的模板量区间具有优异的线性关系,可以检测出具有个位数拷贝的待测模板,灵敏度较高。

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

图2.优异的特异性 

 

以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Color 预混液以及其他品牌染料法试剂在同样的反应条件下测试48 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示。ChamQ Color 预混液在默认条件下能够完成超过95%(46/48)的目标基因检测,特异性较高。

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

图3.稳健的重复性 

 

以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Color 预混液以及其他品牌染料法试剂在同样的反应条件下测试48 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示。ChamQ Color 预混液在默认条件下能够完成超过95%(46/48)的目标基因检测,特异性较高。以HeLa 细胞cDNA 为模板,用ChamQ Color 预混液检测B2M 基因的表达,设置48 孔重复,用以检测扩增稳定性。可以看到,ChamQ Color 预混液实验结果重复性较高。

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

图4.准确的分辨力 

 

以HeLa 细胞cDNA 原液以及10 个2 倍稀释梯度共计11 个样品为模板,使用ChamQ Color 预混液检测P450C17 基因的表达,每个模板设置6 个复孔。可以看到,ChamQ Color 预混液可以在宽广的范围内,准确分辨2 倍的模板浓度差异,且扩增高度特异。

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

该产品通过扩增模板加入后的变色反应,实现了加样过程的可视化,提高了加样效率。其采用的Champagne Taq DNA Polymerase是一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶,具有兼容性广、扩增性能强、灵敏度高等诸多优点,配以针对Realtime-PCR优化的合适Buffer以及特异性促进因子Exactor,平衡了扩增特异性和扩增效率之间的矛盾。

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

ChamQ  SYBR  Color  qPCR Master Mix (Low ROX Premixed)

2 x ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix(Low ROX Premixed):长期储存应置于-20C避光;如短期内反复使用,解冻后可于4℃避光条件下稳定存放6个月;

10 x Dilution Buffer:于-20℃保存。

4℃存放6个月;可冻融30次;Dilution Buffer稀释的cDNA可于-20℃存放7天;配置好的混合体系(引物、模板、试剂)可于4℃存放6h。

金畔生物试剂,ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix( Without ROX )

模板示踪型染料法定量PCR检测试剂盒

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

减少移液错误:通过提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,减少移液错误。

扩增高度特异:新型抗体法热启动酶Champagne Taq  DNA Polymerase,配以优化的Buffer和特异性促进因子Exactor,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。

扩增性能优异:可以检测到个位数拷贝的基因表达,对目标基因定位准确、可信。

兼容程度:提供ROX预混版本,适用于所有主流定量PCR仪

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

图1.广阔的定量域 

 

图A 是将pUC19 质粒进行8 个10 倍梯度稀释,图B 是根据图A 的CT 值绘制的标准曲线。第8 个梯度稀释中质粒拷贝数浓度约为5 copies/4 μl,使用ChamQ Color 预混液对各稀释梯度中的pUC19 质粒进行检测,每孔模板使用量为4 μl。可以看到,ChamQ Color 预混液在宽广的模板量区间具有优异的线性关系,可以检测出具有个位数拷贝的待测模板,灵敏度较高。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

图2.优异的特异性 

 

以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Color 预混液以及其他品牌染料法试剂在同样的反应条件下测试48 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示。ChamQ Color 预混液在默认条件下能够完成超过95%(46/48)的目标基因检测,特异性较高。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

图3.稳健的重复性 

 

以HeLa 细胞cDNA 为模板,使用ChamQ Color 预混液以及其他品牌染料法试剂在同样的反应条件下测试48 个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示。ChamQ Color 预混液在默认条件下能够完成超过95%(46/48)的目标基因检测,特异性较高。以HeLa 细胞cDNA 为模板,用ChamQ Color 预混液检测B2M 基因的表达,设置48 孔重复,用以检测扩增稳定性。可以看到,ChamQ Color 预混液实验结果重复性较高。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

图4.准确的分辨力 

 

以HeLa 细胞cDNA 原液以及10 个2 倍稀释梯度共计11 个样品为模板,使用ChamQ Color 预混液检测P450C17 基因的表达,每个模板设置6 个复孔。可以看到,ChamQ Color 预混液可以在宽广的范围内,准确分辨2 倍的模板浓度差异,且扩增高度特异。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

该产品通过扩增模板加入后的变色反应,实现了加样过程的可视化,提高了加样效率。其采用的Champagne Taq DNA Polymerase是一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶,具有兼容性广、扩增性能强、灵敏度高等诸多优点,配以针对Realtime-PCR优化的合适Buffer以及特异性促进因子Exactor,平衡了扩增特异性和扩增效率之间的矛盾。

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix (Without ROX)

2 x ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix:长期储存应置于-20C避光;如短期内反复使用,解冻后可于4℃避光条件下稳定存放6个月;

10 x Dilution Buffer:于-20℃保存。

4℃存放6个月;可冻融30次;Dilution Buffer稀释的cDNA可于-20℃存放7天;配置好的混合体系(引物、模板、试剂)可于4℃存放6h。