产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – cDNA 合成
ProtoScript® II 反转录酶
#M0368L 10,000 units
#M0368S 4,000 units
#M0368X 40,000 units
相关产品
RNase H
特性
不同起始量的 RNA 均能高效反转录
提高热稳定性
合成至少 10 kb 长度的 cDNA
合成至少 10 kb 长度的 cDNA
概述
ProtoScript II 反转录酶是一种重组的 M-MuLV 反转录酶，其 RNase H 酶活性降低且热稳定性增加。与野生型 M-MuLV 反转录酶相比， ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链 cDNA。 ProtoScript II 活性温度高达 50℃，且具有特异性高、产量高和 合成 cDNA更长的特点，合成 cDNA长度可达 12 kb。本产品曾用名为 M-MuLV 反转录酶（RNase H–）。
来源
来自重组 E. coli 菌株，携带有突变的 MMuLV反转录酶（RNase H–）编码基因，经高度纯化而获得。
反应条件
1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl（pH 8.3 @ 25℃），75 mM KCl，3mM MgCl2]，10 mM DTT，200 units M-MuLV （RNaseH–），添加 0.5 mM dNTPs（不随酶提供）和 5 μMdT23VN（不随酶提供），42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。热失活：65℃ 20 分钟。
质保声明
通过 RT-PCR 验证，以总 RNA 为模板可合成 9.2 kb 的 cDNA。
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系中，以poly（rA）为模板，以 oligo（dT）18 为引物，37℃条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶物所需要的酶量。
浓度
200,000 units/ml。