肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）说明书【产品名称】通用名称：肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）英文名称：API 20 E【包装规格】25 测试/盒、100 测试/盒。【预期用途】该产品用于肠杆菌和其它非苛养革兰氏阴性杆菌的鉴定。该产品用于可导致腹泻、血流感染、尿路感染等的肠杆菌和其它非苛养革兰氏阴性杆菌的鉴定，临床常见样本来源有粪便、直肠拭子、尿、血等。【检验原理】API 20 E 试条由 20 个含干燥底物的微量小管组成。将菌悬液接种到管内，使小管内底物溶解。孵育过程中，所产生的代谢产物通过自发反应或加入附加试剂后而变色。鉴定结果可根据说明书的判读表进行读出，也可参照生化谱检索手册或鉴定软件，得到鉴定结果【样本要求】API 20 E 不能直接用于临床或其他标本（例如血样，尿样和粪样、直肠拭子等等）。需要进行鉴定的微生物必须首先根据标准微生物处理技术于适合肠杆菌和/或非苛养革兰阴性杆菌生长的培养基上分离培养。【检验方法】氧化酶试验：必须按照制造商的使用说明进行氧化酶试验。由于它是最终图谱的组成部分，请将其结果记录于报告单上（第二十一个试验）。试条的准备• 准备一个培养盒（盘和盖子），倒入约 5mL 蒸馏水或软化水【或其它不含添加剂或不含有能产生挥发性气体（如 Cl2, CO2,等）的化学物质的水】于盘的蜂窝小凹中，造成一个湿室。• 在盘的长边写上菌株号(不要写在盖上，因为操作过程中很容易将盖子放到其它试条上）• 从包装中取出试条。• 将试条置于培养盒中。注意：API 20 E 只能用于肠道细菌和或非苛养的革兰阴性杆菌。苛养菌由于对营养有特殊要求并且需要合适的防护措施(例如布鲁氏菌属 Brucella 和法朗西丝菌属 Francisella)，这些菌没有包括在 API 20 E 数据库中。 必须采用其它方法，来排除或确认这些菌的存在试条的判读• 孵育后，根据判读表表判读各反应结果。• 如果 3 个或 3 个以上测定（GLU 试验+或-)为阳性结果，记录所有自发反应于结果报告单上并观察需要附加试剂的试验的结果：- TDA 试验：加 1 滴 TDA 试剂。深褐色为阳性反应，记录于报告单上。- IND 试验：加 1 滴 JAMES 试剂。整个反应管出现粉红色者为阳性，记录于报告单上。- VP 试验：加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 试剂。至少等待 10 分钟，出现粉红或红色者表明为阳性结果，记录于报告单上。如浅粉红色在 10 至 12 分钟内出现，判断结果为阴性。注意：吲哚产生试验必须最后进行，因为该反应释放的气体产物会千扰试条的其他试验。在加入附加试剂后，请小心勿调换培养盒盖。• 如果加入附加试剂前阳性结果（包括 GLU 试验）的数量少于 3 个：- 重新培养 24 小时（土 2 小时），且不要加任何试剂。- 重新进行需要加入附加试剂的试验（如前说明）。- 为了完成鉴定，可能需要进行补充试验（参考有关鉴定的段落）。解释鉴定结果根据数值编码获得。• 数值编码的确定：在结果报告单，每 3 个试验为一组，每个阳性试验分别赋予数值 1、2 或 4，在每组中，阳性反应以相应的数值相加，由此可得到一个 7 位数字的编码。氧化酶反应构成第 21 个试验，如阳性则赋予数值 4。• 鉴定：鉴定结果是根据数据库（V4.1)得到。*根据鉴定检索手册：- 从检索手册中查找数值编码。*根据 apiweb TMM鉴定软件：