乳酸杆菌鉴定试剂盒API50CHL说明书
原理API 50 CHL是用于乳酸杆菌(Lactpbacillus)和相关菌的鉴定，它是由49种可发酵碳水化合物的API 50 CH试验条组成的简易培养基。以测定菌制成悬液接种试验条的每一个小管。当培养时，由于发酵碳水化合物产酸，pH下降，使指示剂变色。结果构成菌株的生化图谱，并用于鉴定或分型。
试剂一套(10次测定)包括：– 10 个API 50 CHL培养基的安瓿– 1份说明书 附加产品(不包括在套装产品内)：– API 50 CH 试验条(ref. 50 300)– McFarland 标准(ref. 70 900)点2或光密度计： DENSIMAT(ref. 99 234) – 鉴定软件（请联系生物梅里埃索取有关资料）– 吸管或PSI管(ref. 70 250)– 矿物油(液体石腊) (ref. 70 100)– 安瓿架 (ref. 70 200)– 无菌棉拭子 (ref. 70 610)– MRS 培养基– 悬液基物2 m l (ref. 70 700) 和5 ml (ref. 20 150)
乳酸杆菌鉴定试剂盒API50CHL操作方法：选取菌落l 检查菌株的纯度。l 接种菌株于MRS培养基上，30或37℃厌氧培养24小时。培养温度取决菌株原来的生长温度。l 检查菌株归属于乳酸细菌群：革兰氏(+)，接触酶(-)，非芽孢厌氧(兼性或专性)的杆菌，能生长在MRS琼脂上。如果使用贮存菌株(干冻或传代培养)在MRS肉汤传代2次后始接种於MRS琼脂。接种物的制备l 用光密度计 ： – 按“警告和注意事项”(无滴头安瓿) 所示，打开API 50 CHL 培养基。– 挑取几个一致的菌落，在API 50 CHL 培养中制得混浊度相当于2 McFarland 的菌悬液。l 不用光密度计：– 按“警告和注意事项”(无滴头安瓿)所示，打开悬液基物(2 ml) 的安瓿或用不含杂质的无菌蒸 馏水试管。– 用无菌棉签挑取培养物上所有的细菌在管中制成浓的菌悬液(S)。– 按“警告和注意事项”(无滴头安瓿) 所示， 打开悬液基物 (5ml) 的安瓿，加入几滴上述浓菌 (S)制得相当于2 McFarland浊度的菌悬液，记录滴数(n)。– 按“警告和注意事项”所示，打开API 50 CHL培养基的安瓿，加2倍(2n)该菌液接种。l 均匀。 试验条的接种l 用巳接种的API 50 CHL 培养基加入验条的管(不加杯)，并用油覆盖所有的测定。l 于30℃或37℃好养培养 48小时。 判读试验条 (见API 50 CH说明书)l 在培养24和48小时后读。l 阳性结果：培养中所含溴甲酚紫指示剂变黄所示的产酸作用。七叶灵测定(25号管)从紫变黑。l 记录于结果报告单。所得该株菌的生化谱可用於：l 用鉴定软件包鉴定菌株。l 根据记录可与已鉴定的种比较。与其它生化谱作分类研究。
跳至内容
