产品名称:STEMCELL Lymphoprep密度梯度分离液
产品货号:07851
英文名称:Lymphoprep Density gradient medium for the isolation of mononuclear cells
产品规格:250ml/500ml
产品介绍:
Lymphoprep™ 是一种密度梯度培养基,推荐用于利用细胞密度的差异从外周血、脐带血和骨髓中分离单核细胞。粒细胞和红细胞的密度高于单核细胞,因此在离心过程中会通过 Lymphoprep™ 层沉淀。Lymphoprep™ 可替代 Ficoll-Paque™,无需更改您现有的方案,并且与 SepMate™ 和 RosetteSep™ *兼容。
Lymphoprep™ 的密度为 1.077 g/mL。
工作原理:
PBMC与血液中的其他成分存在密度差异,利用密度在1.077±0.001g/ml之间而且近于等渗的LymphoprepTM溶液作密度梯度离心时,红细胞和粒细胞由于密度大,故沉于分离液底部。PBMC密度稍低于分离液,故位于分离液界面上,获得PBMC。LymphoprepTM分离液含有多糖(polysacccharide),多糖能粘附在细胞表面,使红细胞和粒细胞聚集下沉,但它对淋巴细胞的活性和红细胞和粒细胞进一步分离有负面影响。
产品参数:
亚型 密度梯度介质
细胞类型 单核细胞
物种 人类
样本来源 骨髓、脐带血、全血
应用 细胞分离
品牌 淋巴制剂
产品组分:
泛影酸钠 (9.1% w/v)
• 多糖 (5.7% w/v)
• 其他成分
产品使用说明
第一步
在含有抗凝剂(EDTA、heparin、或ACD)的管子内收集血液,或者用去纤维蛋白的血液。此处抗凝剂的选择取决于得到淋巴细胞以后,后续实验的要求,一般选取EDTA即可。
第二步
用等体积的0.9%的NaCl溶液(即生理盐水)稀释血液。
第三步
在12-15ml的离心管内,将6ml稀释后的血液铺在3ml分离介质Lymphoprep上。
此处铺层可以采用从上面铺,或从下面铺两种方法。铺层的关键是不能让血液和分离液混在一起,要界面分层清晰。
第四步
在室温下——20摄氏度左右,用水平转子,800g的离心力,离心20分钟。(如果血液存放时间超过2小时——从人体抽出算起,离心时间延长为30分钟)。
第五步
离心前和离心后,离心管内液体分层如下图所示。
离心后,离心管内位于血液和分离液界面处的明显的一层即为淋巴细胞层。
用移液管直接吸取淋巴细胞层,注意,不要去除上面的血液层,而是直接吸取。移至另一离心管中。
第六步
用大约2倍体积的0.9%的NaCl溶液(生理盐水)稀释收集到的淋巴细胞,在250g-300g的离心力下,离心10分钟,(此处在加上稀释液后的体积在15ml离心管内不宜超过5-6ml,体积过大,会降低淋巴细胞的产率),收集沉淀,即得到所需的人外周血单个核细胞,即可用于后续的实验。
产品订购信息:
品牌 货号 名称 规格
STEMCELL 07851 Lymphoprep密度梯度分离液 250ml/500ml
产品名称:STEMCELL Lymphoprep密度梯度分离液
产品货号:07851
关于公司:
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