产品名称:BD stain buffer缓冲液 含BSA 500mL装
产品货号: 554657
英文名称:Stain Buffer (BSA)
产品规格:500 mL
产品品牌:BD
产品简介:
BSA可用于淋巴组织、骨髓、外周血或培养细胞制备的单细胞悬液的免疫荧光染色。药物染色缓冲液(BSA)用于荧光试剂的稀释和应用,以及用于流式细胞术分析(或荧光显微镜)的细胞的悬浮液、洗涤和存储。根据前面对染色培养基的描述,我们将药剂染色缓冲液(BSA)配制成中性pH (pH 7.4)缓冲盐溶液(DPBS),其中添加了0.2% (w/v)牛血清白蛋白(BSA)蛋白。因此,药物染色缓冲液(BSA)旨在维持细胞活力,并最大限度地提高ph敏感荧光色素(如异硫氰酸荧光素(FITC))产生的荧光信号强度。药物染色缓冲液(BSA)对于用生物素化的抗体和荧光标记的亲和素对细胞进行染色是有用的,因为这种染色培养基不含生物素。当游离生物素出现在染色介质中时,它可以干扰荧光亲和素与生物素化抗体的结合,这些抗体与同源的细胞相关抗原结合。此外,游离生物素可以与细胞结合,并有助于增加暴露于荧光偶联亲和素的细胞的非特异性背景染色。药物染色缓冲液(BSA)含有代谢抑制剂NaN3。NaN3抑制抗体交联引起的细胞表面抗原的潜在再分配(例如,由于脱落或内化)。因此,NaN3(与维持低温环境温度相结合)可以防止后续流式细胞分析(或荧光显微镜)中免疫荧光染色细胞产生的荧光信号强度的潜在损失。
产品应用:
流式细胞术(常规检测)、荧光显微镜、细胞内染色(流式细胞术)(发育期间检测)
运输与储存:
保存在4°C未稀释。
推荐的实验流程:
使用Pharmingen染色缓冲液(BSA)对细胞进行直接免疫荧光染色的程序。
1. 使用标准方案从淋巴组织、骨髓、外周血或细胞培养中制备单细胞悬液。
2. 在冷的Pharmingen染色缓冲液(BSA)中清洗细胞两次,并通过离心将细胞制成颗粒(例如,在4°C下300 x g)。Resuspend细胞用冷Pharmingen染色缓冲液(BSA)制成颗粒,最终浓度为2 × 10e7细胞/ml。
3.将50µl等量的细胞悬液(10e6细胞)分配到试管或微孔板的圆底孔中。
4. 在Pharmingen染色缓冲液(BSA)中稀释荧光抗体至预定的最佳浓度,并添加少量的等量(例如,10µl)稀释抗体到含有目标细胞悬液的试管或微孔。在冰上孵育20分钟免受光。染色时间可能增加(≥45分钟)取决于荧光抗体的热情。
5. 用200µl(用于微孔板)或1ml(用于试管)的BSA清洗细胞两次的抗体。每次离心后,小心地抽吸(对于微孔板或微孔管)或将细胞颗粒上清倒置并吸干(管)。
6. 将细胞颗粒重悬在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于管)的Pharmingen染色缓冲液(BSA)中。转移将细胞从微孔板上染色到适当的试管中进行流式细胞分析(将最终体积调整到~0.5 ml)。
7. 染色后尽快(如≤4小时)用流式细胞术或荧光显微镜分析染色后的细胞样本。如果必须延迟分析,然后染色细胞可以用缓冲多聚甲醛固定(例如,Cytofix Buffer和4°C保存(避光)。应尽快对固定的细胞进行分析(如染色和固定后一周)。
注1:Pharmingen染色缓冲液(BSA)同样可以用于细胞的间接免疫荧光染色。在这种情况下,当使用未标记或生物素化一抗时,重复步骤4和步骤5。
注2:Pharmingen污点缓冲区(BSA)也可以用于immunofluorescent染色细胞表面抗原表达的注定要固定和immunofluorescently染色细胞因子等细胞内抗原。在流式细胞术或荧光显微镜分析之前,可在Pharmingen染色缓冲液(BSA)中重悬和维持细胞内细胞因子染色的细胞(例如,在4°C下,保护光线)
产品订购信息:
货号 名称 规格
554657 BD stain buffer 含BSA 500mL
产品名称:BD stain buffer缓冲液 含BSA 500mL装
产品货号: 554657
关于公司:
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