健康人的PBMC细胞接种数量为3×107.根据厂家建议进行细胞培养。使用Coming培养基时,0-5天使用NK活化培养基(Pimany Medium), 6-14天使用NK扩增培养基(NK Expansion Medium添加1000 U/mlu2进行培养。细胞培养至14天收获,进行细胞计数和肿瘤杀伤能力检测。肿瘤杀伤实验使用的靶细胞为K562细胞。
产品名称:Corning NK细胞活化扩增培养套装
产品货号:88-570-CM
产品组分:
NK细胞活化培养基
NK细胞活化添加剂
NK细胞扩增培养基
抗体预包被T75细胞培养瓶细胞培养袋
产品特点:
扩增能力强,在14天内可达到100倍扩增
效应细胞比例高,可达80%
操作方便
产品使用说明:
1.在室温(RT)下将抗凝血液以400xg离心10分钟,然后将等离子体(顶层)转移到新的管中。
2.热自动等离子体在56℃灭活30分钟,然后以800xg离心20分钟以除去沉淀物。上清血浆应储存在4℃,这将在随后的14个培养日内消耗。
3.加入等体积的PBS(不含钙和镁的磷酸盐缓冲盐水),作为去除的自身血浆的替代物,以保持恒定体积并轻轻地重悬血细胞。
4.使用淋巴细胞分离培养基(LSM,Corning目录号25-072-Cl)从上述血液样品中制备外周血单核细胞(PBMC)。
5.用不含钙和镁的至少5倍PBS洗涤PBMC。离心机为500 xg
6.在室温下10分钟收集PBMC。
7.使用含有1.8mL NK Primary补充剂和10%自动等离子体的NK Primary培养基将PBMC稀释至1×10 6个细胞/ mL。
产品名称:Corning NK细胞活化扩增培养套装
产品货号:88-570-CM
关于公司:
Corning康宁在为市场带来产品的过程中,研究人员依靠创新性的工具以降低成本、缩短时间。康宁科学实验室产品改善了生产力,让生物行业的突破性发现成为可能。康宁一直处于上游单一用途技术的前沿.我们的一次性贴壁和悬浮细胞培养产品提供了可靠的,可预测的规模在生物过程和细胞治疗.从流程开发到GMP制造,我们将与您一起开发一个平台,以实现您的目标。配套产品如封闭系统解决方案、介质、先进表面化学、封闭系统容器、介质等,提供完整的解决方案。