产品名称:康为世纪 新型固定组织基因组DNA提取试剂盒
产品货号:CW2646
英文名称:NuClean FFPE DNA kit
产品规格: 200preps
产品介绍:
本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋组织中有效纯化基因组DNA。本品使用专门优化脱蜡剂和裂解液,释放福尔马林固定或组织切片样本中的DNA,不涉及有机试剂二甲苯,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除游离DNA的福尔马林交联,有效提高DNA的产量和纯度;优化的缓冲系统使裂解液中的DNA可特异结合到吸附膜上,抑制剂通过两步漂洗步骤有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。同时配置高效微量吸附柱,洗脱体积可低至20μl。经过纯化的DNA可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP 基因分型、STR基因分型、二代测序和药物基因组学研究等。
从福尔马林固定、石蜡包埋样本中分离的DNA分子量通常低于新鲜或冷冻样本中的DNA。核酸片段化的程度取决于样本类型、储存时间以及固定的条件。
产品组份:
配套试剂:
无水乙醇
产品使用说明:
1.样本处理:
1a.石蜡包埋样本:将组织块中多余的石蜡修剪掉,露出组织后切成5-10 µm的薄片。取约1×1 cm2的切片(共约4-5片切片)置于离心管(自备)中,加入500μl Buffer DS,涡旋震荡10秒。56°C孵育3分钟。12,000 rpm离心2分钟,小心吸弃上清,注意不要吸到沉淀。可用小枪头(10 μl) 小心去除残留的脱蜡液。
1b.福尔马林等固定液中的样本:取约20 mg的样本,切成小块,置于离心管中,加入500 μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡,12,000 rpm(~13,400×g)离心1分钟,弃上清,重复3次。
2.上述管中加入180 μl Buffer GTL,重悬沉淀,加入20 μl Proteinase K,涡旋震荡混匀。
3.56℃孵育1小时,直至样品*溶解。90℃孵育1小时。12,000 rpm离心1分钟,使用200 μl枪头沿管壁小心吸取下层的水相于新的离心管中。
4.加入20ul Proteinase K,65℃,450rpm孵育15 min 。
5.加入200 μl Buffer GL,涡旋震荡混匀后加入200 μl无水乙醇,涡旋震荡*混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底
6.将步骤5所得溶液全部加入已装入收集管的吸附柱(Spin Columns DF)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9.12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以*晾干
10.将吸附柱置于一个新的1.5 ml收集管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-100 μlBuffer EB或灭菌水,室温放置2-5分钟,12,000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
运输与储存:
Spin Columns DF室温下可保存2个月,2-8℃保存1年
其余组分常温 (15-25℃)保存
产品订购信息:
品牌 货号 名称 规格
康为世纪 CW2646S 新型固定组织基因组提取试剂盒 50preps
产品名称:康为世纪 新型固定组织基因组DNA提取试剂盒
产品货号:CW2646