产品名称：Cygnus CHO HCP宿主蛋白残留ELISA试剂盒
产品货号：F550
产品规格：96T/盒
产品品牌：Cygnus
产品简介：
CHO HCP是第三代ELISA试剂盒，比之前试剂盒具有更广泛反应性。新型试剂盒在检测CHO HCPs 蛋白方面有很多改进。新试剂盒具有更高的灵敏度，在抗体物和其它CHO表达蛋白中检测HCP蛋白可以精确到到十亿分之一百。第三代ELISA试剂盒经过大量药物原料和中试样品检测评估，是工艺开发和大量释放试验检测的通用方法。抗体反应性使用传统2D 蛋白杂交技术（2D HPLC-ELISA）鉴定。2D HPLC-ELISA方法显示抗体对超过750种HCPs都具有反应性。用蛋白检测方法和ELISA正交试验表明这750种HCPs相当于98%总蛋白量。因此，这种抗体可以避免丢失任何重要的HCP蛋白。产品使用时一定要做好保护措施：0.5M硫磺酸有强腐蚀性，要避免接触眼睛、皮肤和衣物。检测前所有试剂都要平衡到室温。
产品组份：
● Anti-CHO:HRP（辣根过氧化物酶） 1x12mL F551（Product#）
● Anti-CHO微量滴定板 12×8孔 F552
● CHO HCP标准液（0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL） 1mL/瓶 F553
● Stop Solution终止液（0.5M硫磺酸） 1x12mL F006
● TMB （3,3’,5,5’-四甲基联苯氨） 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物（20倍浓缩） 1x50mL F004
检测原理：
CHO检测是一个双位点酶联免疫检测。样本中包含的CHO HCPs蛋白与标记有抗-CHO抗体的辣根过氧化物酶同时反应，反应发生在之前涂有一层吸附性抗-CHO蛋白抗体的微量滴定板中进行。免疫反构成为夹层式结构：固相抗休-HCP-酶标记抗体。反应结束后清洗微量滴定板去除未结合反应物。添加TMB作用底物反应。微量滴定板读数器上测定水解物浓度，水解物浓度与CHO HCPs蛋白浓度成比例。用提供的标准液绘制标准曲线，根据读数可以计算出CHO HCPs蛋白含量。
检测过程：
取出所有试剂平衡到室温→移取100μl anti-CHO:HRP（#F551）至每孔→分别移取50μl标准液，对照物和样品至待测孔→密封滴定板，摇床室温温育2小时，180rpm→清空小孔，用纸吸干残留液，350μl清洗缓冲液清洗4次→加100μl TMB 作用物（#F005）→室温静置30分钟，不需摇床→加100μl反应终止液（#F006）→分光光度计450/650nm读数
结果分析：
标准液（0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL）可用于制作标准曲线，标准液浓度相当于免疫反应HCP总浓度。根据测定的小孔中标准液吸光值绘制标准曲线。数据分析可以使用计算机选配曲线，例如点到点，三次样本函数，或四参数逻辑曲线。不要使用线性回归分析修改样品吸光值，这样会出现显著误差。也可以手工绘图，Y轴标注吸光值，X轴标注浓度，然后用光滑曲线连接各点。然后根据样品吸光值计算出样品中HCP浓度。（操作时每一浓度标准液都要滴定到两个小孔中，以便计算平均分光光度值，样品也需计算平均吸光值）。
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关于公司：
Cygnus公司专为疫苗生产企业、基因工程药企、研发部门及QA部门提供宿主细胞蛋白残留及生物工艺污染物的ELISA检测试剂盒，诸如特殊重组表达系统中宿主细胞蛋白(Host Cell Protein, HCP)的残留以及生物制品加工过程中培养物残留的污染物(BioprocessContaminant, BC)。
Cygnus technologies, Inc.是美国一家专门从事生物工程和制药过程中残留物检测的一系列产品。生物制品生产过程中存在许多影响产品质量的残留物，诸如特殊重组表达系统中宿主细胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的残留以及生物制品加工过程中培养物残留的污染物。公司提供了广泛而灵敏度*的一系列用于检测生物工程残留物的产品。共有39种Elisa 检测试剂盒，包括原核、真核表达细胞宿主蛋白检测试剂盒，细胞培养残留物检测试剂盒等