特点：
● 特异性的在细胞中线粒体内聚集
● 可以检测线粒体膜内的脂质过氧化物
● 可以在488 nm和535 nm的荧光波长下进行检测
产品概述
MitoPeDPP是一种新型荧光染料，由于其具有三苯基膦结构，因此可以穿过细胞膜并在线粒体中聚集。
聚集在线粒体内膜上的MitoPeDPP可以被脂质过氧化物氧化而释放出强荧光。由于氧化的MitoPeDPP
(Ox-MitoPeDPP) 的激发和发射波长分别是452 nm和470 nm，可以减小样品的光损伤和自发荧光，因此利用
荧光显微镜MitoPeDPP可以检测活细胞中的脂质过氧化物。
特点
1.特异性的在细胞中线粒体内聚集
2.可以检测线粒体膜内的脂质过氧化物
3.可以在488 nm和535 nm的荧光波长下进行检测
* 本产品由福冈大学化学系的Dr. Shioji开发
*由于MitoPeDPP量极少不宜看到，可以通过观察MitoPeDPP DMSO溶液的颜色是否为黄色来判断。
检测原理
MitoPeDPP可以穿过细胞膜并在线粒体中聚集。聚集在线粒体内膜上的MitoPeDPP可以被脂质过氧化物氧化而释放出强荧光。
实验例
1.MitoPeDPP和线粒体染色试剂MitoBright共同染色的实施例
在HeLa细胞中添加t-BHP（氢过氧化叔丁基），检测脂质过氧化物
波长（wavelength/band pass）
MitoPeDPP：470/40（Ex），525/50（Em）
MitoBright DeepRed：600/50（Ex），685/50（Em）
结果证实在HeLa细胞内的线粒体中，MitoPeDPP受t-BHP氧化后会发出荧光。另外通过与线粒体染色试剂（MitoBright Deep Red:MT08）的共染色，确认了MitoPeDPP的荧光是定位在线粒体中。
2.检测添加Rotenone产生的脂质过氧化物
向HeLa细胞[μ-slide，8孔（由Ibidi制造）]中添加MitoPeDPP之后，添加Rotenone溶液并使用荧光显微镜观察。实验结果证实，添加Rotenone后，检测到细胞中产生了脂质过氧化物。
Rotenone的刺激时间：0 min(左)，90 min(中)，180 min(右)
上部）荧光图，下部）明场图
3.神经细胞使用MitoPeDPP的实验例
A.荧光显微镜检测
向NIE-115细胞（小鼠神经芽细胞瘤）添加异黄素，诱导Ca2+流入细胞内，并通过MitoPeDPP的荧光染色来观察线粒体膜内的脂溶性过氧化物的产生。实验结果证实添加了异霉素的实验组相比对照组来说荧光更强。
B. 平均荧光强度数据比较
为了量化对照组细胞和添加了离子霉素的细胞的荧光强度，对两组数据进行基于平均荧光强度的比较。
结果证实，加入离子霉素后30分钟的细胞对比对照组的细胞，观察到的荧光强度显着增加。
数据提供（Free Radical Research, in press)
参照芝浦工业大学系统理工学院 福井浩二副教授、中村沙希[参考文献3]
4.MitoPeDPP反应的选择性
在不含细胞的反应体系中，MitoPeDPP可以与各种过氧化物如H2O2，t-BHP和ONOO- 反应，但是在细胞中，积
累在线粒体中的MitoPeDPP可以被t-BHP氧化而释放出较强荧光 (图3A)，却和其它ROS或RNS反应很弱 (图3B)。
A) 在HepG2细胞中加入MitoPeDPP培养15 min，然后用100 μmol / l的t-BHP处理。
B) 在HepG2细胞中加入MitoPeDPP培养15 min后，加入ROS、RNS诱导剂。
分别加入100 μmol / l (H2O2，NO和ONOO-诱导剂)和10 μmol / l PMA（O2-.诱导剂） 。
左边为明场图，右边为荧光图
* t-BHP：tert-Butylhydroperoxide; PMA, Phorbol myristate acetate;
SIN-1, 3-(Morpholinyl)sydnonimine, hydrochloride;
NOC 7, 1-Hydroxy-2-oxo-3-(N-methyl-3-aminopropyl)-3-methyl-1-triazene
波长/带通滤波器：470/40 (Ex), 525 /50 (Em)
