Luna® Cell Ready 裂解模块
#E3032S 100 rxns
特性
概述
细胞培养常用于替代活体生物来分析基因表达或对治疗的反应。传统上使用柱提法或化学试剂法从处理过的细胞中提取和纯化 RNA.Luna Cell Ready 裂解模块无需进行传统的 RNA 提取步骤即可评估RNA表达水平，是一种快速、方便且灵敏的替代方案。该模块可同时进行细胞裂解、RNA 释放、基因组 DNA 去除，获得的细胞裂解物可直接使用Luna通用一步法 RT-qPCR 试剂盒进行 RT-qPCR 分析。与其它 Luna 产品一样，裂解缓冲液包含惰性蓝色示踪染料，使整个加样流程可视化。
下表列出的细胞系可使用 Luna Cell Ready 裂解模块裂解。这些细胞进行 5 log 梯度稀释（100000-10 细胞/50 µl 裂解反应），并取 1 ul 裂解产物进行 20 µl 体系的一步法 RT-qPCR 反应。每个细胞系的线性结果区域显示在最后一列。此外，经测试一些昆虫细胞系也能用上述裂解液裂解。
表一：经验证过的细胞系
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细胞系 |
特性 |
菌种 |
50 ml 裂解体系中的细胞数量 |
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A549 |
Adherent |
H. sapiens, Lung, carcinoma |
10 – 100,000 |
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HEK293 |
Adherent |
H. sapiens, Kidney |
10 – 100,000 |
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HeLa |
Adherent |
H. sapiens, Cervix, adenocarcinoma |
10 – 100,000 |
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HepG2 |
Adherent |
H. sapiens, Liver, carcinoma |
10 – 100,000 |
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NCI-H460 |
Adherent |
H. sapiens, Lung, carcinoma |
10 – 100,000 |
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SK-N-SH |
Adherent |
H. sapiens, Brain, Neuroblastoma |
10 – 100,000 |
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U2Os |
Adherent |
H. sapiens, Bone, osteosarcoma |
10 – 10,000 |
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Jurkat |
Suspension |
H. sapiens, T lymphocyte, leukemia |
10 – 100,000 |
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K-562 |
Suspension |
H. sapiens, Lymphoblast, leukemia |
10 – 1,000 |
图一：Luna Cell Ready 一步法 RT-qPCR 实验流程
Luna Cell Ready 裂解模块整合了 DNase I 和 Luna Cell Ready 蛋白酶的功能，可简单高效的进行细胞裂解，仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除。2 µl 裂解产物（相当于 0.2–4000 个细胞中的 RNA）即可实现 20 µl 体系的 RT-qPCR 反应。
试剂盒组分
随该产品提供的试剂
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储存（°C） |
浓度 |
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Luna Cell Ready Lysis Buffer |
-20 |
2 X |
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Luna Cell Ready RNA Protection Reagent |
-20 |
25 X |
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Luna Cell Ready Protease |
-20 |
25 X |
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Luna Cell Ready Stop Solution |
-20 |
10 X |
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DNase I （RNase-free） |
-20 |
10 X |
实验需要但不提供的试剂耗材
- 磷酸盐缓冲液（PBS）
- 目标特异性引物
- 细胞
- Eppendorf 管
- PCR 联管
- PCR 板
- 移液器和枪头（为减少交叉污染，应使用带滤芯的枪头）
储存温度
-20℃